中性粒細胞與淋巴細胞比值聯(lián)合癌胚抗原對結(jié)直腸癌早期診斷的研究

陳學敏 彭瓊

摘要：目的? 探討應(yīng)用外周血中性粒細胞與淋巴細胞比值（NLR）聯(lián)合癌胚抗原（CEA）對結(jié)直腸癌早期診斷的意義。方法? 選取2016年1月～2018年1月來我院初治的結(jié)直腸癌患者103例為研究組，選取同期我院147例結(jié)直腸腺瘤性息肉患者為息肉組，體檢中心150例健康體檢者為對照組。通過受試者工作特征曲線（ROC曲線）測定NLR診斷結(jié)直腸癌的臨界值，并與CEA聯(lián)合診斷判斷NLR聯(lián)合CEA對提高結(jié)直腸癌的診斷的特異度及敏感度是否有優(yōu)勢。結(jié)果? 研究組中性粒細胞、NLR和CEA的表達量高于息肉組和對照組（P<0.05）;對照組淋巴細胞的表達量高于研究組和息肉組，息肉組淋巴細胞的表達量高于研究組（P均<0.05）;息肉組NLR和CEA的表達量均高于對照組（P<0.05）。通過ROC曲線測定NLR診斷結(jié)直腸癌的最佳截點值1.760，敏感度83.13%，特異度62.00%，AUC為0.80，95%CI為0.75～0.86。NLR聯(lián)合CEA診斷結(jié)直腸癌的敏感度75.90%，特異度93.35%，AUC為0.89，95%CI為0.84～0.94。結(jié)論? 應(yīng)用NLR對結(jié)直腸癌的診斷有較高的敏感性與特異性，所以當NLR聯(lián)合CEA診斷的時候，結(jié)直腸癌早期的敏感性和特異性會有所提高。

關(guān)鍵詞：中性粒細胞與淋巴細胞比值;癌胚抗原;結(jié)直腸癌;早期診斷

中圖分類號：R735.3? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻標識碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.02.022

文章編號：1006-1959（2019）02-0075-04

結(jié)直腸癌（colorectal cancer，CRC）是臨床上常見的惡性腫瘤之一，隨著人們生活方式、飲食結(jié)構(gòu)的改變加上現(xiàn)在加劇的人口老齡化速度，我國結(jié)直腸癌的發(fā)病率和死亡率逐年增加。通過2012年國際癌癥研究組織（IARC）統(tǒng)計結(jié)果我們了解到，2012年有136萬例的結(jié)直腸癌在全球范圍內(nèi)被發(fā)現(xiàn)，大概有69萬例的患者死于結(jié)直腸癌，在癌癥譜中排第三位，早期結(jié)直腸癌的5年生存率可達到90%，而晚期則不足10%[1]。故近年來CRC早期診斷標志物的研究一直是國內(nèi)外研究的熱點之一。目前癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）是美國國立癌癥綜合網(wǎng)絡(luò)唯一推薦用于CRC監(jiān)測的腫瘤標志物，由Gold和Freeman等于1965年從結(jié)直腸癌中發(fā)現(xiàn)。CRC的發(fā)生是多因素綜合作用的結(jié)果，但其具體的發(fā)病機制目前仍未闡明[2，3]。研究發(fā)現(xiàn)，大量的炎癥細胞和免疫信號分子在機體內(nèi)參與腫瘤發(fā)生、發(fā)展，其中就包括比較重要的中性粒細胞和淋巴細胞[4，5]。由于宿主的免疫狀態(tài)和腫瘤的發(fā)生、發(fā)展存在著重要的關(guān)系，因此可以通過其外周血監(jiān)測全身炎癥指標中性粒細胞與淋巴細胞比值（neutrophil-lymphocyte ratio，NLR）聯(lián)合CEA的變化來研究在CRC早期診斷方面的敏感性和特異性。為此，本研究通過檢測2016年1月～2018年1月于安徽醫(yī)科大學第三附屬醫(yī)院就診的CRC患者103例、結(jié)直腸腺瘤性息肉患者147例、健康對照組150例的NLR和CEA水平，探討二者在CRC早期診斷的應(yīng)用價值。

1資料與方法

1.1一般資料? 選取2016年1月～2018年1月于安徽醫(yī)科大學第三附屬醫(yī)院進行手術(shù)治療的結(jié)直腸癌患者103例作為研究組，其中男62例，女41例，年齡31～79歲，平均年齡（60.20±7.21）歲;選取我院同期結(jié)直腸腺瘤性息肉患者147例作為息肉組，其中男78例，女69歲，年齡33～75歲，平均年齡（57.89±6.93）歲;選取同期在我院體檢中心進行體檢的健康者150例作為對照組，其中男80例，女70例，年齡30～78歲，平均年齡（59.32±7.82）歲。三組在性別、年齡方面比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。所有受試者均知情同意，經(jīng)過安徽醫(yī)科大學第三附屬醫(yī)院倫理委員會批準。

