竹葉提取物竹葉黃酮的研究進展

楊舒琪，姜春鵬

（蘇州綠葉日用品有限公司，江蘇 蘇州 215151）

竹葉在中國民間廣為使用，具有悠久的藥用和食用歷史。《本草求真》、《本草逢原》等古代醫學著作均有其詳盡的論述[1]。近年來，隨著藥用植物及其提取物在“替代療法”方面的廣泛應用，人們圍繞竹葉提取物 （Extract of Bamboo Leaves，Ebl）開展了大量的研究工作，研究表明，竹葉具有抗氧化、增強免疫力、殺菌等生物學功能[2]。Ebl 以其豐富的活性成分，確切的生物學功能，較高的食用安全性和充足的原料資源等優勢成為研究領域的熱點。

1 竹葉提取物中的活性成分

竹葉提取物是我國20世紀開發的一種植物類黃酮制劑，含有豐富的活性成分，包括大量的黃酮、酚酸、蒽醌類化合物、生物多糖、香豆素類內脂、特種氨基酸、芳香成分和錳、鋅、硒等微量元素[3]。其中黃酮類化合物、酚酸類化合物、蒽醌類化合物等都有著較強的生物活性[4]。

1.1 碳苷黃酮

黃酮類化合物（flavonoids）是一大類天然產物，是許多藥用植物的有效成分。研究顯示，竹葉黃酮具有優良的抗自由基、抗氧化、抗衰老、抗菌等生物學功效[5]。不同竹葉中總黃酮含量在1.18%～2.02%[6]，主要以黃酮糖苷的形式存在，糖基通過C-C鍵與黃酮環相連，并且鍵能較強。

1.2 多糖

多糖廣泛存在于自然界的植物中，是多種藥的有效成分之一，具有多種生物活性，它能促進T細胞、B細胞、NK細胞等免疫細胞的功能，還能促進白介素、干擾素、腫瘤壞死因子等細胞因子的產生[7]。竹葉多糖對 S180移植性腫瘤有間接抑制作用，抑制率可達50%[8]。毛竹葉中提取得一種中等分子質量的酸性雜多糖,主要由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖等 6 種單糖組成的多糖，經臨床實驗或動物實驗均證明它們有抗癌活性[9]。同時竹葉多糖可通過增強超氧化物歧化酶活力，延緩端粒縮短速度，提高谷胱甘肽過氧化物酶的活性、降低丙二醛的含量以及調節免疫來發揮抗衰老作用[10]。竹葉多糖一種具有多種生理功能和開發價值的植物活性多糖，可以作為一種新的食物功能因子和藥用成分加以深入研究，具有廣闊的開發前景。

1.3 特種氨基酸

竹葉提取物中檢出了相當含量的一種羥化賴氨酸—δ－OH－Lys，主要以游離單體和小肽的形式存在,賴氨酸在δ位羥化以后，抗活性氧自由基的活性有了顯著提高,遠遠高于賴氨酸[11]。除此之外，竹葉中還含有17種常見的氨基酸，其總量為10.35%，其中含有7種人體必需氨基酸約占總氨基酸的43.6%～56.6%[12]。

2 黃酮的提取方法

竹葉所含的有效活性物質主要為黃酮類,具有較大的極性和親水性，故可選擇熱水、甲醇、乙醇、丙酮等溶劑進行提取。黃酮類化合物能很好的溶于熱水中，并且水煮法成本低，設備簡單，在分離、純化、精制等后續工藝中不需要脫除有機溶劑，但是產品過于粗糙，黃酮含量低[13]。相比之下，微波提取在浸提工序中能得到較高的提取率，超聲波提取法也優于水提取法，超聲的空化作用有助于黃酮類物質的釋放與溶出，同時其自身的熱效應對原料有水浴作用[14]，但耗費溶劑量大，成本高，設備要求高。

由于竹葉黃酮具有酚經基和糖苷鏈，有一定的極性和親水性，生成氫鍵的能力較強，有利于弱極性和極性樹脂吸附。研究表明：在60%丙酮、料液比為1∶40的條件下回流浸提3 h，所得黃酮粗提液經過 X-5大孔吸附樹脂與聚酰胺樹脂聯用而得到純化，可得到竹葉總黃酮高達78.97%[15]。因此大孔樹脂這種有機高分子聚合物吸附劑已廣泛用于黃酮類化合物的純化。

3 竹葉黃酮的生理功效

竹葉中黃酮類化合物含量豐富，平均含量在2%左右。竹葉黃酮的功能因子是黃酮糖苷，竹葉黃酮糖苷有碳苷和氧苷兩種，碳苷黃酮指其中的糖基通過C-C鍵與黃酮母核相連，氧苷黃酮則是通過O-C鍵與黃酮母核相連。碳苷黃酮相比于氧苷黃酮具有結構穩定，能深入病灶部位，直接發揮療效的優點，并且親水性強，利于藥品、食品、化妝品等開發[13]。竹葉中的碳苷黃酮主要有葒草苷（Orientin）、異葒草苷（Homoorientin）、牡荊苷（Vitexin）和異牡荊苷（Isoviextin）4種（圖 1）。

3.1 抗氧化，抗衰老作用

黃酮類化合物都是很強的自由基清除劑和抗氧化劑，且這種能力的強弱取決于黃酮的類型和結構。竹葉黃酮是一種良好的天然抗氧化劑，其抗氧化作用與黃酮含量有一定線性關系。在對從昆明實心竹葉提取的黃酮其對油脂的抗氧化研究中發現，0.02%（質量分數）的竹葉黃酮的抗氧化效果高于維生素C，表明竹葉黃酮可作為天然油脂的抗氧化劑[16]。抗氧化活性研究顯示0.2 mL 1 mg/mL 竹葉黃酮對超氧陰離子自由基（·）的清除率為17.39%；0.7 mL 1 mg/mL 竹葉黃酮對羥基自由基（·OH）的清除率為58.2%[17]，表現了竹葉黃酮有很強的清除活性氧自由基的能力。

