小麥中嘔吐毒素含量檢測(cè)

武建鋒 劉洋

嘔吐毒素是一種常見的污染毒素，會(huì)引起人或動(dòng)物出現(xiàn)嘔吐等中毒癥狀，因此被稱為嘔吐毒素。小麥?zhǔn)侨藗兿矏鄣闹魇持唬瑫r(shí)也是嘔吐毒素分布量最大的農(nóng)作物之一。在小麥種植與倉儲(chǔ)管理中都有可能形成嘔吐毒素，嚴(yán)重影響消費(fèi)者的身體健康。因此，對(duì)小麥嘔吐毒素含量進(jìn)行檢測(cè)對(duì)于保證食品安全有著重要的意義。

嘔吐毒素及其危害

嘔吐毒素（V omitoxin），是一種常見的真菌毒素，脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（deoxynivalenol，縮寫DON）其擁有高穩(wěn)定性的化學(xué)性質(zhì)，受熱也不易分解，在自然環(huán)境中適應(yīng)性很強(qiáng)，廣泛存在于不同種類的糧食作物中。嘔吐毒素主要源自于單端孢霉烯族化合物，例如尖孢鐮刀菌、粉紅鐮刀菌等等。經(jīng)過試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，該類單端孢霉烯族毒素的數(shù)量眾多，約有150種左右，該類毒素繁殖生長(zhǎng)速度快，難以有效控制，所以對(duì)糧食作物產(chǎn)生了巨大的破壞。該類速度的理化性質(zhì)也十分有限，通常為純白色結(jié)晶，在紫外線照射下午熒光，但處于水中的溶解度較高，遇熱也不易分解，因此嘔吐毒素的測(cè)定與降解需要選擇合適的技術(shù)進(jìn)行。嘔吐毒素對(duì)人體毒性很強(qiáng)，對(duì)人體危害極大，能夠嚴(yán)重?fù)p害真核細(xì)胞、原核細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞。嘔吐毒素能夠滲入磷脂雙層，作用于亞細(xì)胞水平；并且通過細(xì)胞膜產(chǎn)生作用，利用自由基介導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化作用等方式對(duì)原核細(xì)胞進(jìn)行作用，進(jìn)而嚴(yán)重危害細(xì)胞的正常功能。

小麥中嘔吐毒素含量檢測(cè)

膠體金三線定量法。膠體金真菌毒素檢測(cè)條是定量檢測(cè)小麥中嘔吐毒素最為簡(jiǎn)易的方式，檢測(cè)過程對(duì)下小麥樣品的處理簡(jiǎn)易，8min- 10min就可以得出檢測(cè)結(jié)果。試樣提取液中的霉菌毒素與檢測(cè)條中的膠體金微粒發(fā)生反應(yīng)，霉菌毒素與膠體金微粒的結(jié)合物以及膠體金微粒在側(cè)流作用下移動(dòng)，當(dāng)?shù)竭_(dá)檢測(cè)線時(shí)，包被的抗原與膠體金微粒結(jié)合發(fā)生呈色反應(yīng)，其顏色深淺與試樣中霉菌毒素的含量相關(guān)。用讀數(shù)儀測(cè)定檢測(cè)條上檢測(cè)線和質(zhì)控線顏色深淺，根據(jù)顏色深淺和讀數(shù)儀內(nèi)置的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出試樣中霉菌毒素含量。膠體金三線定量法簡(jiǎn)單、快捷、準(zhǔn)確、成本低，適合企業(yè)在初檢時(shí)使用。

ELISA檢測(cè)方法。取出處于冷藏狀態(tài)的小麥嘔吐毒素檢測(cè)的ELISA測(cè)試盒，將其于室溫環(huán)境下放置到正常室溫狀態(tài)。按照說明書的測(cè)試要求準(zhǔn)備洗滌液與嘔吐毒素單克隆抗體工作液。同時(shí)，將酶標(biāo)板微孔放置在反應(yīng)架支板上，詳細(xì)標(biāo)注類別，再對(duì)其進(jìn)行拍干處理。在兩種不同類別中的標(biāo)準(zhǔn)品孔中添加50μl的嘔吐毒素溶液，樣品孔中計(jì)入50μl樣品提取液，沒空都分別加入50μl的抗DON單克隆抗體工作液，將其搖勻，處于37攝氏度環(huán)境下培育60min。然后進(jìn)行甩干處理，使用洗滌液洗板3次后拍干。每孔分別加入100μl美標(biāo)記的羊抗鼠抗體結(jié)合物工作液，處于37攝氏度下培育30min。然后進(jìn)行處理，洗滌液洗板后拍干處理。并在其中每孔分別加入50μl與底物液、顯色液，在37攝氏度環(huán)境下放置15min后取出，并分別添加50μl的終止液，同時(shí)在450nm波長(zhǎng)下對(duì)各個(gè)孔進(jìn)行吸光度值A(chǔ)進(jìn)行測(cè)定。ELISA檢測(cè)能夠半定量檢測(cè)小麥樣品中嘔吐毒素的含量。

液相色譜檢測(cè)方法。液相色譜方法是根據(jù)《食品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的測(cè)定、免疫親和層析凈化高效液相色譜法》中的方法進(jìn)行檢測(cè)。主要過程是使用提取液提取樣品中的脫氧雪腐鐮刀菌烯醇，經(jīng)過免疫親和柱凈化后，運(yùn)用高效液相色譜紫外線檢測(cè)儀進(jìn)行檢測(cè)。這一技術(shù)靈敏度較高，測(cè)定范圍較廣，能夠十分有效的將嘔吐毒素與其他真菌毒素分離開來，具有較高的分離效率與回收效率，可靠性強(qiáng)，檢測(cè)成本相對(duì)較高，設(shè)備儀器使用維護(hù)成本高，通常作為檢測(cè)機(jī)構(gòu)的最終判定方法。

小麥中的嘔吐毒素是由真菌毒素所導(dǎo)致的，要降低小麥中的嘔吐毒素必須要強(qiáng)化小麥種植中的田間管理與小麥儲(chǔ)存期間的倉儲(chǔ)管理，全方位的抑制真菌生長(zhǎng)。同時(shí)，國(guó)家食品檢測(cè)機(jī)構(gòu)要建立健全的食品安全檢測(cè)體系，運(yùn)用高效而準(zhǔn)確的檢測(cè)方式，對(duì)小麥中嘔吐毒素進(jìn)行檢測(cè)，盡可能的降低嘔吐毒素對(duì)動(dòng)物與人體的危害，保證小麥與小麥制品的安全。

作者簡(jiǎn)介：

武建鋒（1989-）男，漢族，河南西峽人，南陽市糧油質(zhì)量檢測(cè)中心，本科，工程師，研究方向：糧油檢測(cè)。劉洋（1991-）男，漢族，河南淅川人，南陽市糧油質(zhì)量檢測(cè)中心，本科，工程師，研究方向：糧油質(zhì)量檢測(cè)。