重組人促紅細胞生成素對早產貧血患兒神經行為發育和外周血白細胞介素表達的影響*

何興宇，邊朋，張怡

(冀中能源峰峰集團有限公司總醫院北院區新生兒科，邯鄲 056201)

促紅細胞生成素(erythropoietin，EPO)是一種主要是由腎臟和肝臟分泌的活性糖蛋白，可以通過與紅細胞上特異性EPO受體結合，從而促進紅細胞增殖、分化、成熟[1-2]。重組人促紅細胞生成素(recombinant human erythropoietin，rhEPO)具有促進紅系造血祖細胞的分化、促進紅細胞生成的作用，還是一種神經營養因子，可改善由多種原因所導致的腦損傷，可改善腦損傷導致的認知學習損害、神經行為發育障礙[3]。對于臨床早產兒貧血情況以往通常多采用補充鐵劑治療，但隨著醫學技術的進步，rh-EPO已成為治療新生兒貧血的新方法。目前國內外研究中rh-EPO對于外周血單核細胞IL-17和IL-23的表達影響的研究較少，因此，2015年7月—2017年9月本研究通過對rh-EPO治療后的患兒的外周血單核細胞IL-17和IL-23表達的變化，來探究其關聯性，報道如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料 納入標準：胎齡<37周；出生體質量1000～2000 g；頭圍<33 cm；頭顱B超檢查有腦損傷。排除標準：合并先天性心臟病；感染性疾病；研究前使用過rh-EPO治療；不符合早產兒診斷標準。選取我院收治的早產兒64例作為研究對象。所有患兒均符合《實用新生兒學》[4]中早產兒貧血診斷指標：生后 2 周內，末梢血血紅蛋白(hemoglobin，Hb)≤145 g·L-1；生后 2 周至 1 個月，末梢血Hb<110 g·L-1;出生 1 個月后，末梢血Hb<90 g·L-1。其中男41例，女23例；胎齡28～35周，平均(31.2±2.3)周；體質量1510～1913 g，平均為(1732±180) g。將64例患兒簡單隨機分配為治療組與對照組，每組32例。兩組患兒性別、年齡、體質量等差異無統計學意義，具有可比性。本研究已通過我院倫理委員會批準，患兒家屬均知情同意。

1.2治療方法 兩組患兒均給予常規治療，常規治療包括維持水、電解質酸堿平衡，維持溫度、呼吸和營養支持，并在出生后2～3 d給予腦活素2 mL·d-1，10 d為一個療程。對照組在常規治療的基礎上，于出生后第10天開始服用琥珀酸亞鐵(四川奧邦藥業有限公司，批準文號：國藥準字H20083003)，根據元素鐵6 mg·kg-1·d-1計算，并口服維生素C(四川衣科制藥有限公司，批準文號：國藥準字H51020297)0.2 g·d-1、維生素E(華潤雙鶴藥業有限公司，批準文號：國藥準字H11022348)25 mg·d-1。治療組在對照組治療的基礎上皮下注射rh-EPO(沈陽三生制藥有限公司，批準文號：國藥準字201112186S)500 U·kg-1，每周3次。兩組患兒治療時間均為5周。

1.3觀察指標 新生兒神經行為評定[5](neonatal neurobehavioral assessment，NBNA)：NBNA評分表共20個項目，每項最高2分，最低0分，總分為40分，當評分<35分時，提示新生兒有腦損傷。共分為5個部分，①行為能力，②被動肌張力，③主動肌張力，④原始反射，⑤一般估價。

Gesell發育量表[6]：評分包括粗大運動、精細運動、適應性行為、語言、個人社會性行為五項。

Apgar量表[7]：評分包括肌張力、脈搏、皺眉動作、外貌、呼吸五項，滿10分為正常新生兒，小于7分考慮新生兒有輕度窒息，小于4分考慮患有重度窒息。

外周血IL-17、IL-23含量的檢測：治療前與治療后4周抽取患兒空腹靜脈血2 mL，置于抗凝管中，離心取上層清液，采用RT-PCR檢測所有患者治療前后外周單核細胞IL-17 mRNA和IL-23 mRNA相對表達量。

1.4統計學方法 采用SPSS 20.0版軟件對數據進行分析。計量資料采用均數±標準差表示，組間均數比較采用t檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1兩組患兒一般資料的對比 兩組患兒一般資料對比差異無統計學意義，研究具有可比性。見表1。

2.2兩組患兒治療前、治療后4周神經行為發育情況比較 治療組與對照組在治療前NBNA評分差異無統計學意義(P>0.05)，治療組與對照組治療后4周均比治療前NBNA評分高，差異有統計學意義(P<0.05)，治療組治療后4周NBNA評分高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

