血管緊張素轉(zhuǎn)換酶基因多態(tài)性與血壓鹽敏感性及左室肥厚的相關(guān)性

王若琦 陸軍成 黎芳 黃妮 梁雪玲 馬麗潔 潘征

(右江民族醫(yī)學(xué)院 1臨床學(xué)院心臟內(nèi)科,廣西 百色 533000；2基礎(chǔ)學(xué)院)

腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)(RAAS)是體內(nèi)維持水鹽代謝和調(diào)控血壓的最重要系統(tǒng)，血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)是RAAS的主要活性成分，ACE基因插入/缺失(I/D)多態(tài)性被認(rèn)為可能與高血壓的易感性和靶器官損傷等存在相關(guān)性。血壓的鹽敏感性(SS)〔1，2〕和左室肥厚(LVH)〔3，4〕都是高血壓發(fā)生發(fā)展的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，與高血壓的預(yù)后密切相關(guān)，明確ACE基因I/D多態(tài)性與兩者的相關(guān)性有助于更加深入理解兩者的發(fā)生機(jī)制，制定相應(yīng)的治療方案。本研究按照是否存在SS及LVH將壯族高血壓患者分組，分別檢測(cè)ACE基因I/D多態(tài)性，探討ACE基因I/D多態(tài)性與SS和LVH的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1一般資料 2014年12月至2017年12月在右江民族醫(yī)學(xué)院臨床學(xué)院心臟內(nèi)科住院治療，資料齊全，年齡18～80歲，同意參與研究的壯族高血壓患者為篩查對(duì)象。排除存在繼發(fā)性高血壓、嚴(yán)重肝腎功能不全、腦血管意外等疾病及不愿意參與研究者。根據(jù)冷加壓試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果分為鹽敏感組60例，男32例，女28例，年齡53～71歲，平均(62.78±9.35)歲；鹽不敏感組60例，男30例，女30例，年齡51～74歲，平均(61.54±8.28)歲。根據(jù)LVH的檢測(cè)結(jié)果分為L(zhǎng)VH組81例，男40例，女41例，年齡55～74歲，平均(64.03±8.47)歲；無(wú)LVH組39例，男22例，女17例，年齡51～72歲，平均(62.88±9.10)歲。各組性別和年齡等方面的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。所有研究對(duì)象進(jìn)入研究前告知研究的性質(zhì)和內(nèi)容，簽署知情同意書(shū)。

1.2研究方法

1.2.1基線調(diào)查 調(diào)查研究對(duì)象的人口學(xué)信息、疾病史和家族史等。

1.2.2臨床資料 規(guī)范測(cè)量身高和體重，以電子血壓計(jì)規(guī)范測(cè)量收縮壓(SBP)和舒張壓(DBP)，以全自動(dòng)生化儀檢測(cè)肝功能、腎功能、血糖和血脂等生化指標(biāo)。

1.2.3LVH的檢測(cè) 采用飛利浦彩色多普勒超聲診斷儀檢測(cè)，由固定的技術(shù)人員操作，測(cè)量左房前后徑(LAD)、右房前后徑(RAD)、左心室舒張末徑(LVDd)、左室收縮末期內(nèi)徑(LVDs)、右室舒張末期內(nèi)徑(RVDd)、室間隔厚度(IVS)、左室后壁厚度(PW)和左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)。按照Devereux校正公式計(jì)算左室重量LVM(g)=0.8×1.04×〔(LVDd+IVS+PW)3-LVDd3〕+0.6,體表面積(BSA)=0.006 1×身高+0.012 8×體重-0.152 9。左室重量指數(shù)(LVMI)(g/m2)=LVM/BSA，以LVMI>125 g/m2(男)，>110 g/m2(女)為L(zhǎng)VH診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.4SS的檢測(cè)和判斷 目前尚無(wú)統(tǒng)一規(guī)范的方法和標(biāo)準(zhǔn)判定血壓的SS。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外有研究提出，冷加壓試驗(yàn)可作為可靠并且相對(duì)簡(jiǎn)單的方法檢測(cè)SS〔5，6〕，故本研究采用冷加壓試驗(yàn)檢測(cè)和判斷SS。即測(cè)量基線血壓值，然后將受試者的手掌置于冰水混合物中，計(jì)時(shí)60 s，以試驗(yàn)后SBP、DBP和平均動(dòng)脈壓中任一項(xiàng)最高值較基礎(chǔ)血壓值升高15 mmHg為陽(yáng)性，反之為陰性。

1.2.5基因多態(tài)性檢測(cè) 根據(jù)全基因組關(guān)聯(lián)研究的相關(guān)結(jié)果和HapMap及dbSNP數(shù)據(jù)，并且參考相關(guān)文獻(xiàn)〔7，8〕進(jìn)行檢測(cè)。常規(guī)抽取靜脈血5 ml，乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝，低滲分離白細(xì)胞，提取基因組DNA。Gen-Bank進(jìn)行引物檢索驗(yàn)證。ACE基因引物序列：上游：5′-CTG GAG ACC ACT CCC ATC CTT TCT-3′，下游：5′-GAT GTG GCC ATC ACA TTC GTC AGAT-3′。反應(yīng)條件：95℃預(yù)變性5 min，94℃變性30 s，62℃退火30 s，72℃延伸30 s，40個(gè)循環(huán)，72℃再延伸5 min。產(chǎn)物用1.5%瓊脂糖凝膠電泳判定基因型，出現(xiàn)490 bp和190 bp區(qū)帶者為ID型，只有490 bp區(qū)帶者為II型，只有190 bp區(qū)帶者為DD型。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS17.0軟件，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料組間比較采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1鹽敏感組與鹽不敏感組的心臟結(jié)構(gòu)指標(biāo)比較 見(jiàn)表1。鹽敏感組和鹽不敏感組LVDs、LVDd和LVMI比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。兩組LAD、RAD、LVEF、RVDd差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。

