健胃散對胃黏膜損傷的保護作用及對胃腸道蠕動的推進作用△

呂曉，黃先菊，王大貴，郭燕燕，楊忍

中南民族大學 藥學院，湖北 武漢 430074

近幾十年來，飲酒人群大幅上升，急性酒精性胃黏膜損傷發病率隨之升高。研究顯示，經口攝入高濃度乙醇可直接侵蝕胃黏膜組織，引起胃黏膜屏障受損，胃黏膜急性炎癥，出現胃黏膜充血、水腫、出血、糜爛及潰瘍形成等癥狀[1]。短時間內大量飲酒可引起幽門痙攣，延長胃的排空時間，引起惡心、嘔吐等癥狀，胃鏡下常表現為急性出血糜爛胃炎。

乙醇不僅可直接作用于胃黏膜造成其表層損傷，而且能夠削弱胃黏膜防御因子的保護作用，是不容忽視的強烈的致傷性胃黏膜攻擊因子。預防和治療胃黏膜損傷的相關研究日益受到研究學者的廣泛關注[2]。根據中醫理論指導，健胃散由雞內金、海螵蛸、三七、黃芪等中藥材組成處方，相輔相成，共同發揮療效，對無水乙醇作用導致的胃黏膜損傷有良好的預治療作用，增強胃黏膜的自我保護功能，并有促進胃腸蠕動的作用，促進消化，減少胃內不良影響物的停留時間。

在本次實驗中，對健胃散能保護胃黏膜以及促進胃腸蠕動進行實驗驗證。

1 材料和儀器

1.1 動物

SPF級KM小鼠，體質量(22±5)g，由湖北省實驗動物研究中心提供，許可證號：SCXK(鄂)2016-0089。

1.2 藥品和試劑

呂氏健胃散(由雞內金、三七、黃芪、海螵蛸等10味藥物組方而成)。將藥材粉碎成散劑，4 ℃下貯存備用。實驗時以蜂蜜+純化水配置成混懸液使用。無水乙醇，國藥集團化學試劑有限公司產品(批號：20170605)；通用型組織固定液(4%多聚甲醛、PB緩沖液)武漢博爾夫生物科技有限公司；生理鹽水，武漢濱湖雙鶴藥業有限責任公司(批號：1705030804)。碳末混懸液。

1.3 實驗儀器

手術剪、鑷子、游標卡尺、直尺、1 mL注射器。

2 方法

2.1 胃黏膜損傷實驗

選取檢疫合格的KM小鼠30只，適應性喂養3天后，雌雄各半隨機分為空白對照組、模型組、低劑量組、中劑量組、高劑量組，每組6只。空白對照組和模型組連續5 d每天灌胃0.2 mL/10 g生理鹽水，健胃散成人日用劑量為6～9 g/60 kg，小鼠用量為人的10倍，最低劑量設為成人用量6 g/60 kg的10倍；中劑量設為成人用量9 g/60 kg的10倍；最高劑量設為成人用量9 g/60 kg的15倍。給藥組連續5d每天按計劃量灌胃給藥，喂養至第5 d時所有組進行禁食不禁水24 h后，除空白對照組外，其余組灌胃給予無水乙醇0.1 mL/10 g，1 h后處死動物，暴露完整胃，結扎幽門，灌注適量10%甲醛溶液，固定20 min，然后沿胃大彎剪開，洗凈胃內容物，展開胃黏膜，用游標卡尺測量出血點或出血帶的長度和寬度。

2.2 胃腸道推進實驗

選取檢疫合格的KM小鼠24只，適應性喂養3 d后，雌雄各半隨機分為空白對照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組，每組6只。禁食不禁水8 h后給藥一次。空白對照組灌胃0.2 mL/10 g生理鹽水，給藥組給藥量同上。30 min后，每組灌胃給予碳末混懸液0.2 mL，20 min后，脫頸椎處死，立即剖開腹腔，分離腸系及幽門，測出幽門至碳末距的長度和小腸的總長度，求得二者的比值為推進率。

2.3 觀察指標及檢測方法

2.3.1 動物生長情況觀察 實驗期間觀察動物精神、活動、毛色、進食、飲水等生理情況。實驗結束時記錄體質量的變化。

2.3.2 各實驗組胃黏膜損傷程度 以損傷發生率、損傷積分指數和損傷抑制率表示。

(1)

(2)

(A、B分別為模型組與試驗組的損傷積分)

(3)

2.3.3 各實驗組胃腸推進結果檢測 通過測量小腸的總長度和幽門至碳末距的長度，求出推進率來觀測藥品對小鼠胃腸的推進作用。

(4)