1.2納入及排除標準? 納入標準：①術(shù)前均未行放化療;②均經(jīng)術(shù)前活檢或術(shù)后病理確診。排除標準：患有活動性傳染病、血液病或?qū)嶓w器官腫瘤、阻塞性或潰瘍性病變的患者、既往有腫瘤病史、存在感染或嚴重出血者、伴有其他嚴重致死性疾病。

1.3儀器與方法? CEA檢測使用雅培i-2000化學發(fā)光分析儀（簡稱i-2000）及配套試劑。血常規(guī)檢測使用Sysmex XN-1000血液分析儀（簡稱XN-1000）及配套試劑。所有患者采集空腹靜脈血標本2份，一份靜脈血標本2 ml，用乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）抗凝，在XN-1000上檢測血常規(guī);另一份靜脈血3 ml，無抗凝劑，1500 g離心10 min，取血清在i-2000上自動檢測。所有項目檢測前均保證室內(nèi)質(zhì)控在控，收集手術(shù)前患者的血常規(guī)指標（包括中性粒細胞計數(shù)和淋巴細胞計數(shù)）和CEA、對照組的血常規(guī)指標和CEA，最后計算出NLR。

1.4統(tǒng)計學方法? 運用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件進行所有數(shù)據(jù)的分析處理，（x±s）表示正態(tài)分布的計量資料，采用單因素方差來進行組間的比較，用LSD-t檢驗進行組內(nèi)的比較。用四分位數(shù)進行表述非正態(tài)分布的計量資料，用非參Kruskal-Wallis H檢驗來檢驗組間的比較，運用非參Mann-Whitney U檢驗做組內(nèi)的比較。采用Logistic回歸分析處理NLR以及CEA的數(shù)據(jù)并采用受試者工作特征曲線（ROC曲線）進行分析以上獨立和聯(lián)合檢測性能的指標。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

2.1各組間外周血NLR及CEA的比較? 研究組中性粒細胞的表達量高于息肉組和對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），息肉組與對照組的差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）;對照組淋巴細胞的表達量高于研究組和息肉組，息肉組淋巴細胞的表達量高于研究組，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;研究組NLR和CEA的表達量均高于息肉組和對照組，息肉組NLR和CEA的表達量均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表1。

2.2 NLR、CEA對結(jié)直腸癌的診斷結(jié)果比較? 用NLR作為標志物用于區(qū)分結(jié)直腸癌與結(jié)直腸腺瘤性息肉與健康人群，診斷效能評價采用ROC曲線表示，臨界值是綜合了特異度和靈敏度兩者之和的最大截斷點。用NLR診斷結(jié)直腸癌的最佳截點值1.760，敏感度為83.13%，特異度為62.00%，AUC為0.80，95%CI為0.75～0.86。根據(jù)目前對CEA的研究，以5 ng/ml為診斷界值，即血清CEA≥5 ng/ml被診斷為陽性，血清CEA<5 ng/ml為陰性。NLR聯(lián)合CEA診斷結(jié)直腸癌的敏感度75.90%，特異度93.35%，AUC為0.89，95%CI為0.84～0.94。見表2，圖1。

3討論

結(jié)直腸癌起病隱匿，早期無明顯癥狀，發(fā)現(xiàn)時大多已發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移，導(dǎo)致其高死亡率及低生存率，且患者生活質(zhì)量低。從大量研究證據(jù)中發(fā)現(xiàn)：疾病的發(fā)病率和死亡率可以通過結(jié)直腸癌篩查進行降低，患者的醫(yī)療成本也可以得到降低[6，7]。目前對CRC的早期診斷標志物以及篩查手段的研究較多，比如糞便潛血試驗（FOBT）、結(jié)腸鏡檢查、血清腫瘤標志物等都屬于篩查的手段。FOBT雖然簡便、經(jīng)濟、無創(chuàng)，但結(jié)果易受飲食、藥物的影響而出現(xiàn)假陽性。且在病理組織出血的情況下才能檢測出來，多數(shù) FOBT 陽性者腫瘤已是中晚期，很少能發(fā)現(xiàn)早期腫瘤，故該法的篩查效能并不高。結(jié)腸鏡檢查被認為是結(jié)直腸疾病篩檢的金標準，但其價格相對昂貴，而且檢查前的準備工作很繁瑣、費時，在操作過程中可能出現(xiàn)出血或者腸瘺等并發(fā)癥的風險，因其存在一定的風險性，是一種侵襲性的檢查方法，故選擇進行篩查的人依然不多。而研究也發(fā)現(xiàn)結(jié)腸鏡的依從性比iFOBT降低了約28%[8]。

