γ-干擾素釋放試驗(yàn)在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用及進(jìn)展

史培，徐凱進(jìn)（通信作者）

浙江大學(xué)附屬第一醫(yī)院感染科 （浙江杭州 310003）

結(jié)核病（tuberculosis， TB）是結(jié)核分枝桿菌（mycobacterium tuberculosis，MTB）感染引起的呼吸道傳染病，目前該病疫情依然嚴(yán)峻。據(jù)世界衛(wèi)生組織（World Health Organization，WHO）估計(jì)，2017年全球結(jié)核病新發(fā)病例數(shù)為1 000萬例，中國(guó)有88.9萬例；全球有157萬人死于結(jié)核病；全球23%的人口（約17億）存在潛伏結(jié)核感染[1]。

結(jié)核分枝桿菌屬胞內(nèi)寄生菌，其免疫主要是以T細(xì)胞為主的細(xì)胞免疫，這也是結(jié)核病診斷的困難所在。控制結(jié)核病的關(guān)鍵在于控制傳染源，高特異度和高靈敏度的早期診斷技術(shù)及試劑對(duì)結(jié)核病的早期診斷，及時(shí)有效治療，有效切斷傳染源，控制疾病流行至關(guān)重要。當(dāng)前結(jié)核病的眾多診斷方法或多或少存在缺陷。傳統(tǒng)的痰涂片鏡檢靈敏度低，而分離培養(yǎng)法鑒定菌種及藥敏結(jié)果所需時(shí)間較長(zhǎng)（4～6周）[2]。病理學(xué)檢查取材不易、靈敏度低且鑒別診斷困難。結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)（tuberculin skin test，TST）雖簡(jiǎn)便廉價(jià)，但其使用的抗原——結(jié)核菌素純蛋白衍生物（PPD）與卡介苗（bacille Calmette-Guérin，BCG）和非結(jié)核分枝桿菌（nontuberculosis mycobacteria，NTM）之間存在交叉反應(yīng)，特異度較低；TST依賴人體的免疫反應(yīng)，對(duì)免疫受損人群靈敏度不足[3]；且TST耗時(shí)較長(zhǎng)（48～72 h），易受操作者主觀因素影響。γ-干擾素釋放試驗(yàn)(interferon gamma release assay，IGRA)作為一種新興免疫學(xué)診斷方法，在控制結(jié)核感染及發(fā)病等方面得到迅速推廣，且隨著新的生物學(xué)標(biāo)志物的尋找和IGRA方法學(xué)的改進(jìn)，其在臨床上具有廣闊的發(fā)展前景。

1 IGRA原理和方法

結(jié)核分枝桿菌中存在獨(dú)有的“RD1”區(qū)域，醫(yī)學(xué)界利用該基因區(qū)編碼的抗原多肽作為特異性抗原，主要有早期分泌抗原靶分子6（early secreted antigenic target 6，ESAT-6）和培養(yǎng)濾液蛋白10（culture filtrate protein 10，CFP-10），有些產(chǎn)品在此基礎(chǔ)上增加了TB7.7抗原多肽，體外刺激機(jī)體特異性效應(yīng)T淋巴細(xì)胞，通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)或酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)（ELISA或ELISPOT）定量檢測(cè)所釋放的γ-干擾素水平，進(jìn)而判定是否存在MTB，這便是IGRA的原理。

目前，IGRA主要有兩種商業(yè)產(chǎn)品：一種是以ELISA原理為基礎(chǔ)的澳大利亞Cellestis公司生產(chǎn)的QFT（QuantiFERONTB）、QFT-G（QuantiFERON-TB Gold）和QFT-GIT（QuantiFERON-TB Gold In-Tube），該產(chǎn)品采用ELISA檢測(cè)經(jīng)MTB特異性抗原刺激后致T細(xì)胞所釋放的γ-干擾素含量；另一種是以ELISPOT原理為基礎(chǔ)的英國(guó)牛津Immunotech公司生產(chǎn)的T-SPOT.TB，該產(chǎn)品可分離外周血單個(gè)核細(xì)胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMC），通過ELISPOT技術(shù)檢測(cè)經(jīng)MTB特異性抗原刺激后能產(chǎn)生γ-干擾素的T細(xì)胞數(shù)量。

