聯(lián)合抗SSA、SSB、ANA以及抗環(huán)胍氨酸肽抗體對(duì)診斷原發(fā)性干燥綜合征的臨床意義

溫麗嫻 高 敏 林 城 張世豪▲

1.廣東省東莞市石排醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東東莞 523330；2.廣東省東莞市人民醫(yī)院病理科，廣東東莞 523059

原發(fā)性干燥綜合征主要對(duì)機(jī)體的外分泌腺造成影響，口干、眼澀是其典型的臨床表現(xiàn)，可累及全身多臟器及系統(tǒng)并引起自身免疫性病變[1-2]。目前對(duì)此疾病的發(fā)病原因暫不明確，可能是遺傳、感染、內(nèi)分泌等多種因素共同作用的結(jié)果。有報(bào)道稱在干燥綜合征患者血清中可檢測(cè)到抗SSA和SSB抗體，推測(cè)抗SSA和SSB抗體與干燥綜合征的發(fā)生及進(jìn)展有關(guān)，可作為臨床診斷干燥綜合征的指導(dǎo)指標(biāo)之一。本研究通過(guò)分析2015年1月～ 2017年12月我院收治的疑似干燥綜合征患者血清SSA、SSB、ANA以及抗環(huán)胍氨酸肽抗體的差異，旨在為臨床提高干燥綜合征檢測(cè)陽(yáng)性率提供指標(biāo)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取東莞市人民醫(yī)院2015年1月～2017年12月收治疑似干燥綜合征患者239例作為研究對(duì)象，納入標(biāo)準(zhǔn)：入組者均符合2012年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)原發(fā)性干燥綜合征分類標(biāo)準(zhǔn)[3]，且入院時(shí)有口眼干澀、眼內(nèi)有異物感、口腔潰瘍頻繁、腮腺持續(xù)腫大等癥狀，并經(jīng)唇腺病理活檢確診（診斷標(biāo)準(zhǔn)：唇腺活檢存在灶性淋巴性涎腺炎，灶性指數(shù)≥1灶/4mm2，且至少有50個(gè)以上淋巴細(xì)胞聚集于間質(zhì)者為1個(gè)灶）。排除標(biāo)準(zhǔn)：頸部、頭部及臉部有放療史；淋巴瘤；結(jié)節(jié)病、艾滋病及丙型肝炎病毒感染；近期應(yīng)用阿托品、莨菪堿、顛茄等抗乙酰膽堿藥物治療者。根據(jù)所有研究對(duì)象確診結(jié)果分成患病組105例和未患病組134例。患病組中男16例，女89例，年齡26～81歲，平均（53.7±11.7）歲；病程1～6年，平均（3.47±0.76）年。未患病組中男29例，女105例；年齡22～85歲，平均（51.9±12.6）歲；病程1～6年，平均（3.52±0.79）年。兩組患者性別、年齡及病程等一般資料相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

采集所有受檢者清晨空腹靜脈血5mL，以3500r/min轉(zhuǎn)速離心10min，分離血清并保存于-20℃冰箱待用。抗SSA/Ro60kD、SSA/Ro52KD、SSB/La采用免疫印跡法測(cè)定抗體的血清水平，試劑由深圳市亞輝龍生物科技股份有限公司提供；ANA抗體和抗環(huán)瓜氨酸肽抗體采用化學(xué)發(fā)光法測(cè)定抗體水平，其中ANA抗體試劑由深圳市亞輝龍生物科技股份有限公司提供，使用亞輝龍iFlash3000化學(xué)發(fā)光儀測(cè)定；抗環(huán)瓜氨酸肽抗體則由美國(guó)雅培公司提供，并使用雅培i2000化學(xué)發(fā)光儀測(cè)定。

1.3 觀察指標(biāo)

