抗腫瘤藥物Rigosertib研究進展

王濤，彭濤，溫曉雪，王剛，張首國，王林

1.北京工業大學 生命科學與生物工程學院，北京 100124；2.軍事科學院 軍事醫學研究院 輻射醫學研究所，北京 100850

Rigosertib（ON 01910.Na）是由 Onconova Ther?apeutics 公司研發的小分子抗腫瘤藥物（商品名：Estybon），能引起腫瘤細胞中心體和多級紡錘體異常，導致紡錘體和染色體集合不穩定，使細胞阻滯在G2/M 期，最終導致腫瘤細胞凋亡。

體外實驗顯示Rigosertib 具有廣譜抗腫瘤活性，對多種人類腫瘤細胞株表現出抑制活性，而且與其他抗腫瘤藥物聯用均對腫瘤產生協同抑制作用，具有較高的安全性。Rigosertib 目前處于Ⅲ期臨床研究，用于治療難治性骨髓增生異常綜合征（myelodysplastic syndrome，MDS）。我們結合近年文獻，對Rigosertib的結構、作用機制、體內外抗腫瘤活性以及臨床研究等方面的進展做簡要綜述。

1 Rigosertib的結構

Reddy 等[1]研發出一系列苯乙烯芐砜類化合物（圖1），對母核A 環和B 環上的側鏈進行結構改造，對其中2000 個化合物進行腫瘤細胞抑制活性評價和構效關系分析，發現A 環側鏈以2，4，6-三甲氧基取代、B 環側鏈以4 位甲氧基取代時活性最優，由此獲得化合物ON 01910，為增加其水溶性制得了鈉鹽ON 01910.Na，即Rigosertib，化學名為（E）-2-｛2-甲氧基-5-｛［（2，4，6-三甲氧基苯乙烯基）磺酰基］甲基｝苯基｝氨基乙酸鈉[2]。

2 Rigosertib的作用機制

Rigosertib 是第一個被報道的ATP 非競爭性小分子 polo 樣激酶 1（polo-like kinase 1，Plk1）抑制劑，對Plk1 表現為底物競爭性的抑制[3-4]，但與具有良好表征的Plk1 抑制劑BI2536 相比，兩者引起的細胞表型存在明顯差異[5]。也有研究表明，Rigosertib 能抑制磷酸肌醇 3-激酶（phosphati?dylinositol-3-kinase，PI3K）活性，尤其是 p110α、p110β亞型，導致AKT 磷酸化降低[6-7]，但目前尚不清楚這種作用是否為直接抑制PI3K。之后Athu?luridivakar 等[8]采用化學下拉法鑒定Rigosertib的直接靶點，結果顯示，Rigosertib 作為RAS 模擬物，與 RAS 效應器 Raf的 RBD（RAS 結合域）結合，導致Ras-Raf-MEK-ERK 信號通路阻滯。然而Ritt等[9]的研究得出了不同的結論：Rigosertib 與Raf-RBD的親和力很低，其對RAS-Raf-MEK-ERK 信號通路的抑制作用是間接的，主要依賴于JNK 級聯信號。Jost 等[10]采用CRISPRi/a 介導的化學遺傳篩選鑒定Rigosertib的靶點，結果顯示該藥物的作用靶點是微管蛋白，能直接與微管蛋白結合并破壞其穩定性，從而殺死癌細胞。

當前，研究者對Rigosertib的作用機制持不同觀點，其直接作用靶點的確定成為研究熱點和挑戰，尚須進一步探討。

圖1 苯乙烯芐砜類化合物、ON 01910和ON 01910.Na的結構式

3 Rigosertib的體內外抗腫瘤活性

針對100 多種人類腫瘤細胞系的體外實驗表明Rigosertib 具有廣泛的腫瘤細胞（包括多種耐藥細胞系）抑制活性，其IC50為50～240 nmol/L。在多個腫瘤細胞系及其異種移植模型中，Rigosertib 與紫杉醇、阿霉素、奧沙利鉑、依立替康等抗腫瘤藥物聯用時，均對腫瘤細胞顯示出協同抑制作用[11-12]。

體外研究還發現，Rigosertib 對12 種胰腺癌細胞的殺傷活性與吉西他濱（GEM）相當[13]，對16 株頭頸部鱗狀細胞癌（HNSCC）細胞系中的11 株也有較強的抑制增殖作用（LD50＜10 μmol/L）[14]。Ri?gosertib 能誘導慢性淋巴細胞白血病（CLL）細胞凋亡而對T 細胞或正常B 細胞無明顯毒性[6]，對彌漫性大B 細胞淋巴瘤（DLBCL）也表現出選擇性細胞毒性，LD50在 0.031 μmol/L 左右，而對正常人細胞CD3+T 和 CD19+B 無毒性[15]。