IGRA使用的結(jié)核桿菌特異性抗原位于RD1區(qū)， 與卡介苗及大多數(shù)非分枝桿菌無交叉免疫反應(yīng)，具有較TST更高的特異度。第一代QFT使用PPD作為特異性抗原，第二代使用ESAT-6和CFP-10，第三代則使用ESAT-6、CFP-10和TB7.7，因此其診斷特異度也不斷提高。2015年底公布的第四代檢測(cè)試劑QuantiFERON-TB Gold Plus（QFT-Plus）首次加入CD8+T細(xì)胞應(yīng)答數(shù)據(jù)，還可評(píng)估潛伏性結(jié)核感染發(fā)展為活動(dòng)性結(jié)核病的風(fēng)險(xiǎn)[4]。關(guān)于這項(xiàng)檢測(cè)方法在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用，臨床已進(jìn)行了諸多研究。

2 IGRA的臨床應(yīng)用

2.1 篩查潛伏性結(jié)核感染

潛伏性結(jié)核感染（latent tuberculosis infection，LTBI）定義為細(xì)菌活性持續(xù)存在，受到免疫控制，且沒有活動(dòng)性結(jié)核病臨床證據(jù)的狀態(tài)，但不能將其徹底清除。潛伏性感染者如不進(jìn)行治療，5%～10%會(huì)發(fā)展成活動(dòng)性結(jié)核，在免疫抑制等高危人群中，這一比例更高[5]。從結(jié)核病低發(fā)病率國(guó)家（1＜1 000人年）過去10年間對(duì)不同高危人群潛伏性結(jié)核感染發(fā)生率和活動(dòng)性結(jié)核病發(fā)病率的調(diào)查來看[6]，矽肺患者潛伏性結(jié)核感染發(fā)生率較高，QFT-GIT、T-SPOT.TB的陽性率分別為46.6%和61.0%，隨訪10年期間其活動(dòng)性結(jié)核病發(fā)病率最高，中位發(fā)病率為32.1/1 000人年；血透患者活動(dòng)性結(jié)核發(fā)病率緊隨其后，中位發(fā)病率為26.6/1 000人年，QFT-GIT、T-SPOT.TB、TST 3種方法檢測(cè)出的潛伏感染率分別為33.4%、43.6%、21.9%；HIV感染者活動(dòng)性結(jié)核發(fā)病率也較高，中位發(fā)病率為16.2/1 000人年，QFT-GIT、T-SPOT.TB、TST的陽性率較低，分別為14.5%、11.3%、19.2%，考慮感染率較低與該人群免疫水平有關(guān)。

我國(guó)是全球結(jié)核潛伏感染負(fù)擔(dān)最重的國(guó)家之一[7]，篩查L(zhǎng)TBI具有重要意義。Gao等[8]對(duì)我國(guó)農(nóng)村大規(guī)模人口同時(shí)使用IGRA （QFT-GIT）和TST進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌感染率調(diào)查，結(jié)果顯示，＞5歲人群中的LTBI在13%～20%，均數(shù)為18%；TST與QFT-GIT的結(jié)果差異大，考慮與我國(guó)BCG普遍接種這一背景有關(guān)，故以TST結(jié)果為基準(zhǔn)的流行病學(xué)調(diào)查可能高估了我國(guó)結(jié)核潛伏感染率。該研究還發(fā)現(xiàn)基于中國(guó)農(nóng)村QFT轉(zhuǎn)變后持續(xù)陽性結(jié)果年結(jié)核感染率為1.5%，老年人是新發(fā)感染的高風(fēng)險(xiǎn)人群，且感染具有持續(xù)性。

由此可見，IGRA對(duì)診斷LTBI和預(yù)測(cè)發(fā)展為活動(dòng)性結(jié)核的價(jià)值更好。WHO強(qiáng)烈推薦IGRA應(yīng)當(dāng)在部分資源條件許可的高收入和中高收入國(guó)家用于檢測(cè)LTBI，而在中低收入國(guó)家和結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國(guó)家，IGRA不應(yīng)取代TST 檢查[9]。

2.2 輔助診斷活動(dòng)性結(jié)核病

2.2.1 準(zhǔn)確性評(píng)價(jià)