兩組患者抗體SSA/Ro60kD、SSA/Ro52KD、SSB/La、ANA以及抗環(huán)瓜氨酸肽抗體的陽(yáng)性率，以及聯(lián)合檢測(cè)上述抗體在原發(fā)性干燥綜合征的陽(yáng)性率、敏感度及特異度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析，定性資料以百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各抗體敏感度和特異度分析

抗 體 SSA/Ro60kD、SSA/Ro52KD、SSB/La、ANA以及抗環(huán)瓜氨酸肽抗體在患病組患者中的陽(yáng)性率分別為46.67%、44.76%、16.19%、85.71%及11.43%，未患病組患者的陽(yáng)性率分別為23.13%、16.42%、5.22%、91.79%及8.96%，見表1。同時(shí)患病組各抗體檢測(cè)敏感度中ANA較高，而抗環(huán)瓜氨酸肽抗體較低。患病組SSA/Ro60kD、SSA/Ro52KD、SSB/La檢出陽(yáng)性率較未患病組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而ANA以及抗環(huán)瓜氨酸肽抗體與未患病組檢出陽(yáng)性率相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.2 各抗體聯(lián)合檢測(cè)在原發(fā)性干燥綜合征患者中的敏感度和特異度分析

患病組聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性病例為94例，陽(yáng)性率89.52%，敏感度89.52%，特異度90.30%；未患病組聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性病例為13例，陽(yáng)性率9.70%，兩組聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=151.699，P=0.000）。

表1 各抗自身抗體敏感度和特異度分析

3 討論

抗體SSA及SSB抗體是目前臨床上診斷干燥綜合征最為常用的自身抗體[4]，但此兩種抗體均存在局限性，其中抗SSB抗體對(duì)干燥綜合征的敏感度相對(duì)較低，而抗SSA抗體在系統(tǒng)性紅斑狼瘡等自身免疫性疾病中的陽(yáng)性率亦較高，易造成干燥綜合征的漏診和誤診[5-6]。唇腺活檢對(duì)干燥綜合征診斷的特異性較高，但其為有創(chuàng)檢查，費(fèi)用較高且較多基層醫(yī)院沒(méi)有開展病理檢查，限制其在臨床中的應(yīng)用。因此，尋找一種敏感度、特異度高且實(shí)惠的檢查方式是目前臨床診斷干燥綜合征急需解決的問(wèn)題。抗環(huán)瓜氨酸肽抗體為風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎特異性抗體，對(duì)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的診斷陽(yáng)性率較高，且廣泛應(yīng)用于其早期診斷[7]。原發(fā)性干燥綜合征的致病因素和發(fā)病機(jī)制目前尚未清楚，但目前普遍認(rèn)為可能與病毒感染[8]、性激素異常[9]及遺傳[10]等因素共同作用下，引起機(jī)體自身免疫紊亂、細(xì)胞及及體液免疫異常反應(yīng)，促使機(jī)體合成及分泌多種炎癥介質(zhì)、細(xì)胞因子，從而損傷組織，漿細(xì)胞及淋巴細(xì)胞進(jìn)行性浸潤(rùn)靶器官，可損傷皮膚、淚腺、肝腎及肺等組織及臟器[11-13]。目前，臨床上對(duì)原發(fā)性干燥綜合征的診斷主要有血清抗SSA、SSB抗體及唇腺活檢。SSA、SSB自1975年從淋巴細(xì)胞提取物被檢測(cè)出，此兩種蛋白是組成核糖體蛋白的部分片段，亦在原發(fā)性干燥綜合征血檢中發(fā)現(xiàn)，但抗SSA抗體在眾多自身免疫性疾病的陽(yáng)性率較高，原發(fā)性干燥綜合征僅為自身免疫性疾病之一，因此對(duì)原發(fā)性干燥綜合征缺乏特異性；抗SSB抗體對(duì)干燥綜合征的敏感性則較低，故此抗SSA、SSB抗體局限自身因素，限制其在診斷原發(fā)性干燥綜合征的特異度及敏感度；而唇腺活檢為有創(chuàng)檢查，費(fèi)用相對(duì)昂貴且較多基層醫(yī)院沒(méi)有開展病理檢查，也限制其在臨床上的廣泛應(yīng)用。因此目前缺乏特異性診斷原發(fā)性干燥綜合征的指標(biāo)，為此我們努力探索聯(lián)合使用其它自身免疫相關(guān)抗體來(lái)提高原發(fā)性干燥綜合征敏感度和特異度的診斷方法。

