幼齡藍孔雀組織滴蟲與球蟲混合感染的診斷報告

董 壯 李秀云 關(guān)春宇 任 帥 楊雪松 張立娜*

(1.東北林業(yè)大學(xué)，哈爾濱，150040；2.哈爾濱北方森林動物園，哈爾濱，150032)

藍孔雀(Pavocristatus)屬雞形目(Galliformes)，雉科(Phasianidae)，孔雀屬，是一種深受人們喜愛的鳥類，具有重要的觀賞和研究價值，同時在養(yǎng)殖業(yè)中發(fā)展前景廣闊。禽球蟲病和組織滴蟲病均屬于寄生蟲病中的原蟲病，禽球蟲(Coccidia)隸屬原生動物門(Protozoa)、頂復(fù)亞門(Apicomplexa)、孢子蟲綱(Sporozoa)、真球蟲目(Eucocciida)、艾美耳科(Eimeriidae)[1-2]；組織滴蟲最早于1895年在火雞體內(nèi)發(fā)現(xiàn)，稱之為火雞阿米巴原蟲(Amoebameleagridis)，之后發(fā)現(xiàn)此寄生蟲有鞭毛和偽足，與溫氏組織滴蟲(Histomonaswenrich)、火雞六鞭毛蟲(Hexamitameleagridis)等獨立原蟲不同，命名為火雞組織滴蟲(Histomonasmeleagridis)[3]。球蟲病是幼齡孔雀易感染的寄生蟲病，高溫、高濕條件下最適宜球蟲的生長發(fā)育，對幼齡孔雀危害較大，嚴重時可導(dǎo)致孔雀死亡[4]。本文通過對送檢死亡的藍孔雀的臨床診斷，結(jié)合臨床癥狀和實驗室檢查等，確診了幼齡孔雀的死亡原因為球蟲和組織滴蟲的混合感染，現(xiàn)報道如下。

1 發(fā)病情況及臨床癥狀

哈爾濱北方森林動物園于2018年6月初共人工孵化成功96只藍孔雀，按計劃進行常規(guī)免疫接種后并無異常表現(xiàn)，生長狀況良好。7月中旬轉(zhuǎn)入圈舍飼養(yǎng)，圈舍地面由紅磚鋪設(shè)，地面1/3的面積墊上沙土，并搭有不同高度棲架，圈舍護網(wǎng)為20 mm×20 mm孔鋼絲網(wǎng)，該圈舍之前養(yǎng)過成年孔雀，空舍有半年之久，圈舍后方為林地。8月初陸續(xù)有10只幼齡藍孔雀出現(xiàn)異常，表現(xiàn)出精神萎靡，消瘦，翅下垂，嗜睡，排黃綠色稀便或淡綠色、棕紅色稀便，少數(shù)稀便中含有血絲或血凝塊，死亡5只。

2 剖檢結(jié)果

剖檢病死藍孔雀，可見病死孔雀的口腔中有黏液；少數(shù)病例出現(xiàn)胸肌出血；肝臟腫大，表面形成不規(guī)則的邊緣稍隆起、中間凹陷的大小不等的邊緣呈淡黃綠色中間為黑褐色的潰瘍灶，部分病例表現(xiàn)為肝臟表面有圓形或橢圓形比肝臟顏色淡的壞死灶，壞死灶中有深紅色實心圓(圖1)，同時肝臟邊緣靠近膽囊側(cè)有大片紅褐色區(qū)域。十二指腸和小腸前段黏膜有針尖大小出血點，腸腔內(nèi)為黃色黏液。盲腸腫大出血(圖2)，腸壁增厚，內(nèi)有淡黃色干酪樣物，橫切面呈同心圓。其中有1例出現(xiàn)盲腸壞死，個別病死孔雀盲腸內(nèi)含有紅褐色黏液。

圖1 肝臟壞死灶Fig.1 Necrosis of the liver

圖2 盲腸出血Fig.1 Cecal hemorrhage

3 實驗室檢查

3.1 細菌和真菌分離培養(yǎng)

細菌分離培養(yǎng)[5]：無菌條件下采取病死孔雀的肝臟進行觸片，對肝臟組織進行采樣，接種血液瓊脂平板，37℃條件下培養(yǎng)24 h后血平板中未見細菌生長。肝臟觸片經(jīng)革蘭氏染色鏡檢未見細菌。

真菌分離培養(yǎng)[6]：采取病料組織進行沙氏培養(yǎng)基培養(yǎng)，經(jīng)培養(yǎng)1周后沙氏培養(yǎng)基中未見生長菌落。

