禽流感病毒感染血管內(nèi)皮細(xì)胞研究進(jìn)展

胡亮亮

（陽(yáng)信縣畜牧獸醫(yī)局，山東陽(yáng)信 251800）

1 血管內(nèi)皮細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)

內(nèi)皮突起：位于內(nèi)皮細(xì)胞的管腔面，厚道約為30～60nm 的糖蛋白復(fù)合物。生理?xiàng)l件下，內(nèi)皮突起可調(diào)控血管通透性，參與抑制血液凝集和細(xì)胞黏附過程，具有保護(hù)血管的作用。

質(zhì)膜小泡：為于內(nèi)皮細(xì)胞質(zhì)中，直徑約為60～70nm。小泡開口于管腔面和聚合面，偶見于附著面。主要起運(yùn)輸大分子物質(zhì)的作用。

懷布爾-帕拉德體（W-P 小體）：是一種有包膜的桿狀結(jié)構(gòu)，長(zhǎng)度約為3nm，直徑約為0.1～0.3nm，參與VIII 因子相關(guān)抗原的制造和儲(chǔ)備，還可作為其載體，與凝血反應(yīng)相關(guān)。

2 血管內(nèi)皮細(xì)胞的連接結(jié)構(gòu)

內(nèi)皮細(xì)胞的壁側(cè)有小突起穿過基底膜與平滑肌細(xì)胞形成肌內(nèi)皮血管內(nèi)皮細(xì)胞間的連接方式主要有粘附連接（gap junction）、縫隙連接（adherens junction）和緊密連接（adherens junction）。

粘附連接：粘附連接是相鄰內(nèi)皮細(xì)胞間經(jīng)鈣依賴性鈣黏蛋白（cadherin）同型結(jié)合（homotypic binding）導(dǎo)致的內(nèi)皮細(xì)胞間物理聯(lián)系（physical connection）.參與連接的蛋白質(zhì)主要包括斑珠蛋白、α-連環(huán)蛋白、肌動(dòng)蛋白、橋粒斑蛋白、細(xì)絲狀肌動(dòng)蛋白、肌凝蛋白等。

縫隙連接：縫隙連接由相鄰細(xì)胞膜間各自的中空結(jié)合體構(gòu)成的連接兩側(cè)細(xì)胞質(zhì)的親水性的通道，這些通道由連接蛋白構(gòu)成，對(duì)離子和小分子物質(zhì)的通透性及信息通訊起作用。

緊密連接：緊密連接一般位于細(xì)胞側(cè)面的近游離緣相鄰面，多呈帶狀分布，少數(shù)點(diǎn)狀分布，是細(xì)胞極性和小分子圍細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)的承擔(dān)者。參與緊密連接的蛋白有跨膜蛋白：咬合蛋白（occludin）、密蛋白（alaudin）和連接協(xié)調(diào)分子（JAM），ZO-1、扣帶蛋白。主要作用是封閉相鄰細(xì)胞的縫隙，確保生物體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。

3 內(nèi)皮細(xì)胞功能

內(nèi)皮細(xì)胞主要具有以下功能：為細(xì)胞提供一個(gè)不粘著的管腔面；調(diào)節(jié)凝血機(jī)制；調(diào)節(jié)血管緊張度；參與炎癥反應(yīng)和免疫反應(yīng)；參與脂質(zhì)代謝；促進(jìn)血管形成；參與物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的調(diào)控；參與調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注和血管壁通透性。此外，內(nèi)皮細(xì)胞還可以分泌神經(jīng)遞質(zhì)，如血管緊張素，并對(duì)其起作用。

4 血管內(nèi)皮細(xì)胞表面受體和配體

血管內(nèi)皮細(xì)胞表面被覆著一層糖蛋白復(fù)合物，稱為糖皮層（Glycocalyx）。糖皮層由膜磷脂和細(xì)胞膜蛋白組成，包括糖脂，蛋白聚糖，糖蛋白，糖胺聚糖。血管內(nèi)皮表面物質(zhì)在細(xì)菌、病毒入侵和免疫炎癥反應(yīng)中起到重要作用。

