王 雪 , 鄭雪瑩 , 拱海鷗 , 劉建雙 , 王永強
(1.中國農業大學動物醫學院 , 北京 海淀 100193 ; 2.北京市動物疫病預防控制中心 ,北京 大興 102600 ; 3.北京寵福鑫動物醫院 , 北京 昌平 102200)
弓形蟲病(Toxoplasmosis)是由龔地弓形蟲(Toxophasmagondii)所引起的人獸共患病。人感染后一般無明顯臨床癥狀或輕微的流感樣癥狀,一旦機體的免疫功能受損或處于免疫抑制狀態,弓形蟲感染所致的腦病、肝病、肺病及眼病就會表現出來,嚴重者可致死[1]。此外,妊娠期婦女感染弓形蟲后可導致早產、流產、胎兒發育畸形[2]。人畜和禽類等其他動物為中間宿主,貓及貓科動物既是弓形蟲的終末宿主,又是中間宿主,是重要的傳染源。隨著家庭飼養貓作為寵物的盛行,人類與貓的接觸機會大大增加,進而使人通過已感染弓形蟲的貓而感染弓形蟲的幾率上升。本試驗從北京地區采集貓血液樣本共265份,結合血清學檢測和問卷調查,以了解本地區貓弓形蟲感染情況,尋找貓感染弓形蟲的風險因素,旨在為貓弓形蟲病的防控提供基礎數據,從而提出有效的防控策略。
1.1 主要試劑 動物弓形蟲IgG抗體酶聯免疫檢測試劑盒,珠海海泰生物制藥有限公司生產。
1.2 主要儀器及器材 酶標儀iMark,購自BIO-RAD公司;Centrifuge5810R臺式高速冷凍離心機,購自德國Eppendorf公司。
1.3 樣本采集及處理 2018年11月-2019年3月,在北京寵物醫院中隨機選擇寵物貓,對寵物主人進行寵物飼養相關行為問卷調查,并在其主人知情同意的情況下,采集寵物的血液樣品用于血清學檢測。每只動物采取1.5~2 mL靜脈血,3 000 r/min離心5 min,分離出待測血清并置-20 ℃冷凍備用。
1.4 檢測方法 ELISA檢測方法按照珠海海泰生物制藥有限公司生產說明書進行操作。
1.5 數據分析 將血清學檢測結果和問卷調查中收集到的相關信息輸入Microsoft Excel表,應用SPSS 25軟件進行統計分析。用病例對照調查OR值與疾病關聯程度的判定表標準判斷所分析因素與貓感染弓形蟲的關聯性。
1.1 弓形蟲感染情況 2018年11月-2019年3月,共采集到貓血清樣本265份。采用ELISA檢測方法進行血清弓形蟲IgG抗體的檢測,共檢測出陽性樣品53份,陽性率為20.0%(95%CI:15.2~24.8%)。根據貓來源不同,陽性率存在差異:收養的流浪貓有79只,檢出陽性樣品14份,陽性率為17.7%;購買的寵物貓有155只,檢出陽性樣品33份,陽性率為21.3%;家養貓有31只,檢出陽性樣品6份,陽性率為19.4%(圖1)。用配對資料卡方檢驗分析顯示,不同來源的貓弓形蟲抗體陽性率沒有顯著差異(P>0.1)。