3.2 球蟲卵囊和組織滴蟲檢查

采集病料盲腸的內(nèi)容物，用40℃的溫熱生理鹽水稀釋盲腸內(nèi)容物后，立即做懸滴標本鏡檢，400倍鏡下觀察發(fā)現(xiàn)有蟲體做鐘擺樣快速運動，蟲體為圓形或橢圓形，淡綠色或淡灰色。細胞核位于蟲體一側(cè)或中央。取病死孔雀的腸道內(nèi)容物，采用飽和鹽水漂浮法進行糞檢，400倍顯微鏡觀察，鏡檢發(fā)現(xiàn)有黃色卵圓形和寬卵圓形卵囊[7]。

4 診斷

根據(jù)以上臨床癥狀、病理變化、發(fā)病情況及實驗室檢查結(jié)果，結(jié)合流行病學(xué)，診斷致死原因為球蟲與組織滴蟲的混合感染。

5 治療及預(yù)防

5.1 治療

在治療上首先投喂了痢特靈，對有臨床癥狀的孔雀用痢特靈按0.04%混飼5 d；磺胺喹惡啉，0.1%濃度混飼，連喂3 d；間隔2 d再以0.05%濃度的磺胺喹惡啉混飼2 d。未有臨床癥狀的孔雀在飼料中按0.01%添加痢特靈混1周；繼而用0.012%磺胺喹惡啉混飼3 d。在治療時，飼喂全價飼料，提高機體的抵抗力，尤其要適量添加維生素A、維生素B、維生素K等維生素和微量元素，提高孔雀的抵抗力。

5.2 預(yù)防

對籠舍進行全面徹底的消毒，將沒有臨床癥狀的孔雀移至新的經(jīng)消毒的圈舍，對已表現(xiàn)出癥狀的孔雀的飲食器具每天進行消毒后使用，尤其是地面加強消毒，每2日增加1次火焰消毒，糞便深埋處理。加強飼養(yǎng)管理水平，同時對動物進行密切關(guān)注。

6 體會

雞球蟲病的流行特點為廣泛發(fā)生并普遍存在，難以消滅，當體內(nèi)致病力強的球蟲數(shù)量增大到一定程度時就會發(fā)病[8]，孔雀在人工養(yǎng)殖下因飼養(yǎng)、環(huán)境等因素的影響，難免發(fā)生疾病。由于其食性廣，攝入食物雜，感染寄生蟲病的幾率高[9]。因此，應(yīng)定期對圈舍消毒，尤其飼喂幼齡孔雀的圈舍，在炎熱潮濕的季節(jié)，要定期進行火焰消毒，保持圈舍的干燥和潔凈；及時清除積水和糞便，采用食盆飼養(yǎng)等措施。本次寄生蟲感染的為幼齡孔雀，藍孔雀可同時被多種球蟲感染，尤以感染2種球蟲的最為常見，而幼齡藍孔雀易被球蟲感染，幼體的自然感染率明顯高于成體藍孔雀[10]。張龍樂等對某養(yǎng)殖場調(diào)查顯示1年內(nèi)孔雀球蟲的感染率為100%[11]。而當時正值秋季，是鳥類球蟲的高發(fā)期，感染率可達到82%[12]。幼齡藍孔雀更易于發(fā)病，所以要注意提高幼齡孔雀的抵抗力，將成體與幼齡孔雀分開飼養(yǎng)。必要時進行全群預(yù)防。有研究表明蚯蚓也是導(dǎo)致球蟲傳播的宿主之一[13]，籠舍柵欄離地應(yīng)有 50 cm 的磚混結(jié)構(gòu)，表面應(yīng)為水泥光滑磨面；組織滴蟲與球蟲的感染具有協(xié)同作用[14]，組織滴蟲可以進入異次線蟲卵內(nèi)并長期存活，當孔雀食含有異次線蟲卵的食物時便進入體內(nèi)繁殖，導(dǎo)致孔雀發(fā)病。哈爾濱北方森林動物園地處山林之中，圈舍后方即為山林，所以昆蟲數(shù)量種類較多，幼孔雀發(fā)病期間天氣比較炎熱，連續(xù)多日下雨，空氣濕度較大，有利于組織滴蟲和球蟲在孔雀體內(nèi)大量繁殖導(dǎo)致孔雀發(fā)病。本次孔雀發(fā)病治療及時有效，發(fā)現(xiàn)孔雀出現(xiàn)癥狀，根據(jù)糞檢和剖檢變化，第2天開始投藥，至投藥1周后少數(shù)糞便中仍有帶血絲和棕褐色糞便，此時已死亡4只。再次投喂藥后死亡1只，其余出現(xiàn)癥狀的5只未死亡，精神狀態(tài)逐漸變好，飲食正常，糞便正常。孔雀的組織滴蟲和球蟲病應(yīng)結(jié)合自身當?shù)氐酿B(yǎng)殖環(huán)境特點做出充分的預(yù)防工作，最大限度地降低發(fā)病率。