武建鋒 劉洋
嘔吐毒素是一種常見的污染毒素,會引起人或動物出現嘔吐等中毒癥狀,因此被稱為嘔吐毒素。小麥是人們喜愛的主食之一,同時也是嘔吐毒素分布量最大的農作物之一。在小麥種植與倉儲管理中都有可能形成嘔吐毒素,嚴重影響消費者的身體健康。因此,對小麥嘔吐毒素含量進行檢測對于保證食品安全有著重要的意義。
嘔吐毒素及其危害
嘔吐毒素(V omitoxin),是一種常見的真菌毒素,脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol,縮寫DON)其擁有高穩定性的化學性質,受熱也不易分解,在自然環境中適應性很強,廣泛存在于不同種類的糧食作物中。嘔吐毒素主要源自于單端孢霉烯族化合物,例如尖孢鐮刀菌、粉紅鐮刀菌等等。經過試驗研究發現,該類單端孢霉烯族毒素的數量眾多,約有150種左右,該類毒素繁殖生長速度快,難以有效控制,所以對糧食作物產生了巨大的破壞。該類速度的理化性質也十分有限,通常為純白色結晶,在紫外線照射下午熒光,但處于水中的溶解度較高,遇熱也不易分解,因此嘔吐毒素的測定與降解需要選擇合適的技術進行。嘔吐毒素對人體毒性很強,對人體危害極大,能夠嚴重損害真核細胞、原核細胞、腫瘤細胞。嘔吐毒素能夠滲入磷脂雙層,作用于亞細胞水平;并且通過細胞膜產生作用,利用自由基介導的脂質過氧化作用等方式對原核細胞進行作用,進而嚴重危害細胞的正常功能。
小麥中嘔吐毒素含量檢測
膠體金三線定量法。膠體金真菌毒素檢測條是定量檢測小麥中嘔吐毒素最為簡易的方式,檢測過程對下小麥樣品的處理簡易,8min- 10min就可以得出檢測結果。試樣提取液中的霉菌毒素與檢測條中的膠體金微粒發生反應,霉菌毒素與膠體金微粒的結合物以及膠體金微粒在側流作用下移動,當到達檢測線時,包被的抗原與膠體金微粒結合發生呈色反應,其顏色深淺與試樣中霉菌毒素的含量相關。用讀數儀測定檢測條上檢測線和質控線顏色深淺,根據顏色深淺和讀數儀內置的標準曲線計算出試樣中霉菌毒素含量。膠體金三線定量法簡單、快捷、準確、成本低,適合企業在初檢時使用。
ELISA檢測方法。取出處于冷藏狀態的小麥嘔吐毒素檢測的ELISA測試盒,將其于室溫環境下放置到正常室溫狀態。按照說明書的測試要求準備洗滌液與嘔吐毒素單克隆抗體工作液。同時,將酶標板微孔放置在反應架支板上,詳細標注類別,再對其進行拍干處理。在兩種不同類別中的標準品孔中添加50μl的嘔吐毒素溶液,樣品孔中計入50μl樣品提取液,沒空都分別加入50μl的抗DON單克隆抗體工作液,將其搖勻,處于37攝氏度環境下培育60min。然后進行甩干處理,使用洗滌液洗板3次后拍干。每孔分別加入100μl美標記的羊抗鼠抗體結合物工作液,處于37攝氏度下培育30min。然后進行處理,洗滌液洗板后拍干處理。并在其中每孔分別加入50μl與底物液、顯色液,在37攝氏度環境下放置15min后取出,并分別添加50μl的終止液,同時在450nm波長下對各個孔進行吸光度值A進行測定。ELISA檢測能夠半定量檢測小麥樣品中嘔吐毒素的含量。
液相色譜檢測方法。液相色譜方法是根據《食品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的測定、免疫親和層析凈化高效液相色譜法》中的方法進行檢測。主要過程是使用提取液提取樣品中的脫氧雪腐鐮刀菌烯醇,經過免疫親和柱凈化后,運用高效液相色譜紫外線檢測儀進行檢測。這一技術靈敏度較高,測定范圍較廣,能夠十分有效的將嘔吐毒素與其他真菌毒素分離開來,具有較高的分離效率與回收效率,可靠性強,檢測成本相對較高,設備儀器使用維護成本高,通常作為檢測機構的最終判定方法。
小麥中的嘔吐毒素是由真菌毒素所導致的,要降低小麥中的嘔吐毒素必須要強化小麥種植中的田間管理與小麥儲存期間的倉儲管理,全方位的抑制真菌生長。同時,國家食品檢測機構要建立健全的食品安全檢測體系,運用高效而準確的檢測方式,對小麥中嘔吐毒素進行檢測,盡可能的降低嘔吐毒素對動物與人體的危害,保證小麥與小麥制品的安全。
作者簡介:
武建鋒(1989-)男,漢族,河南西峽人,南陽市糧油質量檢測中心,本科,工程師,研究方向:糧油檢測。劉洋(1991-)男,漢族,河南淅川人,南陽市糧油質量檢測中心,本科,工程師,研究方向:糧油質量檢測。