血清CA19-9、PIVKA-Ⅱ、VEGF聯合檢測對胰腺癌的診斷價值研究

邢瑞青，彭道榮

(空軍軍醫大學附屬西京醫院臨床實驗研究所，陜西西安 710032)

胰腺癌為胰腺最常見的惡性腫瘤之一，占消化道惡性腫瘤的8%～10%[1]。由于其惡性程度高，容易發生肝轉移，經手術治愈的病例極少，預后差，5年生存率不足10%[2-3]。作為病死率最高的惡性腫瘤之一，目前仍沒有一種血清標志物對胰腺癌的診斷具有滿意的靈敏度和特異度。血清糖蛋白抗原199(CA19-9)是胰腺癌的傳統血清腫瘤標志物之一，且在胰腺癌的診斷方面仍然存在一定的局限性[4-5]。近年來，在胰腺癌的臨床診斷方面又出現了一些新的相關標志物，如異常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)、表皮生長因子(VEGF)等。本研究旨在探討CA19-9、PIVKA-Ⅱ、VEGF聯合檢測對胰腺癌的診斷價值，為提高胰腺癌的早期診斷率提供理論依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2017年1月至2018年1月來本院就診并經病理證實且未經手術等相關治療的胰腺癌患者73例(胰腺癌組)，其中男53例，女20例，平均(54.92±11.50)歲。胰腺良性病變(胰腺炎、胰腺囊腫)患者71例(胰腺良性病變組)，其中男46例，女25例，平均(56.24±13.45)歲。健康對照組均來自本院體檢健康人群，隨機抽取56例，其中男31例，女25例，平均(51.05±9.28)歲。患病組與健康對照組年齡、性別經統計學分析差異無統計學意義(P>0.05)，資料具有可比性。所有研究對象入選前均簽署知情同意書。排除標準：肝癌轉移性胰腺癌患者，伴有肝硬化的胰腺癌患者，存在凝血功能障礙的胰腺癌患者均不納入胰腺癌組；伴有肝硬化，凝血功能障礙的胰腺炎、胰腺囊腫患者亦不被納入胰腺良性病變組。所有研究對象近3個月均未使用維生素K和華法林等藥物治療。

1.2儀器與試劑 CA19-9采用瑞士羅氏E601型電化學發光分析儀進行檢測，羅氏原裝試劑，應用伯樂腫瘤標志物復合質控，校準品為羅氏原裝。PIVKA-Ⅱ采用日本Lumipulse G1200全自動化學發光酶聯免疫分析儀檢測，試劑由珠海麗珠股份有限公司提供。 VEGF采用廈門天中達TZD-CL-200S化學發光免疫分析儀檢測，試劑由威海威高生物科技有限公司提供。PIVKA-Ⅱ和VEGF質控品、校準品均為原裝配套試劑。

1.3方法 標本收集方法：受檢者均于入院后第2天清晨空腹靜脈采血3～4 mL，3 000 r/min離心10 min，分離血清于-70 ℃凍存待測。對照組采集清晨空腹靜脈血3～4 mL，同樣按上述方法處理。所有標本均無乳糜及溶血。指標陽性判斷標準：CA19-9>27 U/mL，PIVKA-Ⅱ>40 mAU/mL，VEGF>160 pg/mL為陽性，小于上述值為陰性；聯合檢測中有一項陽性即為陽性標準。檢測方法：CA19-9采用電化學發光法檢測；PIVKA-Ⅱ采用化學發光酶聯免疫法檢測；VEGF采用化學發光法檢測。所有檢驗操作嚴格按照實驗室室內質量控制文件進行。在試驗標本檢測前、檢測中、檢測后分別進行質控檢測。室內質控和室間質評均合格。

1.4統計學處理 應用SPSS17.0統計軟件進行統計分析。因樣本濃度均呈偏態分布，故以中位數(四分位數)[M(P25,P75)]表示，組間比較采用非參數Kruskal-Wallis檢驗，兩兩比較采用MannWhitneyU檢驗。計數資料以率表示，比較采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。繪制受試者工作特征曲線(ROC曲線)，計算曲線下面積。

2 結 果

2.13組血清CA19-9、PIVKA-Ⅱ、VEGF水平比較 胰腺癌組血清PIVKA-Ⅱ水平顯著高于健康對照組、胰腺良性病變組，差異有統計學意義(Z=-6.18、-1.94，P<0.05)，而胰腺良性病變組與健康對照組之間，差異無統計學意義(Z=-1.30，P>0.05)。血清CA19-9水平在胰腺癌組高于健康對照組、胰腺良性病變組，差異有統計學意義(Z=-7.69、-2.10，P<0.05)，而胰腺良性病變組與健康對照組之間，差異無統計學意義(Z=-1.01，P>0.05)。見表1。