體內研究結果顯示，在小鼠異種移植胰腺癌模型中，Rigosertib 能抑制癌細胞的生長和侵襲并提高小鼠的存活率[13]；Rigosertib 對 8 個 HNSCC 異種移植瘤中的3 個有抑制作用，給藥28 d 后腫瘤生長抑制率大于50%[14]；在Rigosertib 治療的12 例高危MDS 患者和2 例8-三體急性髓系白血病（AML）患者中，有3 名患者的異常骨髓細胞數量下降50%以上，3 名患者的血液得到改善[16]。

Rigosertib 和傳統治療藥物順鉑分別與放療聯用治療宮頸癌，體內腫瘤生長研究顯示，與順鉑相比，給予Rigosertib的腫瘤生長延遲率提高53%，其作為放射增敏劑療效更高，且毒性更小[17]。

4 Rigosertib在實體腫瘤中的臨床研究

Rigosertib 已作為單一藥物或聯合用藥用于乳腺癌、結腸癌、胰腺、卵巢癌、肺癌、頭頸癌和淋巴瘤患者的治療。

2 項針對實體瘤患者的Ⅰ期臨床研究考察了靜脈注射Rigosertib的劑量限制毒性（DLT）及藥代動力學特征。其中一項研究有20 名患者參加，Jimeno 等[13]從中確定了 3120 mg Rigosertib的 DLT為3 級腹痛、疲勞、疼痛、惡心和排便沖動等，藥代動力學特征為快速分配（分配半衰期為1 h）和相對緩慢的消除（消除半衰期為27 h）；另一項研究有28 名晚期癌癥患者參加，Ohnuma 等[18]從中確定了Rigosertib 在Ⅱ期臨床研究中的用藥推薦劑量（RPTD）為850 mg/（m2·24 h）連續輸注3 d，DLT包括肌無力、低鈉血癥、中性粒細胞減少、譫妄和混亂狀態，藥代動力學顯示為快速血漿分布和尿排泄。

針對48 名接受標準治療但無效的實體瘤患者的一項Ⅰ期臨床研究，確定了口服Rigosertib的RPTD、DLT 和藥代動力學特征[19-20]。其 RPTD 為560 mg，2/d，連續口服21 d，主要毒性為尿毒性，口服水合碳酸氫鈉可改善排尿困難，血漿中Ri?gosertib 水平高于預測的藥效學活性水平。

在一項考察Rigosertib 和GEM 聯合用藥特點的Ⅰ期臨床研究中，Ma 等[21]確定了靜脈注射Ri?gosertib 和 GEM的 RPTD 為 Rigosertib 1800 mg/m2+GEM 1000 mg/m2，該方案耐受性良好，毒性特征與單獨使用GEM 相似。

一項有160 名患者參加的隨機的Ⅱ/Ⅲ期臨床研究，評價了Rigosertib 聯合GEM 治療轉移性胰腺癌的療效[22]。受試者以2∶1的方式隨機分成Ri?gosertib+GEM 組（106 名）和 GEM 組（54 名），分別給予Rigosertib 1800 mg/（m2·d）×6+GEM 1000 mg/（m2·周）×3 和GEM 1000 mg/（m2·周）×3 進行治療。結果顯示，與 GEM 相比，Rigosertib+GEM的聯合治療并不能改善患者的生存率或藥物療效。

5 Rigosertib針對骨髓增生異常綜合征的臨床研究

2 項Ⅰ期臨床試驗考察了Rigosertib的安全性及臨床活性。第一項考察了Rigosertib 口服制劑在MDS 患者中的藥代動力學特征、最大耐受劑量（MTD）、安全性和臨床活性[23]。560 mg Rigosertib治療的12 例患者中，平均絕對口服生物利用度為13.9%～34.8%，劑量達700 mg 時出現DLT（3 級排尿困難和呼吸急促）。結果表明，口服Rigosertib具有良好的生物利用度、耐受性和臨床活性。第二項評價的是靜脈輸注Rigosertib 治療復發或難治性CLL、套細胞淋巴瘤（MCL）及B 細胞淋巴瘤的安全性和毒性[24]。結果顯示，Rigosertib 在復發/難治性B 細胞惡性腫瘤患者中的耐受性良好，無血液毒性，但單用Rigosertib 時未觀察到顯著活性，須采用聯合治療或替代給藥方案。

之后的另一項Ⅰ期臨床研究評價了Rigosert?ib 聯合阿扎胞苷（AZA）在MDS 和非增殖性AML患者中的療效[25]。Rigosertib 采用遞增的劑量進行口服：①140mg，2/d；②280mg，2/d；③560mg上午1次和280mg下午1次。AZA以75mg/（m2·d）的標準劑量靜脈注射給藥。結果顯示，按照560 和 280 mg的劑量口服 Rigosertib 在 2 類患者中安全和耐受，不良反應性質與單獨使用AZA 沒有顯著差異。