圖1 竹葉中4種主要的碳苷黃酮的化學結構Fig.1 Ch emical structure of four main C-glycosylflavones in bamboo leaves

電子自旋共振法（ESR）研究的結果還顯示竹葉總黃酮試樣（總黃酮糖苷含量為 22%）具有與單體黃酮（木犀草素 -7 -O -葡萄糖苷）相同的清·能力[3]。并且竹葉黃酮各單體之間存在相當強的協同作用。將從桂竹葉中分離純化的7種黃酮糖苷單體混合后發現，混合物清除·的速率常數相比其各自平均值，清除速率提高了1倍多[18]。竹葉黃酮是一種極具開發潛力的天然抗氧化劑。

3.2 抑菌 、防腐作用

竹葉黃酮有著較強的抗菌抑菌作用，有研究表明竹葉黃酮對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌3種細菌呈現出較強的抑制力[20]，竹葉黃酮對金黃色葡萄球菌和藤黃八疊球菌的最小抑菌濃度僅為4%，對大腸桿菌和枯草桿菌抑制作用相對較弱，最小抑菌濃度為10%；而對酵母菌和霉菌無明顯的抑制作用。對部分霉菌如根霉菌、青霉菌有一定的抑菌作用，而對黑曲霉、面包霉等霉菌則無抑菌作用[21]。在對豆漿的保鮮實驗中發現，4 ℃時添加0.01%竹葉黃酮對豆漿的保鮮效果較好，而30 ℃時竹葉黃酮的最佳用量為0.015%；感官評定結果顯示，添加0.01%～0.015%的竹葉黃酮對豆漿的色澤和風味均無不良影響，且可使保質期延長6 h[22]。

不同竹種的最佳抑菌效果是不一樣的，黃酮量較高的竹種表現出較好的抑菌效果，而含量低的則抑菌效果相對較差，各竹種的最佳抑菌效果與黃酮含量表現出良好的相關性，同一濃度的黃酮液，作用時間越長，抑制率也就越高。有研究表明，竹葉黃酮的純化物經硅膠柱二次分離，得到抑菌效果最好的部分，通過 HPLC 和LC-MS 分析，判斷牡荊苷可能是主要的抑菌成分之一，還可能存在少部分的異牡荊苷成分[23]。

4 竹葉黃酮在化妝品中的應用

鑒于竹葉黃酮具有較好的抗氧化、抗衰老、抑菌、防腐、保濕等多重生物學等功效，并且皮膚刺激試驗與眼刺激試驗表明竹葉黃酮的皮膚和眼結膜刺激反應均為陰性，符合化妝品添加劑的安全性要求，竹葉黃酮可作為新型護膚因子，添加至美白、祛斑、抗皺等高端護膚品中，具有極大的市場潛力。

浙江大學已將竹葉黃酮制作成納米粒子材料，以竹葉黃酮為載藥、芫根酸性多糖為包材，以ε-聚賴氨酸為陽離子橋，采用離子交聯法獲得竹葉黃酮納米粒子（BLFN）[24]。研究顯示， BLFN對B16小鼠黑素瘤細胞內酪氨酸酶活性、黑色素合成和細胞增殖均表現出質量濃度依賴的抑制作用，當BLFN 質量濃度為 100 mg/L時，其抑制率分別達到 69.68%、62.35% 和 59.14%，均顯著優于β-熊果苷，BLFN 能通過抑制黑素細胞活性、酪氨酸酶活性和黑色素合成起到美白功效，顯示出替代β-熊果苷的潛力，加之其構建均為天然成分，具有較高的使用安全性。

竹葉黃酮對皮膚細胞具有良好的生物學作用，能夠促進皮膚角質形成細胞及成纖維細胞的增殖能力，降低皮膚的紋理值和粗糙程度，達到去皺、抗皺的效果，能夠明顯的增強皮膚彈性，改善肌膚狀態。試驗表明：在0.005%～0.05%的劑量范圍內能顯著的促進皮膚細胞的增殖，在0.000 5%～0.005%劑量范圍內即能顯著減低脂質過氧化產物丙二醛（MDA）生成，又能提高SOD的活性，具備了作為一種安全、高效、經濟的抗衰老護膚因子的必要條件[25]。

同時竹葉黃酮具有較好的防曬功效，含質量分數為1.5% 的竹葉黃酮護膚霜在 UV-B 區的平均吸光度為 1.273，在 UV-A 區的 為0.965，表明竹葉黃酮對紫外線輻射具有一定的吸收能力[26]。竹葉黃酮護膚霜也展現了較好的保濕性能，可提高保濕性能到72.6%，高于對照樣品近30%。竹葉黃酮也可與其他通常用于化妝品中的組分適當的配合，例如：各種維生素，透明質酸，氨基酸等等制成不同用途、成效更突出的產品。

5 小結

竹葉黃酮來源豐富，除了有抗氧化、抗衰老、抑菌、防腐的生物活性功效外，還具有抗輻射、抗疲勞等多種功能，可用作化妝品、保健品、防腐劑、天然抗氧化劑等功能性添加劑。竹葉黃酮有望作為一種新型的抗衰老美白護膚化妝品的功能性因子，應用在護膚霜，潔面乳，洗發水，沐浴露等多種日用化妝品中，前景十分廣闊。

對黃酮類成分進行深層次的開發利用，必將提高竹業生產的經濟效益，加之竹產業正在中國可持續發展戰略中發揮著越來越重要的作用，竹子的現代生物利用對于促進林產業向縱深發展具有重大意義。