大豆酶解蛋白改善斷奶仔豬生長性能及腸道健康的研究

■楊在賓 袁 麗 喬 凱 沈自泉 曲浩杰 于彩云 李軍訓

(1.山東農業大學動物科技學院，山東泰安 271018；2.山東華盛江泉農牧產業發展有限公司，山東臨沂 276000；3.山東泰山生力源集團股份有限公司，山東泰安 271018)

在仔豬飼養早期階段日糧中，使用動物源性蛋白質原料是配合飼料生產中常用的配方組合。血漿蛋白粉、腸膜蛋白和魚粉是仔豬最常用的動物源性蛋白質原料。但是，這些原料的高價格、資源限制、進口依賴等都使它們在配合飼料生產中使用受限。近些年來，動物源性飼料原料對動物潛在的安全隱患越來越受到政府和行業的重視。尋找能夠替代上述動物源性蛋白質原料的植物源性蛋白質飼料產品，一直是全球最熱點的問題[1]。有研究表明，對豆粕進行深度發酵可以大大提高豆粕的營養品質和利用價值，改善動物腸道功能[2]，可以根據動物體的不同需求，使用不同的添加比例替代昂貴的動物源性蛋白原料，比如魚粉等[3]。本研究選用二次深度發酵豆粕作為優質蛋白質原料，以不同比例分別替代仔豬日糧中的血漿蛋白粉、腸膜蛋白粉和魚粉，系統研究了大豆酶解蛋白日糧對斷奶仔豬生長性能、腸道微生物、免疫性能和血清生化指標的影響，證明了大豆酶解蛋白替代血漿蛋白粉、腸膜蛋白粉和魚粉的可行性。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

大豆酶解蛋白(ESM，enzymolytic soybean meal)：粗蛋白質≥51%，豬消化能≥14.84 MJ/kg，由山東泰山生力源集團股份有限公司提供。

血漿蛋白粉：進口噴霧干燥血漿蛋白粉（BP-SD，Blood plasma，spray dried）。粗蛋白質≥78%，山東華盛江泉農牧產業發展有限公司提供。

腸膜蛋白：進口腸膜蛋白（DPS，Dried porcine solubles）。粗蛋白質≥50%，山東華盛江泉農牧產業發展有限公司提供。

魚粉：進口魚粉（FM，Fish meal）。粗蛋白質≥63%，山東華盛江泉農牧產業發展有限公司提供。

1.2 試驗動物與設計

哺乳期仔豬：為了獲得條件一致的斷奶仔豬，本研究選用胎次、體重相近的32窩7日齡哺乳期仔豬，隨機分為4個處理，每個處理4個重復，每個重復2窩豬，進行預試期，哺乳仔豬采食商品日糧（不含大豆酶解蛋白）至斷奶。28 d斷奶后以窩為單位稱重，按照不同處理組轉群，進入斷奶保育期試驗。

保育期仔豬：從上述斷奶仔豬中，采用單因素完全隨機試驗設計，選擇28 d斷奶的三元雜交（杜×長×大）仔豬320頭，隨機分為4個處理，每個處理4個重復，每個重復20頭。分別飼喂：處理1組：3%血漿蛋白+3%腸膜蛋白+3%魚粉日糧；處理2組（無血漿蛋白質）：9%大豆酶解蛋白+3%腸膜蛋白+3%魚粉日糧；處理3組（無腸膜蛋白）：4%大豆酶解蛋白+3%血漿蛋白+3%魚粉日糧；處理4組（無魚粉）：3.5%大豆酶解蛋白+3%血漿蛋白+3%腸膜蛋白日糧。4個處理營養水平一致。詳細日糧組成及營養水平見表1。試驗期28 d。

表1 日糧組成及營養水平（風干基礎）

1.3 測定指標

在今年剛剛結束的中國(昌樂)國際寶石博覽會寶石文化高峰論壇上，中國著名珠寶設計師王旭曾表示：在雕刻工藝方面，四年前昌樂做的珠寶工藝簡單的居多，經過這三四年的發展，昌樂出現了很多非常精致的雕刻，從細節到鑲嵌的寶石，再到造型以及文化注入，都有普遍提高，精品越來越多。而且昌樂藍寶石質地均勻、潔凈、色帶漂亮，只要在雕刻中把這一獨特優勢發揮出來，那么藍寶石就會散發獨到魅力，發展的空間也將更廣。

