自家高免血清防治羊痘病毒性疾病

程志鵬，盧曉麗，田孟芳，趙彥玲，孫 磊，任子利

（西藏農牧學院 動物科學學院，西藏 林芝 860000）

綿羊是我國重要的畜牧業經濟來源，對于西藏自治區來說綿羊是牧民們的重要生活來源。羊的相關疾病也威脅著西藏同胞們的生命及財產安全，尋找有效的治療手段可以減少牧民的經濟損失。

早在公元前一世紀羊痘就被公之于眾，它是一種古老的動物疫病，直到1902年Borrel成功鑒定出綿羊痘的病原是由病毒而引發，31年后將綿羊痘病毒在體外培養成功[1]。羊痘在羊群中是一種傳染性強的疾病，通常患羊痘病的羊只從皮膚表面開始出現臨床癥狀，首先皮膚產生化膿性的膿包，當膿包破裂病毒會在羊群中大量傳播，其最顯著特征為綿羊皮膚表面或粘膜處出現痘疹，同時患病羊只會發熱，由于綿羊痘病是由綿陽痘病毒所引發的一類接觸性、急性、熱性的傳染病，所以通常羊只發熱會非常迅速[2]不僅影響著羊群的生命安全，由于降低羊群免疫力的特點羊痘病還會降低羊的生產力[3]。羊痘病也是一種人畜共患病，人如果接觸到羊只身上破損的膿包或其污染物會被傳染。目前我國采用固定時間對羊群進行羊痘疫苗注射，通常為春秋兩季節無論成年羊還是幼年羊統一處理，但是每年依舊會有大量的羊群患羊痘病，其原因為：注射疫苗時出現漏針現象，注射疫苗治療無法得到保證，牧民存在僥幸心理未對羊群進行疫苗注射等原因。羊痘病一旦在羊群中發現其發病速度很快，一般通過對其進行藥物治療治愈率不高，同時會增加經濟成本。

目前，自家高免血清應用廣泛，通常應用于對犬瘟、犬類細小病毒的治療，細小在犬類中具有很高的致死率，常致其嘔吐、腹瀉最終導致病犬失水、器官功能衰竭造成死亡[4]。自家血能夠高效的中和犬類體內的病毒，增強治愈能力并縮短療程[5]。畜禽類的應用也頗為廣泛，涂宜強[6]等人利用高免血清對豬的流行性腹瀉進行治療，蘆俊鑫等人針對豬瘟利用豬瘟高免血清進行了防治[7]；譚毅[8]通過藥物配合自家血的治療對患病毒性腫頭出血癥的鴨子進行診治。其在綿羊上的應用也早有先例，本次針對羊痘病毒的應用對患病羊只進行臨床治療，取得了很好的效果同時也降低了成本，為綿羊羊痘病的治療提供參考依據。

1 自血療法的操作方法

自血療法一般是指直接抽取靜脈血在不添加抗凝劑的情況下立即注射于穴位，常被用于治療人類的皮膚性疾病，Hashida S等人也曾用其治療人類免疫系統疾病[9]。在對患羊痘病的病羊進行自血療法前，由于自愈個體有限，患病個體較多為了減少個體間的排異反應，所以要對血清進行滅活處理，選取好指定的家畜后對指定采血部位進行剪毛處理，對采血針頭注射器等進行嚴格消毒，采集好靜脈血后提取血清對其加入雙抗保證無菌即可使用，以上過程均在無菌條件下操作，以免發生污染。由于牛血易凝固，可在注射器中加入抗凝劑減緩血液凝固。

2 綿羊發病情況

杜泊羊群，月齡3個月，共確診患病8頭平均體重為35 kg，雌性。毛管粗糙身體瘦弱，眼睛半閉，臉部、皮膚表皮、尾部有大面積丘疹，且有明顯發熱現象，停止采食及飲水，無活力。

3 治療

3.1 采集血清用羊的選擇

通過自然感染的方式被羊痘病毒感染，觀察其癥狀明顯經調查后確診為羊痘病的綿羊，在未治療的條件下出現自愈，采食、飲水、精神狀態恢復正常后觀察發現綿羊臉部及身體表面的水泡已經出現結痂現象，此時其體內的血清抗體有很高的效價。在對血清用羊進行選擇時要優先考慮體溫、大小便正常的羊只，同時未患其他疾病。