結(jié)核病例的發(fā)現(xiàn)和及時(shí)治療是結(jié)核病控制的基石。基于不同的流行病學(xué)背景（低或高負(fù)擔(dān)國(guó)家）、年齡或免疫狀態(tài)，多篇文獻(xiàn)評(píng)估了IGRA在活動(dòng)性結(jié)核尤其在菌陰結(jié)核病中的診斷價(jià)值，報(bào)道的IGRA總體靈敏度和總體特異度分別為80%和79%，高于TST（總體靈敏度和總體特異度分別為65%和75%）[10-11]。為比較T-SPOT.TB和QFT-GIT在結(jié)核感染方面的診斷價(jià)值，邵凌云等[12]選取41例活動(dòng)性結(jié)核患者和201例非結(jié)核患者，結(jié)果顯示T-SPOT.TB和QFT-GIT診斷活動(dòng)性結(jié)核的靈敏度分別為85.4%和70.0%，特異度分別為72.1%和77.0%，提示兩者對(duì)活動(dòng)性結(jié)核的診斷效力相似。盡管IGRA無法確診或排除活動(dòng)性結(jié)核，但其在缺少細(xì)菌學(xué)依據(jù)的結(jié)核病診斷中具有一定的輔助價(jià)值。

2.2.2 輔助診斷肺外結(jié)核

肺外結(jié)核(extrapulmonary tuberculosis ，EPTB)因含菌量少、取材困難常無法獲得病原學(xué)或病理確診，IGRA在肺外結(jié)核的診斷中具有較高靈敏度。由于抗原特異性效應(yīng)T細(xì)胞趨于MTB感染的局部聚集，IGRA技術(shù)也可用于檢測(cè)支氣管肺泡灌洗液、胸腹水、腦脊液等非外周血標(biāo)本，從而診斷肺內(nèi)及肺外結(jié)核。Liu等[13]對(duì)168例胸腔積液患者進(jìn)行了前瞻性研究，采用T-SPOT.TB同時(shí)檢測(cè)其胸腔積液和外周血標(biāo)本。結(jié)果顯示胸腔積液T-SPOT特異度明顯高于外周血T-SPOT.TB（P=0.002）。Aggarwal等[14]Meta分析了20個(gè)（1 085例）檢測(cè)全血和14個(gè)（727例）檢測(cè)胸腔積液的研究結(jié)果，全血檢測(cè)和胸腔積液檢測(cè)的靈敏度和特異度分別為77%和71%、72%和78%，進(jìn)而得出IGRA對(duì)結(jié)核性胸膜炎的診斷價(jià)值有限的結(jié)論。以上提示，文獻(xiàn)報(bào)道的檢測(cè)胸腔積液γ-干擾素的靈敏度和特異度差異較大；因目前IGRA試劑盒的檢測(cè)流程及界限值并不完全適用于非血液標(biāo)本，其應(yīng)用于漿膜腔積液的診斷效能有待進(jìn)一步研究。

2.2.3 在特殊人群中的診斷價(jià)值

由于IGRA試驗(yàn)依賴于人體的免疫反應(yīng)，應(yīng)特別注意在免疫缺陷患者中的應(yīng)用，包括HIV感染、免疫相關(guān)疾病、惡性腫瘤、移植患者等。來自高、低負(fù)擔(dān)國(guó)家的薈萃分析數(shù)據(jù)顯示[15]，QFT-GIT檢測(cè)HIV/TB雙重感染的靈敏度和特異度分別為69%和76%，T-SPOT.TB檢測(cè)的靈敏度和特異度分別為89%和87%。提示：與QFT-GIT相比，T-SPOT.TB辨別HIV感染者中的活動(dòng)性結(jié)核病例更為準(zhǔn)確。分析原因，考慮T-SPOT.TB方法不受患者外周血淋巴細(xì)胞數(shù)差異的影響，更能客觀、準(zhǔn)確地反映機(jī)體對(duì)MTB的特異性免疫功能。有研究發(fā)現(xiàn)QFT和TSPOT.TB的不確定結(jié)果在HIV感染者中分別為8.2%和5.9%，這一比例在結(jié)核高負(fù)擔(dān)國(guó)家以及CD4+T細(xì)胞＜200個(gè)時(shí)更高[16]。IGRA不確定結(jié)果概率的增加緣于免疫抑制狀態(tài)影響T淋巴細(xì)胞功能，從而引起陽性對(duì)照管的γ-干擾素分泌不足。IGRA并非HIV陽性患者活動(dòng)性結(jié)核確診的最佳方法，目前使用的IGRA不能代替細(xì)菌學(xué)方法或核酸擴(kuò)增技術(shù)(nucleic acid amplification techniques，NAAT)。