2.2LVH組與無(wú)LVH組心臟結(jié)構(gòu)指標(biāo)比較 見(jiàn)表2。LVH組和無(wú)LVH組LAD、LVDs、LVDd、LVMI和LVEF比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。兩組RAD和RVDd的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表1 鹽敏感組與鹽不敏感組的心臟結(jié)構(gòu)指標(biāo)比較

與鹽不敏感組對(duì)比：1)P<0.05

表2 LVH組與無(wú)LVH組心臟結(jié)構(gòu)指標(biāo)比較

與無(wú)LVH組比較:1)P<0.05；表4同

2.3鹽敏感組與鹽不敏感組ACE基因I/D多態(tài)性檢測(cè)結(jié)果 見(jiàn)表3。兩組DD、ID、II型分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.4LVH組與無(wú)LVH組ACE基因I/D多態(tài)性檢測(cè)結(jié)果 見(jiàn)表4。兩組II型和ID型分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，LVH組DD基因型頻率明顯高于無(wú)LVH組(P<0.05)。

表3 鹽敏感與鹽不敏感組ACE基因I/D多態(tài)性檢測(cè)結(jié)果〔n(%),n=60〕

表4 LVH組與無(wú)LVH組ACE基因I/D多態(tài)性檢測(cè)結(jié)果〔n(%)〕

3 討 論

高血壓是遺傳因素和環(huán)境因素相互作用的結(jié)果，是涉及多因素與多器官的復(fù)雜心血管綜合征，是全世界都必須面對(duì)的重大公共衛(wèi)生問(wèn)題〔9〕。《中國(guó)高血壓防治指南》和《中國(guó)心血管健康指數(shù)(2017)》都指出我國(guó)高血壓患者已超過(guò)2.7億，成為我國(guó)最重要的心血管病危險(xiǎn)因素〔10〕。

RAAS是血壓調(diào)控最重要的系統(tǒng)，循環(huán)或局部的RAAS異常可通過(guò)影響水鹽代謝和交感神經(jīng)系統(tǒng)等導(dǎo)致水鈉潴留、血管收縮，增加交感神經(jīng)遞質(zhì)釋放和增強(qiáng)特異性受體的活性等，從而升高血壓。因此，對(duì)RAAS相關(guān)基因的研究是高血壓研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)，其中ACE基因是研究最廣泛的部分。ACE基因位于17號(hào)染色體長(zhǎng)臂第23區(qū)，其中第16內(nèi)含子存在一段DNA片段的I/D多態(tài)性，對(duì)ACE基因I/D多態(tài)性等研究較多。但不同的研究結(jié)果目前仍有爭(zhēng)議，尚無(wú)明確結(jié)論〔11～13〕。

鹽是高血壓最重要的環(huán)境相關(guān)因素。SS是包括人類在內(nèi)的哺乳動(dòng)物共有的生物學(xué)特點(diǎn)。不同的人對(duì)鹽負(fù)荷存在不同的血壓反應(yīng)，血壓可在鹽負(fù)荷后呈現(xiàn)出相應(yīng)升高或者降低等改變。鹽負(fù)荷后血壓隨之升高，鹽耗竭后血壓隨之降低者為SS，而對(duì)鹽負(fù)荷反應(yīng)不敏感者為鹽不敏感或者稱為鹽抵抗〔1，14〕。作為高血壓的中間型和特殊類型，血壓的SS是高血壓患者心血管事件的獨(dú)立危險(xiǎn)因子，在美國(guó)高血壓學(xué)會(huì)(ASH)頒布的高血壓新定義中被確立為高血壓早期損害的標(biāo)志〔14，15〕。

LVH是心室壁增厚、心肌重量增加和心肌重塑的心肌變化現(xiàn)象，是高血壓重要的靶器官損害，是心力衰竭、心腦血管病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。臨床上有超過(guò)30%的高血壓患者可能發(fā)生LVH，并且其發(fā)生率與高血壓嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。高血壓伴L(zhǎng)VH的加權(quán)危險(xiǎn)將會(huì)加劇并促進(jìn)心腦血管病的發(fā)生和進(jìn)展〔3，11〕。本研究結(jié)果顯示，壯族高血壓人群中ACE基因I/D多態(tài)性與血壓的SS無(wú)顯著關(guān)聯(lián)，而與LVM存在相關(guān)，與本課題組前期的研究和既往的相關(guān)研究結(jié)論相似〔16，17〕。

心室質(zhì)量受許多因素的影響，其中重要的是血壓，同時(shí)也強(qiáng)烈受到遺傳因素的影響，多種因素可以誘導(dǎo)心臟質(zhì)量增加和室壁增厚，進(jìn)而導(dǎo)致心室重構(gòu)和心力衰竭等〔3，18〕。我們認(rèn)為，ACE基因I/D多態(tài)性可能在LVM發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用，與II基因型相比，DD基因型可能通過(guò)增加RAAS的神經(jīng)遞質(zhì)釋放和增加神經(jīng)激素反應(yīng)性等機(jī)制增加高血壓LVH的風(fēng)險(xiǎn)。因此，對(duì)高血壓患者盡早進(jìn)行ACE基因I/D多態(tài)性檢測(cè)，盡早發(fā)現(xiàn)高危人群，盡早積極干預(yù)治療有助于將高血壓防治戰(zhàn)線前移，延緩甚至逆轉(zhuǎn)靶器官損傷，降低心血管事件及死亡風(fēng)險(xiǎn)，改善預(yù)后，具有重大的理論意義和現(xiàn)實(shí)價(jià)值。