三項Ⅰ/Ⅱ期臨床研究分別評估了靜脈輸注Rigosertib 在低甲基化試劑治療失敗的MDS、AML或轉化性骨髓增生性腫瘤（MPN）患者中的療效及安全性。第一項研究中，13 名MDS 患者接受了中位數為6 個療程的治療，總生存率中位數為10個月（3～17 個月），4 名患者出現3/4 級非血液學藥物相關或可能相關的毒性（1 例腹瀉、1 例排尿困難、1 例疲勞、1 例鼻出血），2 名患者出現與研究和藥物無關的肺部感染[26]。第二項研究中，21 名AML 患者接受 1～19 個療程遞增劑量［650～1700 mg/（m2·d）］的治療，結果顯示 Rigosertib 在患者中安全耐受，不僅能減少異常骨髓細胞的增殖，改善外周血細胞數目，還提高了患者的存活率，最常見的1～2 級副作用（AE）包括排尿困難、血尿、疲勞、厭食、惡心和腹瀉[27]。第三項研究中，26 名MPN 患者接受 2400 mg/d×7 d的 Rigosertib 靜脈輸注，給藥后第1 周和第3 周血漿藥物平均濃度分別為 9.20±5.05 和 9.81±6.70 μmol/L，Rigosertib 具有可接受的毒性，主要AE 為精神狀態的瞬態改變，該藥物治療后一些患者的疾病趨于穩定[28]。

另一項Ⅰ/Ⅱ期臨床研究也評價了Rigosertib 作為二線治療藥物在MDS 或AML 患者中的療效[29]。受試者接受3～7 d 連續靜脈輸注Rigosertib，采用650～1700 mg/（m2·d）的遞增劑量，14 d 為 1 個周期。常見的AE 為疲勞、腹瀉、發熱、失眠和貧血。在19 名可評價的患者中，10 例（53%）出現骨髓/外周血應答或疾病的穩定。結果顯示，對Ri?gosertib 治療有應答和無應答的患者的中位生存期分別為15.7 和2.0 個月，即作為二線治療藥物，Rigosertib 表現出了良好的治療效果。

根據上述4 項Ⅰ/Ⅱ期臨床研究結果，Oncono?va 公司開展了一項靜脈注射Rigosertib（ONTIME）的多中心、隨機的Ⅲ期臨床研究[30-31]。270 名新發或繼發性MDS 患者按2∶1 隨機分為最佳支持治療組（BSC）和BSC+靜脈注射Rigosertib 組，每2 周連續 3 d 給予 Rigosertib 1700 mg/（m2·24 h），持續16 周。與Ⅱ期研究中的觀察結果一致，4 周和12 周時骨髓母細胞的應答與患者的整體存活率相關，在這2 個時間點，接受Rigosertib 治療后完全應答、部分應答和疾病穩定的患者整體存活率顯著高于進行性疾病的患者。這些數據也提示，在Rigosertib 臨床研究中，骨髓母細胞在4 周和12周時的應答可作為中間臨床終點的生物標志物。

另一項隨機、雙盲的Ⅲ期臨床研究也比較了接受Rigosertib+BSC 治療與僅接受BSC 治療的高危 MDS 患者的總體生存率[32-33]。299 名經 AZA 或地西他濱治療失敗的MDS 患者被隨機分為BSC組（100）和BSC+Rigosertib 組（199），按照1800 mg/24 h的劑量連續靜脈輸注72 h。Rigosertib 組患者中位總生存率為8.2 個月，BSC 組中位總生存率為 5.9 個月。常見的 3 級 AE 是貧血［Rigosertib 組184 名患者中 34 例（18%） vs BSC 組 91 名患者中7 例（8%）］、血小板減少［35（19%）vs 6（7%）］、中性粒細胞減少［（31（17%）vs 7（8%）］、發熱性中性粒細胞減少［22（12%）vs 10（11%）］和肺炎［22（12%） vs 10（11%）］。結果顯示，與最佳支持治療相比，Rigosertib 并沒有顯著提高患者的總體生存率。

此外，一項標簽公開、隨機的Ⅲ期臨床研究（NCT02562443）也將比較分別單用Rigosertib 和BSC 對MDS 患者（包括高危MDS）總體生存率的影響，現正處于招募患者階段。

6 結語

Rigosertib 作為一種非ATP 競爭性小分子多激酶（包括PI3K 和Plk1）抑制劑，能選擇性誘導成髓細胞增殖停滯和凋亡而對正常造血細胞無影響，具有抗腫瘤和抗血管生成活性。Rigosertib 可單用或聯用于晚期實體瘤包括胰腺癌（Ⅱ/Ⅲ期）和卵巢癌（Ⅱ期）患者及高危MDS 患者的治療，具有良好的療效和藥物耐受性，毒性小、不良反應少。Rigosertib 正處于高危MDS 治療的Ⅲ期臨床研究階段，有望成為首個獲批的高危MDS的二線治療藥物，作為一線標準藥物——低甲基化藥物的有力補充，為難治性或復發MDS 和AML 患者帶來福音。Rigosertib 必將成為一種極具潛力的新型抗腫瘤藥物。