經(jīng)研究對(duì)比發(fā)現(xiàn)部分自身免疫相關(guān)抗體血清檢測(cè)水平對(duì)干燥綜合征也具有提示意義，例如：ANA抗體和抗環(huán)瓜氨酸肽抗體檢測(cè)。ANA靶抗原已擴(kuò)展至細(xì)胞漿、細(xì)胞骨架及細(xì)胞核等整個(gè)細(xì)胞。目前ANA是指細(xì)胞內(nèi)全部抗原成分的總稱[14]。ANA可存在于血液中，亦有部分分布于尿液、胸腔積液及關(guān)節(jié)滑膜液中，ANA可與動(dòng)物所有細(xì)胞核相互作用，故而可在多種自身免疫性疾病檢測(cè)到，缺乏特異性。抗環(huán)瓜氨酸肽抗體為環(huán)狀聚絲蛋白的多肽片段，為診斷風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的特異性抗體，但在其他自身免疫性疾病亦發(fā)現(xiàn)抗環(huán)瓜氨酸肽抗體存在，故而具有一定臨床意義。Taraborelli等[15]研究結(jié)果認(rèn)為抗環(huán)瓜氨酸肽抗體可作為預(yù)測(cè)系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者關(guān)節(jié)侵蝕的指標(biāo)，可作為預(yù)后的判斷指標(biāo)之一。本研究結(jié)果顯示，抗體SSA/Ro60kD、SSA/Ro52KD、SSB/La、ANA以及抗環(huán)瓜氨酸肽抗體在患病組患者中的陽(yáng)性率分別為46.67%、44.76%、16.19%、85.71%及11.43%，未患病組患者的陽(yáng)性率分別為 23.13%、16.42%、5.22%、91.79% 及 8.96%。聯(lián)合檢測(cè)抗體SSA/Ro60kD、SSA/Ro52KD、SSB/La、ANA以及抗環(huán)瓜氨酸肽抗體患病組患者陽(yáng)性率為89.52%，敏感度為89.52%，特異度90.30%。可見上述血清因子聯(lián)合檢測(cè)對(duì)診斷原發(fā)性干燥綜合征的陽(yáng)性率優(yōu)于單獨(dú)，可推斷聯(lián)合檢測(cè)上述指標(biāo)能有效的提高原發(fā)性干燥綜合征的診斷準(zhǔn)確率，避免誤診、漏診或延誤治療時(shí)機(jī)。

綜上所述，抗體 SSA/Ro60kD、SSA/Ro52KD、SSB/La、ANA以及抗環(huán)瓜氨酸肽抗體聯(lián)合檢測(cè)，可提高對(duì)原發(fā)性干燥綜合征的診斷敏感度。隨著對(duì)干燥綜合征不斷研究，從最開始1965年提出的Bloch標(biāo)準(zhǔn)到最新的美國(guó)風(fēng)濕病協(xié)會(huì)（ACR）與歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟（EULAR）標(biāo)準(zhǔn)制定[16]，干燥綜合征的診斷及分類標(biāo)準(zhǔn)不斷優(yōu)化，但局限于干燥綜合征的發(fā)病機(jī)制仍未研究清楚，致使目前干燥綜合征仍然缺乏客觀的診斷金標(biāo)準(zhǔn)，此時(shí)聯(lián)合抗體檢測(cè)可以發(fā)揮其在原發(fā)性干燥綜合征診斷特異性較高的優(yōu)勢(shì)，具有較好的臨床應(yīng)用價(jià)值。