胸腹水脫落細胞制片及影響因素的分析

王立山 車 超 李占林 燕東陽 姜曉靜

（遼寧省健康產業集團鐵煤總醫院，遼寧 鐵嶺 112700）

細胞病理學因其具有準確率高、診斷速度快、痛苦輕微、檢查費用低、操作簡單方便等特點，而廣泛應用于臨床中，現階段已成為了非常重要的一項診療技術[1]。在實際的細胞病理學檢查中，細胞學制片質量會對診斷的準確性造成直接影響。但是現階段因為受技術原因的影響，降低了細胞學的制片質量，進而對細胞學診斷造成直接影響。本研究主要分析了胸腹水脫落細胞的制片及影響因素，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇我院2016年2月至2017年2月收治的進行常規檢查和脫落細胞檢查的胸腹水標本56份。

1.2 方法：標本送檢后應分別進行30 min、24 h、48 h和72 h的靜置，然后分別將部分上清液去除，將剩余的標本混勻，將其放入到合理的試管內，進行10～20 min離心處理，轉速設置為每分鐘2000轉，將試管翻轉，將全部上清液去除，讓其盡可能沿管壁流下，將盡管壁液體成分。試管應繼續保持倒置狀態，選擇一次性吸管吸取一定量的試管底部離心物，并將其放置在玻片中下2/3處，選擇吸管均勻涂片。離心物的吸取一定要適量，防止涂片厚薄不均勻。在實際的操作中，試管口的方向應始終保持朝下，切勿朝上，防止試管壁上所殘留的水分回流到試管底部。如果水分較多，在進行涂片固定時則可能讓細胞脫落。涂片制備好后，應及時進行固定和染色。選擇毛細管吸取數張細胞上層涂片，選擇一涂片放置在制片臺的水平支架上，快速滴加濃度為95%的乙醇，在實際的固定過程中，固定液應始終布滿全片，并選擇另一涂片快速投入到固定缸內，缸內具有濃度為95%的乙醇，固定時間均為10 min，對細胞的有形成分數量進行觀察。選擇一涂片在干燥后1 min內進行瑞姬氏染色；同時選擇水平濕固定涂片進行蘇木素-伊紅（HE）染色，對細胞結構的退變情況進行觀察。

1.3 臨床觀察指標：①細胞數量的分布情況：如果胸腹水常規有核細胞的總數＞0.2×109/L，則判斷為細胞分布密集或散在“+”；其細胞分布荒涼或稀少為“-”[2]。②細胞退變分級的判斷標準[3]：正常間皮細胞內存在中高度細胞退變，核腫脹，細胞內存在空泡擴大，細胞體積顯著增加，核膜不清晰，染色變淡，染色質顆粒變粗，氣球樣變則表示“+”；正常間皮細胞存在輕微細胞退變，細胞內存在液化空泡，細胞體積輕微增加，細胞核形態和大小正常則表示“-”。

1.4 統計學分析：選擇SPSS軟件來統計和分析本實驗相關數據，計數資料選擇卡方檢驗，計量資料則選擇t檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 制片固定方式對細胞數量的影響：水平濕固定結果顯示，56份標本中，46份標本為+，10份標本為-；垂直濕固定結果顯示，56份標本中，30份標本為+，26份標本為-；在細胞成分保留方面，水平濕固定顯著優于垂直濕固定，比較差異有統計學意義（P＜0.05）。

2.2 固定染色法對細胞結構的影響：水平濕固定HE染色結果顯示，56份標本中，4份標本為+，52份標本為-；干燥法瑞姬氏染色結果顯示，56份標本中，30份標本為+，26份標本為-；在對細胞結構的影響方面，水平濕固定HE染色顯著優于干燥后瑞姬氏染色，比較差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 固定染色法對細胞結構的影響

3 討 論

現階段在發現癌前病變、診斷癌癥以及療效觀察等工作中，胸腹水脫落細胞學檢查的應用非常廣泛，其特點主要為患者痛苦輕微、準確性高等，現階段臨床中在早期發現腫瘤以及防癌普查時，胸腹水脫落細胞學檢查已成為了一項非常重要的手段。

在開展胸腹水脫落細胞學檢查時，首先應對制片質量進行嚴格控制，進而來保證胸腹水脫落細胞學檢查的準確性，為疾病的診斷提供科學依據[4]。在常規制作胸腹水脫落細胞涂片時，主要步驟包括離心、涂片、固定以及染色等，所需時間大約為40 min，而且收集的細胞數量較少，在去除殘液時會隨之去除大量的細胞，進而導致漏診。在收集細胞時，選擇收集器能讓細胞收集的時間顯著縮短，只需2～3 min就可完成標本收集工作，涂片的細胞成分較多，基本上能收集到送檢標本內的所有細胞，防止細胞收集過少而引起的漏診，讓診斷的準確性顯著提高。通過制片固定能讓細胞形態得以有效保持。如果制片技術較差，如離心轉速不合理則會減少成分沉渣；如果吸收細胞層的血液較多，則會減少其他的細胞成分；如果涂片的厚薄不均勻，則會對染色造成影響，在進行制片固定時讓細胞成分出現脫落等。對細胞成分進行有效保留，讓其丟失有效減少，是降低假陰性的主要步驟之一；本研究中，水平濕固定結果顯示，56份標本中，46份標本為+，10份標本為-；垂直濕固定結果顯示，56份標本中，30份標本為+，26份標本為-；在細胞成分保留方面，水平濕固定顯著優于垂直濕固定，比較差異有統計學意義（P＜0.05）；結果顯示垂直濕固定導致的細胞成分流失到細胞荒涼、稀少的標本數更多，也是導致漏診和誤診的主要原因。在進行制片時，要想保證其質量理想，細胞結構就應保證清晰，核內結構應比較清楚，核漿色澤應比較分明。本研究中，水平濕固定HE染色結果顯示，56份標本中，4份標本為+，52份標本為-；干燥法瑞姬氏染色結果顯示，56份標本中，30份標本為+，26份標本為-；在對細胞結構的影響方面，水平濕固定HE染色顯著優于干燥后瑞姬氏染色，比較差異有統計學意義（P＜0.05）；輕微的細胞退化變形能讓細胞核的形態和大小保持正常，也不會因為退變而導致誤診，但是中高度退變則可能因為退化變性而將間皮細胞誤診為癌細胞，導致假陽性。所以選擇瑞姬氏染色時，在涂片后應及時進行固定處理。

在現代醫學技術快速完善和更新的過程中，自動化體液脫落細胞制片開始逐漸代替手工法，進而也讓胸腹水的陽性診斷率得到了有效提高。然而對于基層醫院來講，在采集到體液脫落細胞時，應及時送檢，而且還應加強制片質量的控制，選擇水平濕固定不但能讓細胞成分流失和細胞退變的人為因素減少，讓交叉污染有效減少，而且還能讓診斷符合率顯著提高。