兒童感染MTB后發(fā)生活動(dòng)性結(jié)核的風(fēng)險(xiǎn)高于成人，因兒童細(xì)菌載量低、咳嗽反射差等特點(diǎn)，導(dǎo)致病原學(xué)檢查陽性率很低。國(guó)內(nèi)外IGRA檢測(cè)兒童結(jié)核病的薈萃分析顯示其靈敏度和特異度差別較大，多數(shù)研究結(jié)果顯示，IGRA的靈敏度與TST相當(dāng)，而特異度優(yōu)于TST。Laurenti等[17]納入15篇文獻(xiàn)評(píng)估了IGRA在免疫功能正常兒童中檢測(cè)細(xì)菌學(xué)證實(shí)的活動(dòng)性結(jié)核病的靈敏度和特異度，結(jié)果顯示，TST、QFTGIT和T-SPOT.TB的靈敏度分別為88.2%、89.6%和88.5%，無顯著差異；但QFT-GIT和T-SPOT.TB比TST具有更高的特異度（分別為95.4%、96.8%和86.3%）。該結(jié)論提示兩種IGRA可用于檢測(cè)免疫功能正常兒童的活動(dòng)性結(jié)核病例。有研究顯示＜5歲或HIV感染兒童的TST及IGRA檢測(cè)靈敏度較低[18]。因此，應(yīng)用IGRA對(duì)兒童活動(dòng)性結(jié)核病進(jìn)行輔助診斷時(shí)要充分考慮年齡及免疫狀態(tài)的影響。

2.2.4 鑒別其他疾病

在鑒別診斷中，痰涂片陽性而IGRA陰性者需要排除非結(jié)核分枝桿菌（non-tuberculous mycobacterium，NTM）感染。但需注意的是，在極少數(shù)非結(jié)核分枝桿菌——堪薩斯分枝桿菌、海分枝桿菌、蘇爾加分枝桿菌、戈登分枝桿菌等也存在與IGRA所用相同的抗原，故IGRA不能區(qū)分MTB感染還是以上幾種NTM感染。在孤立性肺結(jié)節(jié)或腫塊中結(jié)核瘤與腫瘤的鑒別仍是一大診斷難題。Wang等[19]對(duì)CT、病理和（或）病原學(xué)確診的331例患者同時(shí)進(jìn)行TST、IGRA檢測(cè)，提示直接利用T-SPOT.TB結(jié)果不能很好地區(qū)分結(jié)核瘤和腫瘤，進(jìn)一步計(jì)算了TB-specific antigen（TBAg）與T-SPOT.TB的植物凝集素（phytohemagglutinin，PHA）的比值，閾值取0.236時(shí)TBAg/PHA比值在鑒別孤立性肺結(jié)節(jié)或腫塊是否為結(jié)核瘤或腫瘤的靈敏度和特異度分別為80.6%和93.3%，受試者工作特性曲線（ROC）曲線下面積（AUC）為0.921，表明TBAg/PHA比值可改善對(duì)這兩種疾病的鑒別。TBAg/PHA比值還可用于區(qū)分結(jié)核瘤與其他良性疾病（AUC 0.909，靈敏度85.07%，特異度90%）。

2.3 預(yù)測(cè)活動(dòng)性結(jié)核病

陽性的IGRA結(jié)果與隨訪期間發(fā)展為活動(dòng)性結(jié)核密切相關(guān)。阮巧玲等[20]比較了T-SPOT.TB和TST在我國(guó)活動(dòng)性肺結(jié)核病患者的家庭接觸者中預(yù)測(cè)活動(dòng)性結(jié)核病的能力，對(duì)157名家庭接觸者隨訪6年，計(jì)算發(fā)病率為11.0/1 000人年，T-SPOT.TB的陽性預(yù)測(cè)值（PPV）為8.3%，陰性預(yù)測(cè)值（NPV）為96.7%；TST≥5 mm和TST≥10 mm的PPV分別為7.7%和9.5%，NPV均為95.8%。可見，家庭接觸者結(jié)核發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)高于一般人群，而T-SPOT.TB與TST對(duì)活動(dòng)性結(jié)核病的預(yù)測(cè)能力相當(dāng)。

