FSTL1和Fas蛋白在亞臨床甲狀腺功能減退稽留流產中的表達及意義

王 菲

［作者單位］450000河南鄭州，河南中醫藥大學第三附屬醫院（王菲）

亞臨床甲狀腺功能減退 （subclinical hypothyroidism，SCH）是指機體促甲狀腺素升高，而游離甲狀腺素正常的一種甲狀腺疾病。孕齡期女性發生SCH風險較高，0.25%~2.50%婦女妊娠期可并發SCH，絕大多數SCH患者未見明顯的臨床癥狀和體征，導致病情往往被忽視、延誤。張立巖等調查發現SCH患者中5%~8%可進展為甲狀腺功能減退，病情進展可嚴重影響胎兒宮內生長發育，甚至引起死胎、死產或圍生期死亡，直接造成自發性流產、早產、胎盤早剝等不良妊娠結局［1］。稽留流產是指死亡胎兒未能及時排出仍滯留于宮內，SCH稽留流產致病機制目前尚未完全明確，部分國內外專家認為可能與卵泡抑素樣蛋白1（FSTL1）或Fas蛋白等細胞凋亡相關基因的表達有關［2，3］。該研究通過觀察SCH稽留流產患者絨毛蛻膜組織中FSTL1、Fas蛋白的表達，旨在分析FSTL1、Fas蛋白在SCH稽留流產疾病形成過程中發揮的作用，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2016年4月—2018年4月來筆者所在醫院治療確診為SCH稽留流產的患者45例。納入標準：經超聲檢查證實為稽留流產，實驗室檢查提示血清促甲狀腺激素 （TSH）＞3.0 μIU/ml，血清游離甲狀腺素（FT4）正常；排除因遺傳、感染等因素引起的稽留流產；孕前甲狀腺功能正常，無其他自身免疫障礙類疾病病史；均自愿配合該研究并簽署知情同意書者。將SCH稽留流產患者設為觀察組，年齡 24~35 歲，平均（28.86±3.10）歲；孕期 7~11周，平均（9.25±1.41）周；孕次 2~5 次，平均（2.98±0.65）次；流產次數 0~4 次，平均（2.23±0.75）次；產次0~3次，平均（1.31±0.48）次。另選取同期自愿要求終止妊娠的健康早孕婦女35例作為對照組，年齡23~36 歲，平均（28.59±3.23）歲；孕期 7~11 周，平均（9.07±1.55）周；孕次 2~5 次，平均（2.81±0.73）次；流產次數 0~4 次，平均（2.30±0.81）次；產次 0~3 次，平均（1.28±0.46）次。兩組患者基本資料經比較無統計學差異（P＞0.05），具有可比性。

1.2 檢查方法 兩組患者均于吸宮術前采集肘靜脈血4 ml，3000 r/min離心 15 min后取上清液置于－20℃冰箱內保存，采用酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測血清FSTL1、Fas蛋白水平；術后留取妊娠組織，在無菌環境下分別取出絨毛組織及蛻膜組織制成懸液，離心取單細胞懸液置于10%中性甲醛溶液中固定8~24 h，常規低溫石蠟包埋，置－20℃冰箱內保存，切片機連續切片后進行脫蠟、免疫組織化學染色。

1.3 結果判定 鏡檢可見棕黃色顆粒為陽性，采用雙盲法進行讀片，隨機選取5個高倍視野，陽性細胞比例＜10%為陰性（－），比例為10%~25%為弱陽性（+），比例為 26%~50%為陽性（++），比例＞50%為強陽性（+++）。

1.4 統計學方法 采用SPSS 20.0統計學軟件進行數據分析，等級資料采用秩和檢驗，計量資料經統計均符合正態分布，以（x±s）表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗。P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組孕婦血清FSTL1、Fas蛋白水平比較 觀察組血清FSTL1、Fas蛋白水平明顯高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表 1。

表1 兩組孕婦血清 FSTL1、Fas蛋白比較（x±s，μg/L）

2.2 兩組孕婦絨毛組織中FSTL1、Fas蛋白表達比較 觀察組孕婦絨毛組織中FSTL1、Fas蛋白表達水平明顯高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組孕婦絨毛組織中FSTL1、Fas蛋白表達比較（例）

2.3 兩組孕婦蛻膜組織中FSTL1、Fas蛋白表達比較 觀察組孕婦蛻膜組織中FSTL1、Fas蛋白表達水平較對照組顯著升高，差異有統計學意義 （P＜0.05）。 見表 3。

