氣相色譜質譜法測定植物油中脂肪酸氯丙醇酯

徐斌

（盤錦市疾病預防控制中心 遼寧盤錦 124010）

1 前言

近年來，脂肪酸氯丙醇酯污染是目前社會各界關注的重點食品安全問題[1]，脂肪酸氯丙醇酯是氯丙醇類化合物與脂肪酸的酯化產物，氯丙醇類化合物包括單氯取代的3-氯-1,2-丙二醇（3-MCPD）、2-氯-1,3-丙二醇（2-MCPD）及雙氯取代的1,3-二氯-2-丙醇（1,3-DCP）、2,3-二氯-1-丙醇（2,3-DCP），其中，以3-MCPD在食品中污染量最大，毒性最強[2]。盡管以往臨床研究發現酸水解植物蛋白中含有一定的脂肪酸氯丙醇酯[3]，且在菜籽油中也檢出含有該物質，由于脂肪酸氯丙醇酯對人體健康產生不良影響，因此，對脂肪酸氯丙醇酯檢測的有效性、準確性、即時性就顯得十分必要[4]。本研究針對氣相色譜質譜（GC-MS）法測定植物油中3-MCPD酯進行探討。

2 材料與方法

2.1 主要儀器

Thermo公司TRACE 1300/TSQ 8000 Evo氣相色譜質譜聯用儀。

2.2 試劑

加拿大TRC公司3-MCPD酯；上海國藥集團化學試劑有限公司生產的甲基叔丁基醚、乙酸乙酯、甲醇鈉、氯化鈉、乙酸、苯基硼酸氯化鈉、正己烷、無水硫酸鈉等試劑。

2.3 樣品處理

選取0.1 g植物油置于試管中，然后將甲基叔丁基醚和乙酸乙酯按照8∶2的比例制成0.5 mL混合溶劑，將1 mL甲醇鈉加入其中，使用超聲波清洗器在45℃溫度中對溶液混合10 min。然后將3 mL正己烷、氯化鈉和乙酸混合溶液與甲醇鈉進行中和，在充分混合后在室溫下靜置7～9 min，待溶液出現明顯分層后將有機層移出。加入苯基硼酸溶液250 μL，混合均勻后在80℃下進行20 min左右的衍生反應，待反應結束后，再次加入1 mL正己烷并混合均勻，然后靜置分層，將上清液移出并置入1.5 g無水硫酸鈉試管中，重復混合、分層、取上清液1 μL，然后使用GC-MS進行檢測。

2.4 GC-MS檢測條件

GC條件中，初始溫度為80℃，升溫程序中預熱1 min，然后以每分鐘升高10℃的方式升溫至190℃，然后以每分鐘升高40℃的方式升溫至300℃，維持5 min即可。MS條件中，傳輸線溫度控制在270℃，燈絲電流50 μA，離子源溫度300℃，質譜的采集時間為 5～30 min。

3 結果

3.1 方法線性范圍和檢出限

本方法在0.02～2.0 mg/L線性范圍內曲線相關系數為 0.9993，檢出限為 100 μg/kg。

3.2 方法精密度和準確度

以橄欖油為基質，分別加入50μL、100μL、200μL標準使用液（10 mg/L），方法精密度為2.9%～6.5%，回收率為83.6%～103.2%，具體測定結果如表1所示（n=6）。

表1 具體測定結果（橄欖油）

3.3 結果分析

使用苯基硼酸溶液衍生反應后GC-MS法對超市購買的多種植物油中的脂肪酸氯丙醇酯進行分析和檢測，結果顯示，在橄欖油、花椒油、棕櫚油、芝麻油、大豆油、二級棉油、菜籽油中旗實測含量分別為2 370 μg/kg、3 000 μg/kg、50 690 μg/kg、11 200 μg/kg、4 590μg/kg、6 080μg/kg、10 000 μg/kg。根據研究結果可以了解，植物油中脂肪酸氯丙醇酯含量由高至低分別為棕櫚油、芝麻油、菜籽油、二級棉油、大豆油、花椒油、橄欖油，其含量在 2 370～50 690 μg/kg。

以橄欖油為基質，進行3個水平的加標回收實驗，各加標水平重復實驗6次，方法精密度為2.9%～6.5%，回收率為83.6%～103.2%，，精密度和準確度滿足分析需要。

4 結論

隨著近幾年科學技術的不斷發展和進步，經實驗檢測，大多食品當中都含有不同程度的脂肪酸氯丙醇酯[5]，尤其是食物油中脂肪酸氯丙醇酯的含量更高，根據相關研究顯示可知，成人或幼兒體內含有超過5倍以上的脂肪酸氯丙醇酯[6]，極有可能對人體健康造成影響，患病幾率增加。以往實驗研究多使用酸水解植物蛋白進行衍生反應，該種衍生反應下，GC-MS法也存在一定的缺點，如水解過程耗費的時間相對較長，易導致脂肪酸氯丙醇酯被降解，影響檢測靈敏度。另外，正己烷在衍生反應后對其產物的萃取率相對較低，也在一定程度上影響了檢測靈敏度，加之儀器污染較大，使得后續儀器維修頻繁，不僅花費大量的費用，而且影響檢測效率，但使用苯基硼酸溶液進行衍生反應，其儀器污染較輕、檢測靈敏度更高，結果更加準確，使其應用頻率越來越高。本研究使用苯基硼酸溶液衍生反應后GC-MS法對7種不同植物油所含有的脂肪酸氯丙醇酯進行檢測，該種方法下檢測靈敏度較高、污染小，極大地減少了樣品前期處理復雜的弊端，對有機溶劑的消耗量較少，受其他因素影響較小，能夠簡單、直接地檢測植物油中脂肪酸氯丙醇酯含量。

綜上所述，GC-MS法的檢測靈敏性較高，結果準確，樣品前期處理簡單，有機溶劑消耗量少，避免了儀器污染，可在衛生理化檢測中予以廣泛應用。