粘附分子（Adhesion molecules，AM）：VEC 能夠表達(dá)特異性的表面粘附分子。AM 能夠識(shí)別特異性受體，發(fā)生細(xì)胞間的相互粘附作用。他們參與了內(nèi)皮細(xì)胞間，內(nèi)皮細(xì)胞與基質(zhì)間及內(nèi)皮細(xì)胞與血細(xì)胞間的粘附。

唾液酸受體（Sialic acid receptor，SAR）：血管內(nèi)皮細(xì)胞表面富含唾液酸糖蛋白和唾液酸糖脂，且有證據(jù)證明大部分內(nèi)皮細(xì)胞均能表達(dá)SAα-2，3-Gal 和SAα-2，6-Gal 唾液酸受體。

5 血管內(nèi)皮分泌的細(xì)胞因子

血管內(nèi)皮細(xì)胞可以分泌多種細(xì)胞因子，具有重要的生物學(xué)功能，主要細(xì)胞因子包括：炎癥介質(zhì)（IL-1、IL-6、IL-8 和TNF）、集落刺激因子（GM-CSF，G-CSF）、血小板生成素（TPO）等。

6 血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是從牛垂體濾泡星狀細(xì)胞的體外培養(yǎng)液中純化出的一種能特異性作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞的多功能細(xì)胞生長(zhǎng)因子，具有增強(qiáng)血管通透性、促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞分裂和增殖等作用、促進(jìn)淋巴管形成等作用。

目前發(fā)現(xiàn)的VEGF 有5 大家族，即VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D 和胎盤生長(zhǎng)因子（PGF），均為二聚體糖蛋白。

7 病毒感染血管內(nèi)皮細(xì)胞研究進(jìn)展

多項(xiàng)研究證明，一些病毒能夠直接感染血管內(nèi)皮細(xì)胞，并由于病毒感染血管內(nèi)皮細(xì)胞導(dǎo)致細(xì)胞損傷進(jìn)而發(fā)展為病毒性疾病。目前，已經(jīng)有研究表明漢灘病毒（hantavirus），登革熱病毒（dengue virus）、巨細(xì)胞病毒（cytomegal virus），豬瘟病毒（hog cholera virus）和腎綜合征出血熱病毒（hemorrhagic fever renal syndrom virus）等均可以感染血管內(nèi)皮細(xì)胞。

目前，已經(jīng)有體外研究表明H5N1 禽流感病毒能夠在體外感染肺泡上皮細(xì)胞、呼吸性細(xì)支氣管非纖毛立方上皮細(xì)胞和肺泡巨嗜細(xì)胞。并且有研究發(fā)現(xiàn)，H5N1型禽流感病毒感染血管內(nèi)皮細(xì)胞，激活細(xì)胞產(chǎn)生I 型干擾素，啟動(dòng)固有免疫應(yīng)答。用純化的甲型流感病毒體外感染人血管內(nèi)皮細(xì)胞后，檢測(cè)發(fā)現(xiàn)H1N1 亞型禽流感病毒能感染血管內(nèi)皮細(xì)胞且能復(fù)制。有研究表明急性肺損傷（acute lung injury，ALI）/急性呼吸窘迫綜合征（acute respiratory distress syndrome，ARDS）是導(dǎo)致感染流感病毒的動(dòng)物和人病程加重甚至死亡的主要原因，而血管內(nèi)皮細(xì)胞是發(fā)生損傷的主要靶器官并且也是重要的效應(yīng)細(xì)胞。因此，研究體內(nèi)感染禽流感病毒血管內(nèi)皮細(xì)胞的感染狀態(tài)，對(duì)于禽流感病毒的感染機(jī)制的研究具有重要意義。