生長性能：以每個重復為單位，在試驗正式期的始末對仔豬進行稱重，計算仔豬日增重，統計仔豬每日采食量，計算斷奶仔豬日平均采食量，并計算料重比。

腹瀉率：試驗期間，每天觀察仔豬排糞情況，記錄腹瀉個體，并計算腹瀉率。

腹瀉率(%)=（腹瀉仔豬頭數×仔豬腹瀉天數）/（試驗仔豬頭數×正式試驗天數）×100

腸道菌群：在正式期的第14 d，取仔豬直腸新鮮糞樣，測定腸道微生物。

免疫球蛋白：試驗第28 d，每個重復選擇2只豬，采血，測定血清免疫球蛋白濃度（lgM、lgA、lgG）。

1.4 數據統計與分析

數據采用SAS 9.2統計軟件進行方差分析，采用Duncan's法多重比較處理平均值，P＜0.05為差異顯著。

2 結果與分析

2.1 生長性能比較

表2 哺乳仔豬生長性能比較分析

不同比例大豆酶解蛋白替代斷奶仔豬日糧中血漿蛋白粉、腸膜蛋白粉和魚粉后，對生長性能的影響見表3。統計分析表明：與常規的血漿-腸膜-魚粉日糧相比，9%大豆酶解蛋白+3%腸膜+3%魚粉的無血漿蛋白粉日糧，可以獲得與其相同的增重和腹瀉率（P＞0.05），但是，采食量和料重比均顯著降低（P＜0.05）；4%大豆酶解蛋白+3%血漿+3%魚粉的無腸膜蛋白日糧處理顯著提高了日增重，降低了料重比和腹瀉率（P＜0.05）；3.5%大豆酶解蛋白+3%血漿+3%腸膜的無魚粉日糧處理生長性能表現最好，試驗期末體重、日增重和日采食量顯著增加，料重比和腹瀉率均顯著降低（P＜0.05），處理之間仔豬成活率沒有顯著差異（P＞0.05）。由此證明，使用9%的大豆酶解蛋白可替代日糧中3%的血漿蛋白粉、4%的大豆酶解蛋白可替代日糧3%的腸膜蛋白質、3.5%大豆酶解蛋白可替代日糧中3%的魚粉。

表3 斷奶仔豬生長性能比較分析

與3%血漿+3%腸膜+3%魚粉日糧組相比，9%大豆酶解蛋白+3%腸膜+3%魚粉、4%大豆酶解蛋白+3%血漿+3%魚粉和3.5%大豆酶解蛋白+3%血漿+3%腸膜組的仔豬試驗期末體重分別增加了1.2%、3.3%和7.0%；日增重分別提高了1.7%、5.4%和13.3%；料重比降低了5.7%、4.4%和4.1%。9%大豆酶解蛋白+3%腸膜+3%魚粉處理仔豬采食量降低了5.3%；3.5%大豆酶解蛋白+3%血漿+3%腸膜組的仔豬采食量增加了8.6%；4%大豆酶解蛋白+3%血漿+3%魚粉和3.5%大豆酶解蛋白+3%血漿+3%腸膜組的仔豬腹瀉率分別降低了27.4%和33.0%。

2.2 腸道微生物比較

仔豬轉群后，試驗至14 d，直腸取糞樣進行微生物測定的結果見表4。不同處理間需氧菌總數無差異（P＞0.05），大腸桿菌總數和乳酸菌總數有改變的趨勢。4%大豆酶解蛋白+3%血漿+3%魚粉的日糧組獲得了最低的大腸桿菌總數，9%大豆酶解蛋白+3%腸膜+3%魚粉組獲得了最高的乳酸菌總數。無大豆酶解蛋白日糧組的大腸桿菌總數最多，乳酸菌總數最少。由此說明，大豆酶解蛋白可能有改善仔豬腸道有益菌數量的趨勢。

表4 斷奶仔豬糞便細菌數統計分析(lgCFU/g)

與3%血漿+3%腸膜+3%魚粉日糧組相比，9%大豆酶解蛋白+3%腸膜+3%魚粉、4%大豆酶解蛋白+3%血漿+3%魚粉和3.5%大豆酶解蛋白+3%血漿+3%腸膜組的仔豬糞便大腸桿菌總數分別降低了0.7%、10.2%和5.4%；乳酸菌總數分別增加了2.5%、1.2%和0.4%。

2.3 免疫功能比較

仔豬轉群后，飼喂大豆酶解蛋白飼料至28 d，對血清免疫抗體測定的結果見表5。不同處理間IgG無顯著差異（P＞0.05），IgA和IgM水平第1、2組間差異顯著（P＜0.05）。9%大豆酶解蛋白+3%腸膜+3%魚粉組獲得了最高的IgA和IgM抗體水平。由此說明，大豆酶解蛋白有改善仔豬免疫功能的功效。

表5 斷奶仔豬血清免疫抗體指標分析(mg/ml)

與3%血漿+3%腸膜+3%魚粉日糧組相比，9%大豆酶解蛋白+3%腸膜+3%魚粉、4%大豆酶解蛋白+3%血漿+3%魚粉和3.5%大豆酶解蛋白+3%血漿+3%腸膜組的IgA水平分別提高了16.1%、6.5%和4.8%；IgM水平分別增加了17.1%、1.9%和2.5%。

3 討論

大豆酶解蛋白是豆粕經過滅菌、好氧發酵、厭氧發酵后，制備而成的一種特殊的小肽。其同時具備發酵飼料和小肽的優點。前人研究報道，豆粕在發酵過程中可以消除抗營養因子，還能產生豐富的煙酸、葉酸等維生素，促進動物體內益生菌的生長繁殖，有利于動物腸道發育，促進腸道健康[4-5]。陳勇等[6]和Boza等[7]指出，小肽能促進游離氨基酸的轉運，消除氨基酸之間的吸收競爭，可通過動物腸道黏膜直接吸收，耗能低、速度快、不易飽和；且蛋白質以小肽的形式供給，可以使利用率顯著提高。