一項(xiàng)高質(zhì)量的研究來自Andrews等[21]前瞻性隨訪南非2 512名18～24周齡未感染HIV的幼兒，進(jìn)行QFT篩查與監(jiān)測(cè)結(jié)核感染和發(fā)病狀況。結(jié)果顯示，QFT檢測(cè)結(jié)果轉(zhuǎn)陽且γ-干擾素值非常高（＞4.0 IU/ml）的幼兒，其結(jié)核病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)顯著提高，是結(jié)果無變化幼兒的40倍和QFT轉(zhuǎn)陽且γ-干擾素值在0.35～4.0 IU/ml范圍內(nèi)幼兒的11倍；當(dāng)使用4.0 IU/mL作為判讀閾值時(shí)，后續(xù)對(duì)疾病的靈敏度和特異度分別為36%和99%，對(duì)結(jié)核發(fā)病率預(yù)值可達(dá)43%。提示IGRA陽性結(jié)果較TST陽性結(jié)果更能準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)幼兒活動(dòng)性結(jié)核的發(fā)病。

2.4 監(jiān)測(cè)療效

活動(dòng)性結(jié)核病在有效的抗結(jié)核治療后，結(jié)核桿菌載量和效應(yīng)T細(xì)胞數(shù)量會(huì)隨之下降，理論上IGRA反應(yīng)會(huì)從陽性轉(zhuǎn)變?yōu)殛幮浴榱颂骄縄GRA能否用于評(píng)估治療反應(yīng)并預(yù)測(cè)活動(dòng)性結(jié)核病的失敗或復(fù)發(fā)，一些研究嘗試將IGRA中γ-干擾素的變化與已確定的治療反應(yīng)標(biāo)志物（涂片和培養(yǎng)轉(zhuǎn)陰）聯(lián)系起來[22]。在一項(xiàng)最大的研究中，Denkinger等[23]發(fā)現(xiàn)隨著時(shí)間的推移γ-干擾素反應(yīng)顯著下降，但與涂片或培養(yǎng)轉(zhuǎn)陰沒有顯著相關(guān)性。Clifford等[24]系統(tǒng)綜述了IGRA對(duì)活動(dòng)性結(jié)核病和LTBI的治療監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)，約一半的研究發(fā)現(xiàn)IGRA的定量反應(yīng)在結(jié)核病治療過程中下降，尤其是在活動(dòng)性結(jié)核病中；定性分析顯示，治療結(jié)束時(shí)IGRA逆轉(zhuǎn)率的研究差異很大（0%～72%），這表明測(cè)量IGRA的定性變化并不能為監(jiān)測(cè)活動(dòng)性或潛伏性結(jié)核病的抗結(jié)核治療提供可靠方法。關(guān)于LTBI的治療是否影響IGRA反應(yīng)，一篇質(zhì)量較高的隨機(jī)試驗(yàn)研究給出了相同的結(jié)論，該研究將211例LTBI患者隨機(jī)分為異煙肼（INH）治療組和安慰劑組，通過T-SPOT試驗(yàn)分別測(cè)定0、1、3、6個(gè)月時(shí)的CFP-10和ESAT-6反應(yīng)，隨訪期觀察到反應(yīng)有所下降，但兩組結(jié)果無顯著性差異[25]。

3 IGRA的未來方向

IGRA是診斷結(jié)核感染的免疫學(xué)方法，為進(jìn)一步提高特異度和靈敏度、區(qū)分潛伏與活動(dòng)性感染、預(yù)測(cè)活動(dòng)性結(jié)核風(fēng)險(xiǎn)、監(jiān)測(cè)抗結(jié)核治療反應(yīng)，基于IGRA的發(fā)展方向大多聚焦在以下幾個(gè)方面。

3.1 細(xì)胞刺激抗原的篩選

抗原的特異性是決定γ-干擾素釋放試驗(yàn)結(jié)果特異度的主要因素。抗原Rv2654 （TB7.7）已被納入新一代的QFT-GIT。在ELISPOT試驗(yàn)中添加第三個(gè)抗原（Rv3879c），提高了T-SPOT.TB的靈敏度[26]。隨著試劑的進(jìn)一步改良，需要在MTB的RD1區(qū)篩選更新的目標(biāo)蛋白。今已發(fā)現(xiàn)Rv3873、Rv3615c為進(jìn)展為活動(dòng)性結(jié)核的早期標(biāo)志物。譚曙光[27]篩選鑒定了7條Rv3615c抗原中中國(guó)人群主要位點(diǎn)分子限制性細(xì)胞表位，再通過大樣本臨床驗(yàn)證試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與T-SPOT.TB相比較，應(yīng)用Rv3615c、ESAT-6和CFP-10抗原組成的三抗原組合肽庫對(duì)結(jié)核感染的總體檢出率提高了3.6%，對(duì)菌陰結(jié)核的檢出率提高了6.6%。

