河南省堯山白山羊弓形蟲血清抗體檢測分析

張松山 ， 孫紅霞 ， 蘇玉賢

(1.河南省平頂山市畜產品質量安全監測中心 ， 河南 平頂山 467000 ；2.河南省平頂山市畜牧技術推廣站 ， 河南 平頂山 467000)

堯山白山羊是中國地方優良品種，也是魯山縣羊產業的一個當家品種，主要分布于河南省魯山縣的背孜、堯山、瓦屋、倉頭、團城、四棵樹共6個鄉(鎮)。2009年5月, 國家畜禽資源鑒定委員會將該羊種正式定名為“堯山白山羊”，并確認為國家級地方優良畜種。本次選擇以上6個鄉鎮開展弓形蟲抗體檢測與分析，旨在了解該地區羊弓形蟲病流行情況，為該地區羊的安全飼養和食品衛生提供基礎數據。

1 材料與方法

1.1 抽樣方案設計 采用兩層兩階段隨機抽樣結合便利抽樣方法進行抽樣方案設計。

第二階段分別計算規模場和散養戶內的抽樣羊只數量。規模場內羊只數量計算仍按估計流行率的方法計算，按95%置信水平，預期流行率10%，9%的可接受誤差，群體數量均按無窮大，則場群內需抽取不少于43只羊的全血，場內隨機選羊，按系統隨機方法抽樣。由于散養戶對抽樣調查相對不理解，配合度也比較差，采用便利抽樣方式每個散養戶抽樣20只羊的血液。

1.2 材料來源 于2018年3月-2018年7月在背孜、堯山、瓦屋、倉頭、團城、四棵樹6個鄉鎮，按1.1抽樣方案設計開展抽樣工作 ，最終獲得24個羊場共814份血清樣品，其中規模場14個，血清628份，散養戶10個，血清186份。采用頸靜脈采血方式對每頭被檢羊采集約5.0 mL全血，于4 ℃靜置過夜后，3 000 r/min離心10 min，收集上清(血清)至新的1.5 mL離心管，保存于-80 ℃，待檢。

1.3 試驗試劑及檢測方法 羊弓形蟲間接血凝試驗血清抗體檢測試劑盒,購自中國農業科學院蘭州獸醫研究所(批號：20180115)；檢測方法和判定標準參考試劑盒提供的說明書進行，且每個被檢測樣品重復3個孔。

1.4 數據分析 用Excel整理采集到的數據，用SPSS23軟件進行統計學卡方檢驗。

2 調查結果

2.1 河南省堯山白山羊弓形蟲病血清抗體檢測結果 被調查的814份羊血清樣品中有49份樣品檢測為弓形蟲血清抗體陽性，平均陽性率為6.02% (49/814)；被調查的6個鄉鎮均存在不同程度的羊弓形蟲病流行，說明羊弓形蟲病在平頂山市流行區域較為廣泛；6個鄉鎮羊弓形蟲感染情況存在一定差異，為3.61%～8.49%，見表1，各鄉鎮之間弓形蟲病感染率差異不顯著(P>0.05)。

表1 河南省堯山白山羊弓形蟲血清抗體檢測結果

2.2 河南省堯山白山羊不同年齡階段羊弓形蟲病血清抗體檢測結果 通過將被調查羊群分為0-1歲、1-2歲、2-3歲和3歲以上不同年齡階段，以分析羊弓形蟲病感染羊群在年齡階段的差異。調查結果如表2所示，各年齡階段羊群均存在弓形蟲病感染，其中3歲以上羊群弓形蟲陽性率最高，為9.22%(47/206)，而0-1歲羊群陽性率最低，為4.02%(14/348)，不同年齡段之間弓形蟲病感染差異顯著(P<0.01)。

2.3 不同養殖模式羊場弓形蟲病流行情況調查結果 在被調查的24個羊場中有14個為規模化羊場，共628份血清樣品，其余的186份血清樣品則來自于10個散養羊場。調查結果顯示，被調查的24個羊場均含有弓形蟲陽性羊，場陽性率為100%，其中規模化羊場弓形蟲陽性羊只21只，陽性率為3.34%(21/628)，而散養羊場陽性率偏高，為15.05%(28/186)，從個體感染情況看，規模場和散養場感染差異極顯著(P<0.01)。

表2 不同發育階段羊群弓形蟲病血清抗體檢測結果

表3 不同養殖模式羊場弓形蟲病流行情況檢測結果

3 討論

剛地弓形蟲病是一種重要的人獸共患性寄生蟲病，給人類和動物健康造成巨大的威脅，而我國是羊肉消費大國，在羊的養殖或羊肉的消費過程中，弓形蟲可以通過羊肉和羊的排泄物而感染人類，因此，了解羊弓形蟲病感染情況對保障羊的健康生產和公共衛生安全具有重要意義[2-3]。

本次調查通過對平頂山市魯山縣6個鄉鎮24個養羊場，共814份羊血清樣品進行弓形蟲抗體檢測，旨在了解這些鄉鎮羊弓形蟲病流行情況。結果顯示，該市各地區羊弓形蟲為3.61%～8.49%，平均陽性率6.02%，而根據文獻報道我國羊弓形蟲病感染率為2.8%～33.3%[2]，說明河南省堯山白山羊弓形蟲病在魯山縣感染率處于較低水平，這可能與當地養殖戶提高羊群飼養管理水平和逐漸由散養轉化為規模化養殖有關；通過分析不同年齡階段羊群弓形蟲病流行情況差異，結果顯示，0-1歲、1-2歲、2-3歲和3歲以上羊群弓形蟲陽性率分別為4.02%、5.08%、7.04%和9.22%，差異顯著，其整體流行趨勢與祖阿力婭等[4]調查結果基本一致，即羊弓形蟲發病率隨其日齡增長而升高，主要原因是羊隨著日齡增長，體外接觸弓形蟲卵囊或速殖子(速殖子可存在于山羊的唾液、乳汁、尿液、淚液，山羊可經口、皮膚黏膜感染)的幾率也相應提高，導致其感染率也提高；此外，被調查的24個羊場均含有弓形蟲陽性羊，說明羊弓形蟲病在該地區分布廣泛，對人畜健康具有潛在的風險，但規模化羊場弓形蟲陽性率明顯低于散養場，分別為3.34%和15.05%，差異極顯著，這與規模化羊場無論養殖規模、飼養水平還是衛生管理水平均高于散養羊場有關，此外，被調查的規模化羊場均未豢養貓、犬等動物，且會定期開展滅鼠活動，這可能是規模化羊場弓形蟲較低的主要原因之一。

本次調查于2018年3月-7月對平頂山市魯山縣6個鄉鎮24個羊場共814份血清樣品進行弓形蟲抗體檢測，發現該地區羊弓形蟲陽性率較低，為6.02%，且該縣羊弓形蟲病流行情況與地區、羊年齡和養殖模式差異有關。總體來說，平頂山市魯山縣堯山白山羊弓形蟲相對較低，但是場陽性率為100%，分布較為廣泛，對該地區養殖戶和消費者的身體健康存在潛在的威脅，需要引起獸醫及衛健等有關部門的重視。