惡性腫瘤細胞在增殖過程中產(chǎn)生或分泌的生化物質(zhì)是腫瘤的標志物，其有生物學特性，并且可以作為標志物進行腫瘤的早期診斷[9]，其中CEA應(yīng)用最廣泛。CEA是一類糖類蛋白由正常結(jié)腸細胞進行分泌，CRC患者的血清中CEA的含量明顯升高，當患者的CEA質(zhì)量濃度高于5 ng/ml時，患有結(jié)直腸惡性腫瘤可能性很大[10]。研究指出，CEA診斷結(jié)直腸癌敏感性為43%～69%，隨腫瘤進展，敏感性逐漸增加，Dukes D期患者敏感性為89%，特異性均在90%以上[11]。由此確定檢測CRC的首選腫瘤標志物是CEA，但是僅僅通過CEA檢測的話，將會有40%左右的CRC患者未能被發(fā)現(xiàn)。CEA由于其低敏感性及特異性，無法單獨作為一種癌癥篩查的腫瘤標志物。不同類型的惡性腫瘤可以產(chǎn)生同一種腫瘤標志物，但是一種惡性腫瘤卻也可產(chǎn)生多種腫瘤標志物，因此腫瘤標志物種類是很多的。如果單純依據(jù)一種腫瘤標志物，是不能將其作為診斷某一腫瘤的準確依據(jù)，而且多項腫瘤標志物聯(lián)合檢測也會對惡性腫瘤診斷的敏感度有很大提高。有關(guān)研究說明[4，12，13]，炎癥反應(yīng)對腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及轉(zhuǎn)移有至關(guān)重要的作用。通過炎癥細胞釋放炎性介質(zhì)、上調(diào)各種細胞因子、改變腫瘤微環(huán)境等因素，腫瘤局部的炎癥反應(yīng)會對腫瘤細胞增殖有促進作用、抑制調(diào)亡、對腫瘤細胞侵襲與轉(zhuǎn)移進行誘導(dǎo)。另一方面，機體在炎癥反應(yīng)時可釋放一系列能導(dǎo)致機體免疫功能紊亂以及腫瘤免疫逃避的抑制性的免疫介質(zhì);而這些直接體現(xiàn)在腫瘤患者外周血NLR的變化上[14]。

本研究結(jié)果顯示，研究組NLR和CEA表達量均高于息肉組和對照組（P<0.05），息肉組NLR和CEA的表達量均高于對照組（P<0.05），提示NLR和CEA的變化趨勢與機體良惡性的病變程度相關(guān)。ROC曲線測定顯示NLR最佳臨界值為1.760，其敏感度、特異度分別為83.13%、62.00%，AUC為0.80，提示外周血NLR對CRC有一定的診斷價值，但與國外人群中結(jié)直腸癌的診斷臨界值2.2不同[15]，仍需更大的樣本進行研究。NLR與CEA聯(lián)合對結(jié)直腸癌診斷的敏感度、特異度分別為75.90%、93.33%，AUC為0.89，故可提高CEA診斷結(jié)直腸癌的敏感度。研究也表明NLR與CEA在血清中的高表達和CRC預(yù)后不良相關(guān)，兩者聯(lián)合檢測更具有意義[16]。

NLR作為細胞的絕對值計數(shù)，是因為它具有相對的穩(wěn)定性、能反映機體炎性反應(yīng)和腫瘤免疫反應(yīng)之間的相對平衡狀態(tài)等優(yōu)點。NLR在醫(yī)學領(lǐng)域內(nèi)備受關(guān)注，對結(jié)直腸癌的早期篩查有重要意義，是由于它具有一定的敏感度和特異度，而且作為常規(guī)檢查還具有簡便、易行、快速、經(jīng)濟的優(yōu)點。我們未來需要更高標準化NLR臨界值、還要通過大樣本多中心前瞻性隨機研究來為臨床提供更為充足的科學理論依據(jù)，才能進一步地促進在臨床實踐中NLR的實際應(yīng)用和驗證在消化道腫瘤中NLR預(yù)測預(yù)后的價值。

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收稿日期：2018-9-13;修回日期：2018-9-23

編輯/楊倩