3.2 多種細(xì)胞因子聯(lián)合檢測(cè)

γ-干擾素是細(xì)胞免疫介導(dǎo)產(chǎn)生的最為關(guān)鍵的細(xì)胞因子，其他細(xì)胞因子，如干擾素誘導(dǎo)蛋白10（IP-10）、白細(xì)胞介素2（IL-2）、單核細(xì)胞趨化蛋白2（MCP-2）的發(fā)掘，使少數(shù)γ-干擾素水平不升高、IGRA檢測(cè)陰性的結(jié)核病患者得以早期診斷。2014年，Guo等[28]對(duì)14項(xiàng)IP-10診斷研究數(shù)據(jù)進(jìn)行的Meta分析表明，IP-10診斷結(jié)核分枝桿菌感染的總靈敏度為73%，特異度為83%，其診斷活動(dòng)性結(jié)核病的曲線下面積為0.88。提示建立在現(xiàn)有IGRA的基礎(chǔ)上，IP-10可作為一種新的診斷標(biāo)志物，從而提高診斷準(zhǔn)確率。在評(píng)估這些生物標(biāo)志物的診斷準(zhǔn)確性的同時(shí)，未來的研究方向還應(yīng)關(guān)注多種細(xì)胞因子聯(lián)合檢測(cè)可能是區(qū)分活動(dòng)性和潛伏性感染及預(yù)測(cè)結(jié)核發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)鍵。

3.3 結(jié)核感染不同時(shí)期分子標(biāo)志物的研究

結(jié)核分枝桿菌特異性CD4+和CD8+T細(xì)胞亞群在不同MTB感染階段的表型和功能的變化，可能可以區(qū)分活動(dòng)性結(jié)核和潛伏性結(jié)核感染[29]。Pollock等[30]前瞻性比較活動(dòng)性結(jié)核和潛伏性結(jié)核感染患者中結(jié)核分枝桿菌特異性細(xì)胞免疫情況，通過多色流式細(xì)胞儀測(cè)量CD4+和CD8+T細(xì)胞表型和γ-干擾素、IL-2和TNF-α的分泌。結(jié)果表明：活動(dòng)性結(jié)核病顯示γ-干擾素/TNF-α單陽或γ-干擾素與TNF-α雙陽更多見，純化蛋白衍生物特異性抗原CD4+單分泌TNF-αT細(xì)胞的效應(yīng)表型能準(zhǔn)確區(qū)分活動(dòng)性結(jié)核病和潛伏結(jié)核感染，曲線下面積為0.99；因此，得出結(jié)論：T細(xì)胞表型和功能的聯(lián)合檢測(cè)是判斷結(jié)核病活動(dòng)性的一種高敏生物標(biāo)志物。

某些抗原只能在結(jié)核感染的特定狀態(tài)下被識(shí)別。結(jié)核抗原肝素結(jié)合血凝素（HBHA）被認(rèn)為是一種潛伏期特異性抗原，與ESAT-6、CFP-10以及純化蛋白衍生物特異性抗原CD4+T細(xì)胞結(jié)合，可以區(qū)分活動(dòng)性和潛伏性結(jié)核病感染[31-32]。目前這些聯(lián)合方法的診斷和監(jiān)測(cè)潛力仍有待大規(guī)模前瞻性研究驗(yàn)證。

綜上所述，IGRA方法是目前診斷LTBI的首要標(biāo)準(zhǔn)；在活動(dòng)性結(jié)核病及多種肺外結(jié)核診斷中具有輔助及補(bǔ)充診斷作用；IGRA的診斷價(jià)值需要結(jié)合人群的年齡、免疫狀態(tài)等進(jìn)行分析，才能得到更為合理的應(yīng)用；增加新的診斷抗原、增加γ-干擾素以外的診斷標(biāo)記將是IGRA的未來研究方向，具有一定前景。