表1 3組血清CA19-9、PIVKA-Ⅱ、VEGF水平比較[M(P25,P75)]

注：與健康對照組相比，*P<0.05;與胰腺良性病變組相比，#P<0.05

圖1 ROC曲線評價各指標單獨對胰腺癌的診斷價值圖

2.2CA19-9、PIVKⅡ、VEGF用于評價胰腺癌診斷價值的ROC曲線分析 結果顯示，用于評價胰腺癌的ROC曲線下面積CA19-9最大,其次為PIVKA-Ⅱ、VEGF；與參考線下面積相比，除VEGF外，CA19-9、PIVKA-Ⅱ曲線下面積差異均有統計學意義(P<0.05)。見圖1、表2。

表2 ROC曲線評價各指標單獨對胰腺癌的診斷價值參數

2.3不同標志物單項與聯合檢測對胰腺癌診斷的診斷價值 CA19-9、PIVKA-Ⅱ、VEGF、CA19-9+PIVKA-Ⅱ+VEGF在對胰腺癌診斷的靈敏度、陰性預測值、準確度方面的差異具有統計學意義(χ2分別=43.01、18.24、20.23，均P<0.05)，3項聯合檢測可使診斷的靈敏度和陰性預測值分別提高到87.80%和75.50%，特異度和準確度均維持在70.00%左右。見表3。

表3 不同標志物單項與聯合檢測對胰腺癌診斷的診斷價值(%)

3 討 論

CA19-9是胰腺癌診斷常用的腫瘤標志物之一，與既往報道一致，本研究結果顯示，胰腺癌組血清CA19-9水平顯著高于胰腺良性病變組與健康對照組。近年來，在胰腺癌的臨床診斷方面又出現了一些新的相關標志物，有研究報道，PIVKA-Ⅱ除對原發性肝細胞癌具有特異的診斷價值外，對胰腺癌等其他消化道腫瘤亦具有一定的臨床診斷價值[6-8]。PIVKA-Ⅱ是指維生素K缺乏或拮抗劑Ⅱ誘導的蛋白質,又稱為脫-γ-羧基凝血酶原,它是肝臟合成的無凝血活性的異常凝血酶原。1984年LIEBMAN等[6]首次提出PIVKA-Ⅱ可能是原發性肝細胞癌的腫瘤標志物。MATSUEDA等[9]報道則發現，PIVKA-Ⅱ在胰腺的肝樣癌中也有高表達。與報道一致，本研究結果亦發現，胰腺癌組血清PIVKA-Ⅱ水平顯著高于胰腺良性病變組和健康對照組。

VEGF又稱血管通透因子,是一種特異度高的促血管內皮細胞生長因子，具有促進血管通透性增加、細胞外基質變性、血管內皮細胞遷移、增殖和血管形成等作用。有研究報道，胰腺癌組織中VEGF的表達與腫瘤分期和淋巴轉移密切相關[10-11]。本研究中胰腺癌組血清VEGF水平與胰腺良性病變組及健康對照組并無顯著差異，可能與本研究標本多數來自早期胰腺癌患者相關。

有研究報道，不同血清腫瘤標志物對胰腺癌的診斷價值存在差異，目前仍沒有一種血清標志物對胰腺癌的診斷具有滿意的靈敏度和特異度[12-13]。本研究結果顯示，CA19-9、PIVKA-Ⅱ、VEGF單項檢測診斷胰腺癌時，PIVKA-Ⅱ、VEGF的診斷特異度雖高，但靈敏度、陰性預測值及準確度均在60.00%以下；與PIVKA-Ⅱ和VEGF相比，CA19-9的ROC曲線下面積最大，診斷效能最佳，但其診斷靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值及準確度也僅維持在70.00%左右；而CA19-9+PIVKA-Ⅱ+VEGF 3項聯合檢測時，可顯著提高胰腺癌的診斷靈敏度，使診斷的靈敏度和陰性預測值分別提高到87.80%和75.50%，準確度仍維持在70.00%左右。

4 結 論

CA19-9、PIVKA-Ⅱ及VEGF對胰腺癌的診斷均具有重要臨床價值；CA19-9、PIVKA-Ⅱ、VEGF 3項聯合檢測可顯著提高胰腺癌診斷的靈敏度。