2.3兩組患兒治療后12周Gesell發育量表比較 兩組患兒治療后4個月Gesell評定顯示，治療組粗大運動、精細運動、適應性行為、語言、個人—社會性行為得分均高于對照組，差異具有統計學意義(P<0.05)。見表3。

2.4兩組患兒治療前、治療后4周IL-17 mRNA和IL-23 mRNA相對表達量的比較 兩組患兒治療前IL-17 mRNA和IL-23 mRNA相對表達量比較差異無統計學意義(P>0.05)，治療后4周治療組與對照組前IL-17 mRNA和IL-23 mRNA相對表達量均低于治療前，差異有統計學意義(P<0.05)，治療組治療后4周IL-17 mRNA和IL-23 mRNA相對表達量均低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表4。

3 討論

3.1我國早產兒情況及早產兒貧血的治療措施 早產兒是指胎齡小于37周的活產嬰兒，其出生體質量大部分<2500 g，頭圍<33 cm。我國早產兒的發生率為9.9%，病死率為12.7%～20.8%，新生兒早產已發展成為我國新生兒死亡最主要原因。貧血是早產兒出生后最常見的并發癥之一，貧血的發生率隨著早產兒胎齡的減小而逐漸升高，胎齡越小，出現貧血的概率越高[8]。貧血會對早產兒生長發育造成巨大的影響，長時間貧血會使早產兒大腦缺血缺氧，從而導致腦損傷。目前臨床上的治療方法主要是以促紅細胞生成素及鐵劑類藥物的使用為主[9]。早產兒EPO水平低是造成貧血的主要原因，臨床上使用rh-EPO能有效解決早產兒的貧血情況。

表1 兩組患兒一般資料比較

Tab.1Comparisonofgeneraldatabetweentwogroupsofinfants

組別性別男女出生體質量/g胎齡/周Apgar評分1 min5 min對照組21111670.4±127.833.1±1.57.4±1.48.5±1.1治療組20121641.2±125.432.4±1.47.4±1.38.5±1.0

表2 治療前后兩組患兒NBNA評分比較

Tab.2ComparisonofNBNAscoresbetweentwogroupsofinfantsbeforeandaftertreatment

分，

與對照組比較，*1P<0.05

Compared with control group，*1P<0.05

表3 兩組患兒治療后12周Gesell發育量表評分比較

Tab.3ComparisonofGeselldevelopmentscalebetweentwogroupsofinfantsat12weeksaftertreatment

分，

表4 兩組患兒外周血IL-17和IL-23相對表達量比較

Tab.4ComparisonofIL-17andIL-23relativeexpressioninperipheralbloodbetweentwogroupsofinfants

組別與時間IL-17IL-23對照組 治療前0.5±0.10.4±0.1 治療后4周0.4±0.10.2±0.11治療組 治療前0.5±0.10.4±0.1 治療后4周0.2±0.1?10.1±0.1?1

與對照組比較，*1P<0.05

Compared with control group，*1P<0.05

3.2rh-EPO對早產貧血患兒神經行為發育的影響 近年來，大量研究顯示，EPO不僅可以用于治療早產兒貧血，而且對中樞神經系統具有神經保護的作用[10-12]。董海鵬等[13]通過對胎齡<34周，出生體質量<2500 g的腦損傷早產兒194例研究發現，早產兒血清EPO水平越低，腦損傷的發生率越高，EPO對神經系統具有一定的保護作用，但EPO對神經系統保護作用的具體機制尚未明確。本研究結果顯示，rh-EPO治療后患兒NBNA評分要高于未經rh-EPO治療的患兒，差異有統計學意義，這說明rh-EPO的使用有助于患兒神經行為發育，對患兒腦損傷有一定的保護作用。在本研究中，兩組患兒在治療后12周Gesell量表評分顯示，治療組粗大運動、精細運動、適應性行為、語言、個人-社會性行為得分均高于對照組，差異有統計學意義，這表明了rh-EPO對缺血缺氧所導致的神經系統發育損傷有一定的修復作用，可改善神經元功能[14～16]。有研究發現，新生小白鼠經過多次使用EPO可改善缺血缺氧后的神經發育問題，預防因缺血缺氧腦損傷所引起的多巴胺通路神經元消耗[17]。相關研究認為，EPO可通過減輕腦水腫程度、促進血管再生等發揮保護神經的作用[18]。

綜上所述，rh-EPO有助于貧血早產兒神經行為的發育，對腦損傷有一定的保護作用，可降低IL-17，IL-23促炎細胞因子的表達。