圖1 不同來源的貓弓形蟲陽性率
2.2 貓弓形蟲感染和相關因素分析 結合問卷調查,統計分析不同情況下的貓弓形蟲陽性率,結果表明(見表1):所在小區有流浪動物家庭飼養的貓弓形蟲抗體陽性率顯著高于小區內沒有流浪動物的家庭飼養的貓;貓砂更換周期為2-3 d和3 d以上的家庭飼養的貓弓形蟲血清抗體陽性率均顯著高于每天更換貓砂的家庭飼養的貓陽性率;清理貓砂時不戴手套的家庭飼養的貓弓形蟲血清抗體陽性率顯著高于清理貓砂時戴手套的家庭所飼養的貓陽性率;以上均存在統計學差異(P<0.1)。
飼喂生魚生肉的貓弓形蟲抗體陽性率高于不飼養生魚生肉的貓;同時存在多只貓的家庭飼養的貓弓形蟲抗體陽性率高于單獨飼養的貓,但差異均不顯著。
以下因素對貓感染弓形蟲無關聯或關聯程度較弱,且差異均不顯著:貓有無流浪經歷、所在家庭是否養犬、所在家庭是否生肉熟食菜板混用、主人是否接觸流浪動物和清理貓砂頻率。
將收集的相關因素進行邏輯回歸分析,結果顯示:飼養家庭所在的小區內存在流浪動物是貓感染弓形蟲的風險因素(P<0.1)(見表2)。
本次弓形蟲抗體檢測結果為20%,與2016年于珊珊[3]的檢測結果基本相似;但與同年張啟龍[4]的檢測結果1.92%存在一定差異,可能與采樣區域、采樣策略以及檢測方法的不同有關。貓弓形蟲的流行有明顯的地理差異,世界平均感染率達30%~40%[5],亞洲大部分地區弓形蟲感染率普遍低于世界平均水平,如韓國在2.2%~47.2%[6],日本為9%~16.14%[7]。我國貓弓形蟲感染與世界平均感染率大致相當,約在4%~79.4%之間,地理差異較明顯。中南部省份貓弓形蟲感染率高于西北、東北等地貓弓形蟲的感染率[8]。
邏輯回歸分析的結果顯示:飼養家庭所在的小區內存在流浪動物是貓感染弓形蟲的風險因素。其原因可能是主人在小區內經過感染弓形蟲的流浪動物的生活區域時,帶有卵囊的土壤粘附在鞋底被帶入到家中,形成了家養寵物貓間接接觸室外環境的機會。弓形蟲卵囊被排出后可廣泛分布于自然環境中,孢子化卵囊在潮濕泥土中可以存活18個月仍具有感染力,因此貓與土壤接觸時誤食入泥土中的卵囊可導致弓形蟲的感染[9]。
單因素風險分析顯示:貓砂更換頻率和清理貓砂時的衛生措施與貓感染弓形蟲相關。其原因可能是本次試驗中39.2%的樣本都同時飼養了2只及以上的貓,加強貓砂的清理可以防止交叉感染。

表1 貓弓形蟲感染單因素風險分析

表2 二元Logistic回歸分析

續表
因為隨糞便排出的弓形蟲囊合子需要在外界發育1-2 d或更長時間,才形成具有感染性的孢子化卵囊,所以每天更換貓砂、清理時戴手套都可以及時清除弓形蟲囊合子,避免發育后造成傳染[10]。
飼喂生食對貓感染弓形蟲有中等程度的關聯度,與Jokelainen[11]等的報道一致,可能因為生肉中存在弓形蟲的包囊或被卵囊污染。這也印證了 Gauss的觀點“飲食似乎極大地影響了感染水平,即使是嚴格保持在室內的貓也可能由于其攝食習慣而與寄生蟲有明顯的接觸”[12]。
同時飼養多只貓對貓感染弓形蟲有中等程度的關聯度,與Ana Patrícia Lopes[13]等的報道一致,其原因可能是弓形蟲陽性貓作為傳染源排放卵囊而對同一家庭內的其他貓造成感染。
本次調查認為貓的來源和有無流浪經歷與貓感染弓形蟲的關聯程度較弱,而Opsteegh[14]等認為貓有流浪經歷是貓感染弓形蟲的風險因素,得出不同結論可能與本次試驗樣本量較小有關。
調查中得出的貓感染弓形蟲的有關因素,如貓砂的更換周期、清理貓砂時的衛生措施、同時飼養多只貓,均與寵物主人的生活方式相關。Lopes[13]等認為貓弓形蟲血清陽性相關的大多數風險因素是與生活方式相關的,可以通過阻止貓狩獵行為和關閉室外通道等方式減少貓的室外活動而進行防控。國內的家養貓基本沒有室外活動的機會,但在2012年調查家養貓的感染率為21.2%[15],結合本次試驗,分析家養貓的弓形蟲感染可能與動物主人的生活方式有關,建議在弓形蟲的防控中綜合考慮貓和動物主人兩方面綜合防控。