表3 兩組孕婦蛻膜組織中FSTL1、Fas蛋白表達比較（例）

3 討論

妊娠12周以內胎盤絨毛正處于生長高峰，胎兒或胚胎因不同原因停止發育，死亡后胎盤仍緊密固定于底蛻膜導致胎兒滯留于宮腔無法順利排出，稱為稽留流產［4］。胎兒停止生長病因復雜，遺傳因素、內分泌功能紊亂、解剖結構異常等原因均可引起稽留流產。SCH可增加流產率、引起不良妊娠已成為臨床共識，甲狀腺功能減退可導致機體新陳代謝水平降低，造成母體與胎兒能量供應不足而嚴重影響胎兒生長發育，同時甲狀腺激素可調節下丘腦-垂體-卵巢軸功能，甲減患者卵巢軸功能失調引起子宮成熟障礙，胎盤血管增生功能下降，導致胚胎移植發育、胎盤生長及蛻膜分化過程異常［5］。甲狀腺功能減退造成的妊娠婦女甲狀腺激素低水平狀態可抑制促甲狀腺激素釋放激素（TRH）分泌功能減退，打破機體激素水平平衡狀態，導致黃體生成素（LH）、促卵泡激素（FSH）及孕激素等性激素分泌作用減退，卵巢調節功能及胎盤發育功能發生障礙，增加不良妊娠發生風險，嚴重影響妊娠婦女及胎兒生命健康。因此，探究SCH稽留流產患者致病機制，明確其影響因素并針對性制定阻斷疾病進展方案，對治療及預防SCH稽留流產具有一定臨床價值。

FSTL1又稱轉化生長因子β1誘導蛋白 （TSC-36），屬于卵泡抑素家族中的一種細胞外基質糖蛋白，含有卵泡抑素、細胞外鈣離子結合結構域。FSTL1具有調控細胞增殖、分化、凋亡等生物學功能。張艷等［6］研究發現FSTL1存在于胚胎早期間充質中，可調控血管內皮細胞與心肌細胞增殖分化過程來影響胚胎時期心臟功能發育。FSTL1生物學功能復雜多樣，熊錦文等［7］發現FSTL1可在人類胎盤組織絨毛外滋養層細胞中特異性表達，稽留流產患者絨毛蛻膜組織FSTL1 mRNA表達高于健康流產患者，認為FSTL1特異性結合轉換生長因子相關配體，通過影響信號傳導導致胚胎發育異常。

Fas蛋白屬于腫瘤壞死因子受體超家族中的一種跨膜蛋白，與Fas配體（FasL）結合后可參與第二信使系統介導的信號轉導，啟動致死性信號轉錄引起細胞凋亡。劉曼等［8］研究發現Fas系統可通過參與蛋白酶介導的級聯反應誘導卵泡顆粒細胞凋亡引起大鼠卵巢卵泡閉鎖。孕期前3個月，正常妊娠組織可表達Fas蛋白，同時孕酮持續釋放可控制正常妊娠組織凋亡過程，達到平衡狀態以保證妊娠順利進行。妊娠期母體與胎兒之間存在免疫耐受，胎兒異體抗原進入母體，激活母體特異性T細胞，導致Th1/Th2型細胞因子失衡，促進Fas高表達以調控細胞凋亡過程來抑制Th1型細胞因子胚胎毒性作用，維持機體免疫耐受功能及正常妊娠，SCH患者Fas蛋白表達異常，導致妊娠期Fas系統介導的細胞凋亡調控功能紊亂，母體與胎兒免疫耐受機制破壞發生免疫排斥，從而促進稽留流產的發生［9］。

該研究發現，SCH稽留流產孕婦絨毛蛻膜組織中FSTL1、Fas蛋白表達水平均顯著高于正常流產孕婦，該結果說明FSTL1、Fas蛋白在子宮妊娠組織中高度表達與SCH孕婦發生稽留流產有密切關系，FSTL1、Fas蛋白可能造成妊娠期母體與胎兒炎性反應增強，特異性T淋巴細胞活化，誘導機體免疫應答狀態，導致胎兒受免疫系統攻擊出現生長停滯狀態，同時孕婦子宮增殖成熟不足，胎盤出現肌化而牢固地粘連于子宮壁層，造成死胎難以排出體外。

綜上所述，FSTL1、Fas蛋白的表達異常對SCH稽留流產孕婦疾病進展有重要作用，FSTL1、Fas蛋白表達增高可能是引起SCH稽留流產重要因素之一，針對該類患者采用調節優勢應答狀態來影響FSTL1、Fas蛋白的表達水平或許可達到早期預防及治療SCH稽留流產的目的。