血清miR-331-3p與原發性肝細胞癌腫瘤特征關系的研究

摘要：目的：探討miR-331-3p與原發性肝細胞癌（HCC）腫瘤特征關系。方法 RT-PCR方法檢測25例肝硬化患者，20例慢性肝炎患者，50例HCC患者血清miR-331-3p含量。結果 miR-331-3p對HCC有診斷效能（AUC=0.740），并與腫瘤的大小及是否具侵襲血管或淋巴明顯相關。結論 miR-331-3p是HCC診斷潛在標志物。

關鍵詞：原發性肝細胞癌;微小RNA;血清;診斷

中圖分類號：R735.7 """""""""""文獻標志碼：A

Exploration of Serum miR-331-3p as Biomarkers for Hepatocellular Carcinoma

Abstract：[Objective] To explore the relationship between miR-331-3p and the characteristics of HCC. [Methods] Serum miR-331-3p levels in 25 patients with liver cirrhosis， 20 patients with chronic hepatitis and 50 patients with HCC were measured. [Results] MiR-331-3p could efficiently diagnose HCC from high risk patients with AUC of 0.740 and was significantly correlated with the tumor size and tumor invasion of blood vessels or lymph nodes. [Conclusions] Serum miR-331-3p was a potential marker in diagnosis of HCC.

Key words： hepatocellular carcinoma; microRNA; serum; diagnosis

基礎研究及前期工作表明血清中miR-331-3p可以作為原發性肝細胞癌（HCC）的診斷標志物^[1]，在這里對miR-331-3p與腫瘤病例特征的關系進一步研究。

1 對象與方法

1.1 對象

以50例HCC患者，45例慢性肝病（CLD）患者，其中肝硬化（LC）患者25例，慢性肝炎（CH）病人20例為研究對象。

1.2 標本收集

收集研究對象血清，置于-80℃冰箱保存待用。

1.3血清RNA提取及miR-331-3p測定

應用TRizol法進行RNA提取。TaqMan qRT-PCR法進行miR-331-3p測定。

1.4統計學分析

用cel-miR-39標準化miRNA的表達量，以2^{-ΔCT （CT miR- CTcel-miR-39）[2]}來計算。計量組間應用ANOVA分析。Pearson進行相關性分析。Plt;0.05被認為有統計學顯著性差異。

2 結果

2.1 肝癌患者肝癌病理特征

單發腫瘤27例，多發腫瘤23例。按巴塞羅那（BCLC）分級方式對腫瘤進行分級^[2]：0+A期有23例，B期18例，C期8例，D期1例。（表1）

2.2 miR-331-3p對HCC的診斷效能分析

對miR-331-3p建立從CLD（CH+LC）人群診斷HCC的ROC曲線。miR-331-3p曲線下面積為0.740。Cutoff值為0.740時，診斷的靈敏度和特異性分別為66%，78%。

2.3 miR-331-3p與腫瘤特征的關系

對miR-331-3p與腫瘤特征做相關性分析，miR-331-3p與腫瘤是否為多發無顯著相關性，與腫瘤大小顯著相關（r=0.389， P=0.005），隨著腫瘤直徑增加呈上升趨勢， 與腫瘤是否侵襲血管或淋巴相關（r=0.586， P=0.001），在有侵襲腫瘤患者血清含量顯著高于非侵襲者。（表1）

3 討論

基礎研究顯示miR-331-3p通過抑制蛋白磷酸酶PHLPP介導的AKT的去磷酸化過程，具有促進肝細胞的增殖和侵襲的作用，在HCC組織中顯著上升^[6]。本研究對血清miR-331-3p含量的測定和組織報道相一致。進一步對血清miR-331-3p與腫瘤特征進行相關性分析表明血清miR-331-3p含量與腫瘤大小以及腫瘤是否侵襲血管或淋巴顯著相關。

在我國肝炎，肝硬化這些高危人群中，早期發現肝癌，早期進行治療對降低病死率有著重要意義^[3]。本研究發現血清miR-331-3p是在慢性肝病高危人群中診斷HCC的新型標志物，是對傳統標志物AFP的補充。

參考文獻：

[1]Jian Li， Sun Qiyu， Tiezheng Wang， et al. A Combination of GPC3， miR122 and AFP in detecting hepatocellular carcinoma.Open Life Sci. 2019; 14： 53–61

[2]Wen Y，"Han J，"Chen J，"et al. Plasma miRNAs as early biomarkers for detecting hepatocellular carcinoma. Int J Cancer."2015; 137：1679-1690.

[3]王黎君， 殷鵬， 劉韞寧， 劉江美， 齊金蕾， 周脈耕. 1990年與2013年中國人群肝癌疾病負擔研究. 中華流行病學雜志. 2016，37（6）： 758-62.