液相色譜儀紫外檢測器線性范圍檢定方法比較

陳敏 高雄兵/.云南省計量測試技術研究院；.昆明源瑞制藥有限公司

0 引言

液相色譜儀[1]是化學分析中發展最快、應用最廣的分析儀器，液相色譜法具有分析速度快、分離效能好和靈敏度高等優點，現已廣泛應用于藥品檢驗、產品檢測、農殘檢測等各個方面。新購買未經過檢定的液相色譜儀需要根據JJ G705-2014《液相色譜儀》檢定規程的規定進行首次檢定，首次檢定[2]需要檢定的項目有：輸液系統的泵耐壓、泵流量設定值誤差和流量穩定性、梯度誤差、柱溫箱中溫度設定值誤差和溫度穩定性、檢測器中的基線噪聲、基線漂移、最小檢測濃度、波長示值誤差和重復性以及線性范圍、整機的定性定量重復性這十二個項目。本文就液相色譜儀紫外檢測器首次檢定項目中線性范圍的檢定，經思考和實踐后提出一種新的檢定方法，并與文獻中的方法進行比較。

1 實驗部分

根據JJG 705-2014的規定，液相色譜儀首次檢定中線性范圍是必檢項目。在后續檢定中，一些客戶也可能存在線性范圍檢定的需求。線性范圍是儀器檢測的準確性指標，儀器線性的好壞直接關系到該儀器定量是否準確，是關乎儀器質量的一項重要指標。作者查閱了相關文獻，文獻[3]報道一種檢定線性范圍的方法是，將用于線性范圍檢定的不同濃度丙酮-2%異丙醇水溶液作為樣品，采用2%異丙醇水溶液作為流動相，進相同體積不同濃度的丙酮-2%異丙醇水溶液，以丙酮的峰面積與濃度作標準曲線。根據文獻方法進行檢定得出的具體數據見表1（儀器型號：LC-2030C、編號：L21445403387AE，生產廠家：SHIMADZU），線性圖見圖1。

根據實際工作經驗提出一種新的線性范圍檢定方法，將不同濃度丙酮-2%異丙醇水溶液作為成流動相（不過色譜柱），先用0.1%濃度的待測溶液作為流動相，等待基線穩定后依次更換不同濃度的丙酮-2%異丙醇系列水溶液，每更換一個濃度的流動相需要等待儀器示值穩定，記錄不同濃度下儀器基線穩定后的響應信號值（類似梯度誤差檢定方法）。作者用該方法對一臺液相色譜儀（型號：LC-2030C、編 號：L21445403387AE，生 產廠家：SHIMADZU）的線性范圍進行檢定，數據見表2，線性圖見圖2。用該方法對另一臺液相色譜儀進行2次實驗（型號：LC-3030C、編號：L21445510176AE，生產廠家：SHIMADZU），具體數據見表3，線性圖見圖3、圖4。

表1 將不同濃度的丙酮-2%異丙醇水當做樣品進樣的線性范圍數據

圖1 表1數據線性圖

表2 將不同濃度的丙酮-2%異丙醇水作為流動相的線性范圍數據

圖2 表2數據線性圖

2 結果討論

從圖1可以看出，將不同濃度的丙酮-2%異丙醇水溶液當成樣品進樣的方法進行線性范圍的檢定得出的實驗數據線性較好，該方法容易操作，解決了直接將樣品注入檢測池中儀器響應值不易穩定下來的問題，且需要的樣品量少，所需時間也大大縮短。但是帶來更多的影響因素，泵流速和流量的穩定性以及進樣誤差的影響，因此在計算不確定度時應考慮上述影響因素。

表3 將不同濃度的丙酮-2%異丙醇水作為流動相的線性范圍數據

圖3 表3第1組數據線性圖

從圖2、3、4可以看出，使用將不同濃度的丙酮-2%異丙醇水溶液作為流動相來進行線性范圍的檢定方法，通過對不同儀器分別進行三次實驗得出數據的線性均很好，證明這一方法是可行且可靠的。該方法較規程方法容易操作，也解決了直接將樣品注入檢測池中儀器響應值不易穩定下來的問題，但所需樣品量較文獻方法大，所需時間較長，對于更換了流動相需要排氣泡且基線自動歸零的儀器，這一方法不適用。使用該方法進行線性范圍檢定，在計算不確定度時應考慮泵流速和流量穩定性兩個影響因素。

圖4 表3第2組數據線形性圖

需要特別注意的是，按照JJG 705-2014中規定的方法進行紫外檢測器線性范圍檢定時，應同時用低濃度的丙酮-2%異丙醇水溶液進行最小檢出濃度的檢定[計算公式同規程中公式（8）]，不能直接代入檢定規程中用萘-甲醇溶液做出的最小檢測濃度值來計算線性誤差，因為用丙酮溶液得出的最小檢出濃度與萘-甲醇溶液得出的最小檢出限值不一樣，且用同一溶液得出的檢出上限和最小檢出限才具有可比性，計算出的結果才更能反映儀器線性范圍的準確性。根據實踐經驗，做最小檢出限的丙酮-2%異丙醇水溶液的濃度通常較0.1%丙酮-2%異丙醇水溶液低至倍或更低，也可根據儀器自身情況來具體確定。

3 結語

本文針對液相色譜儀首次檢定中的線性范圍檢定方法進行了探討，結合實際工作經驗提出了一種新的方法，并與文獻方法進行了比較，希望可以對液相色譜儀線性范圍的檢定有所幫助。