劉海燕等[8]研究表明，發酵豆粕對乳仔豬生長性能的改善具有積極作用。在飼糧中使用14.27%和28.54%的發酵豆粕可以使仔豬的日增重顯著提高(P＜0.05)，腹瀉率極顯著降低(P＜0.01)，且仔豬對飼糧中的粗蛋白、干物質和有機物利用率得到顯著提高(P＜0.05)。用發酵豆粕飼喂斷奶仔豬的試驗結果表明，仔豬料重比和腹瀉指數可分別降低8.39%(P＜0.05)和39.96%(P＜0.01)[9]。以8%的發酵豆粕“肽多樂”替代普通日糧中的魚粉和膨化大豆，加工成等氮日糧，同時對40日齡的斷奶仔豬進行飼喂試驗，結果表明，發酵豆粕可以顯著降低仔豬的死淘率和腹瀉率(P＜0.05)，雖然生長性能沒有顯著差異，卻提高了整體經濟效益[10]。本研究結果表明，不同比例大豆酶解蛋白替代血漿蛋白粉、腸膜蛋白和魚粉，均不同程度地降低了仔豬料重比和腹瀉率，這與前人研究結果類似，也證實了大豆酶解蛋白在斷奶仔豬上應用的可行性和功能性。

腸道菌群平衡對動物的健康和生長性能具有重要的意義[11]。俞曉輝[12]和Amato等[13]研究報道，仔豬日糧中添加發酵豆粕，可以使腸道內菌群多樣性和相似性顯著提高，外界因素變化時，腸道菌群不容易失調，也能反映仔豬的健康。本研究結果還發現，大豆酶解蛋白有改善仔豬腸道有益菌數量的趨勢，分析其原因可能是微生物發酵可以減少豆粕中的蛋白酶抑制因子，大分子蛋白被降解成為更容易被吸收的小肽，發酵過程產生的代謝產物能夠抑制大腸桿菌的繁殖，促進乳酸菌的生長，從而改善腸道內菌群平衡[14-17]，同時也減少了氨氣、硫化氫和腐胺的產生[18]。

本研究結果還表明，大豆酶解蛋白能顯著提高斷奶仔豬的血清抗體水平，從而增強免疫力。究其原因可能是豆粕發酵過程中，有效降解了抗原蛋白，使仔豬的免疫刺激效應減少；給仔豬飼喂發酵豆粕能使其腸系膜淋巴細胞指數顯著增加，對免疫器官的生長起到正向促進作用，從而增加機體免疫功能。

4 結論

4.1 與3%血漿+3%腸膜+3%魚粉日糧組相比，9%大豆酶解蛋白+3%腸膜+3%魚粉、4%大豆酶解蛋白+3%血漿+3%魚粉和3.5%大豆酶解蛋白+3%血漿+3%腸膜組的仔豬試驗期末體重分別為增加了1.2%、3.3%和7.0%；日增重分別提高了1.7%、5.4%和13.3%；料重比降低了5.7%、4.4%和4.1%。9%大豆酶解蛋白+3%腸膜+3%魚粉處理仔豬采食量降低了5.3%；3.5%大豆酶解蛋白+3%血漿+3%腸膜組的仔豬采食量增加了8.6%；4%大豆酶解蛋白+3%血漿+3%魚粉和3.5%大豆酶解蛋白+3%血漿+3%腸膜組的仔豬腹瀉率分別降低了27.4%和33.0%。

4.2 使用9%的大豆酶解蛋白可以替代日糧中3%的血漿蛋白粉，4%的大豆酶解蛋白可以替代日糧3%的腸膜蛋白粉，3.5%大豆酶解蛋白可以替代日糧中3%的魚粉。大豆酶解蛋白可能有改善仔豬腸道有益菌數量的趨勢。

4.3 與3%血漿+3%腸膜+3%魚粉日糧組相比，9%大豆酶解蛋白+3%腸膜+3%魚粉、4%大豆酶解蛋白+3%血漿+3%魚粉和3.5%大豆酶解蛋白+3%血漿+3%腸膜組的仔豬糞便大腸桿菌總數分別降低了0.7%、10.2%和5.4%；乳酸菌總數分別增加了2.5%、1.2%和0.4%。

4.4 與3%血漿+3%腸膜+3%魚粉日糧組相比，9%大豆酶解蛋白+3%腸膜+3%魚粉、4%大豆酶解蛋白+3%血漿+3%魚粉和3.5%大豆酶解蛋白+3%血漿+3%腸膜組的IgA分別提高了16.1%、6.5%和4.8%；IgM分別增加了17.1%、1.9%和2.5%。

4.5 仔豬飼喂添加3.5%、4%、9%大豆酶解蛋白日糧，可以不同程度地改善斷奶仔豬的生長性能、飼料效率；改善腸道健康；增加免疫力。