2.4 統計方法

3 結果

3.1 動物一般身體情況觀察

各組小鼠在飼養期間均精神狀態良好，反應靈敏，行動自如，皮毛光澤油亮，體質量變化不明顯。

3.2 健胃散對小鼠體質量的影響

各組KM小鼠實驗期間體質量變化情況見表1。如表1所示，在本實驗室條件下，健胃散對小鼠的生長無顯著影響。

表1 小鼠試驗期間體質量變化情況

3.3 健胃散對無水乙醇所致胃黏膜損傷的影響

無水乙醇損傷1 h后，解剖各小鼠胃部，肉眼可見對照組小鼠胃黏膜光滑完整，沒有出血現象。其余各組小鼠均出現了黏膜出血、組織壞死。模型組動物損傷最為嚴重，表現為大塊的出血面積，呈鮮紅色。高、中、低劑量給藥組則表現為點狀或條狀出血，出血面積明顯縮小(圖1)。根據評分標準計算各組動物損傷評分(表2，圖2)。空白組小鼠沒有發生損傷(損傷發生率為0)，低劑量組和中劑量組的胃黏膜損傷發生率均為100%，高劑量組損傷發生率為40%。胃保護產品各個劑量組損傷抑制率分別為低劑量組50%，中劑量組62.5%，高劑量組90%，結果證實胃保護產品對胃黏膜損傷的保護具有劑量依賴性。健胃散可劑量依賴性地減輕無水乙醇所致的胃黏膜損傷。減輕胃黏膜損傷程度，具有良好的胃黏膜保護作用。

表2 各組動物胃黏膜損傷評分情況

注：—表示不需要計算損傷抑制率。

注：***表示與模型組比較，P<0.01。圖2 各組小鼠胃黏膜損傷積分比較

3.4 健胃散對無水乙醇所致胃病理組織學影響

通過出血點計算損傷抑制率及病理組織學分析可發現胃保護產品各個劑量組對胃黏膜損傷的保護效果均顯著，可有效降低無水乙醇造成的急性胃黏膜損傷，并且作用具有劑量依賴性。病理學檢查結果與肉眼大體觀察結果一致(圖3)，對照組動物組織整體結構基本正常，黏膜層無明顯壞死及變形，組織無明顯炎癥。模型組動物胃黏膜損傷最為嚴重。組織整體結構重度異常，黏膜層廣泛糜爛壞死，并可見大量紅細胞，如紅色箭頭所示；黏膜下層重度水腫，如黑色箭頭所示。健胃產品各個給藥組對胃黏膜損傷均有改善作用，且呈現劑量依賴性(圖3)。低劑量組動物胃組織整體結構中度異常，黏膜層可見上皮細胞點狀壞死，并可見少量出血，如黑色箭頭所示；黏膜層可見少量炎癥細胞浸潤，炎癥細胞以中性粒細胞為主，如黃色箭頭所示；黏膜下層可見水腫，如紅色箭頭所示。黏膜層部分動脈可見充血，如綠色箭頭所示。中劑量組組織整體結構輕度異常，黏膜層結構基本正常，黏膜上皮無明顯壞死變性；黏膜下層輕度水腫，部分腸壁脫落，如黑色箭頭所示。黏膜層部分動脈可見充血，如紅色箭頭所示。高劑量組組織整體結構輕度異常，黏膜層無明顯壞死及變形；黏膜下層可見輕度水腫，如黑色箭頭所示；組織無明顯炎癥細胞浸潤。

注：A.對照組；B.模型組；C.低劑量組；D.中劑量組；E.高劑量組；圖中箭頭指向出血位置。圖1 各組動物胃解剖圖

注：A.對照組；B.模型組；C.低劑量組(0.6 g·kg-1×10)；D.中劑量組(0.9 g·kg-1×10)； E.高劑量(0.9 g·kg-1×15)組。圖3 各組動物胃黏膜病理圖

3.5 健胃散對胃腸道推進的作用

一種物質如果能加速腸道的蠕動，則性能加速小腸的推進運動，從而促進倡導腸道內容廢物的排空速度，減少代謝廢物在腸內的停留時間，即減少廢物，有害物對腸道的惡性刺激時間，從而對腸道起到保健作用[7-9]。在本實驗室條件下，從實驗數據可看出，空白組小鼠推進率為37.96%，健胃散各個劑量組推進率分別為低劑量組63.9%，中劑量組58.2%，高劑量組57.5%，結果證實健胃散對胃腸有推進作用并且作用不具有劑量依賴性。但三個給藥組的推進率都大于生理鹽水組，且各個給藥組與對照組相比存在顯著差異(P<0.01)說明此藥有推進胃腸蠕動的作用，結果證實胃保護產品對胃腸道的推進作用但不具有劑量依賴性。結果見表3及圖4。

表3 各組動物胃腸推進情況總析

注：**表示與對照組比較，P<0.01。圖4 各組胃腸推進率比較

4 討論

健胃散中的主要成分黃芪含有黃芪總苷，研究發現黃芪總苷具有保護胃黏膜屏障，維持組織結構完整性，調節整體胃酸分泌重要作用[3]；主要成分雞內金可激活保護胃黏膜相關因子，改善胃黏膜損傷引起的不適，調整胃腸功能[4-5]；主要成分海螵蛸性咸、澀、微溫，具有收斂止血、制酸止痛等功效[6]；主要成分三七中含有人參皂苷，可抗炎止血[7]，對胃黏膜損傷導致的出血有止血的功效；配方中大黃含有蒽醌類生物活性成分，具有瀉下作用，少量的大黃能促進胃排空。健胃散中的各成分相輔相成，共同發揮保護胃黏膜的作用，我們對其中的保護機制將進一步探究。