3.2 相關采集器材

塑膠手套、剪刀、口罩、防化服、鞋套、消毒液（75%酒精、5%碘酒）、消毒棉球、10 ml采血針、塑料瓶、低溫冰箱、玻璃注射器、離心管、恒溫箱。

3.3 自家高免血清的制作

對采血羊只進行頸部消毒后抽血，將采集好的血液裝入低溫冰箱中進行保存；將裝有血液的針管靜止倒放于準備好的塑料瓶中并放入恒溫箱中，保持溫度32℃靜置6～8 h后讓血液自然凝集后將上層清液推入離心管中，對上層清液進行離心后即得到血清，用消毒過的玻璃注射器將離心好的血清抽出，對血清進行滅活后將其分瓶裝入無菌的玻璃瓶內100 ml后向玻璃瓶內注射10萬單位的鏈霉素及青霉素，將玻璃瓶密封存好。

3.4 高免血清的檢測

3.4.1 無菌測試 將做好的高免血清取1 ml分別滴于普通培養基中，放在恒溫培養箱中溫度控制在37℃，培養30 h后觀察有無細菌生長，若無細菌則說明血清無菌。

3.4.2 血清安全檢測 隨機抽取同群健康羊只進行10 ml高免血清注射，觀察其生理狀況綿羊健康無異常則血清安全。

3.5 對患病羊群進行注射

根據患病個體的患病情況進行注射，一般來說患病羊只病情越重所注射血清量越多反之則越少，為了避免刺激過度造成個體病情惡化[10]，其次根據羊的體重注射，大羊注射10 ml血清，小羊注射3～5 ml血清，采取注射兩天每天注射一次的辦法進行治療[11]。

3.6 觀察血清作用

凡注射血清后的羊只在1～3 d出現明顯好轉，開始自然采食、飲水，皮膚及尾下丘疹變色結痂，此表現為血清起到很好的治療作用，觀察7～8 d后羊毛毛管開始變亮可認為痊愈。

4 體會與總結

4.1 自家血的免疫學依據

當高免血清注入到皮下或深入粘膜后單核-巨勢細胞系統會受到被破壞的紅細胞的刺激，從而增強自身的活性，活性增強其吞噬作用也得到了增強，使得對外免疫的能力得到了提升，將高免血清點射到化膿創口處周圍能夠在創傷附近快速產生屏障免疫外來病毒，不但可以在創口處產生抗毒屏障也能促進傷口肉芽的生長促進傷口愈合[12]。

4.2 治愈效果

臨床治療中有8頭綿羊確診為羊痘，治療中有一頭出現死亡現象，筆者認為錯過了最佳治療時間從而延誤病情。

4.3 發現患病羊只應采取的措施

發現患病羊后應立即將病羊與羊群隔離，且隔離區應與羊群保持距離，確保羊群無法與病羊及其污染物接觸，將病羊分離出后應立即對羊舍進行噴霧消毒并對未感染羊群進行羊痘苗注射，同時對羊舍進行生石灰鋪灑和液體消毒噴霧[13]。

4.4 疫情高發原因

在羊群高發季節應保證羊圈的通風及其干濕度，對于溫度的較低的季節，既要保證通風同時也應保障羊舍的溫度在一定范圍避免溫濕度變化過快使羊群免疫力降低,患病羊群的相互密切接觸和呼吸道的傳播是導致疾病迅速傳播的主要原因，氣溫變化過快、育肥不到位、羊群應激會對該疾病有促使作用[14]，增加患病幾率。

4.5 注意事項

采集自家高免血清時每一道程序需經過嚴格消毒，確保采集樣品無菌，對血清加入雙抗前確保血液無菌滅活，發現患病羊只及時隔離。發現疫情要盡快利用高免血清進行治療，時間要快不能拖延，最佳的治療時間在發病的初期，由于自家高免學清具有較高的兼容性，所以它可與其它治療性的藥物配合使用[15]。