試論ELISA技術(shù)在食品安全檢測(cè)中的應(yīng)用

陳 霞

（河池市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，廣西河池 547000）

食品安全問(wèn)題是關(guān)乎國(guó)計(jì)民生的大事，不但會(huì)影響國(guó)民的身體健康與生命安全，對(duì)國(guó)家整體經(jīng)濟(jì)發(fā)展亦有所制約，ELISA技術(shù)屬于免疫分析檢測(cè)法，具有可靠性高、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)勢(shì)，目前廣泛應(yīng)用于農(nóng)藥殘留、食品添加劑、畜產(chǎn)品微生物與生物毒素等項(xiàng)目的檢測(cè)中，該技術(shù)的應(yīng)用對(duì)于保障食品安全具有重要意義。

1 ELISA技術(shù)概述

ELISA技術(shù)，即enzyme linked immunosorbent assay，漢譯為酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)。ELISA是20世紀(jì)60年代在組織化學(xué)與免疫熒光相結(jié)合的基礎(chǔ)上被開(kāi)發(fā)出來(lái)的新技術(shù)，ELISA技術(shù)是現(xiàn)階段發(fā)展最快、使用范圍最廣的酶免疫技術(shù)。ELISA技術(shù)應(yīng)用原理是把可溶性抗原或者抗體吸附到固相表面，同時(shí)保證抗原或者抗體的免疫活性，只有這樣才能在化學(xué)反應(yīng)后，僅通過(guò)固相洗滌，就能實(shí)現(xiàn)分離抗原或者抗體的目標(biāo)，操作十分簡(jiǎn)便。

2 ELISA技術(shù)在食品安全檢測(cè)中的應(yīng)用分析

2.1 應(yīng)用于檢測(cè)食品添加劑與違禁用劑

使用ELISA技術(shù)檢測(cè)包裝食品添加劑是否違規(guī)的相關(guān)研究日益增加。具體而言，應(yīng)用ELISA技術(shù)檢測(cè)食品用劑包括下述幾方面，一是檢測(cè)食品中是否添加了蘇丹紅1號(hào)，直接將蘇丹紅1號(hào)作用于抗原，鏈接橋選擇Sudan-C3-OVA中的OVA，然后將OVA與HRP相連，形成Sudan-C3-OVA-HRP，然后將單抗作為基礎(chǔ)運(yùn)用ELISA技術(shù)能夠直接檢測(cè)出蘇丹紅1號(hào)是否存在；二是采用黃原膠抗體，結(jié)合ELISA技術(shù)檢測(cè)黃原膠。研究者通過(guò)對(duì)比檢測(cè)多組燒烤醬與沙拉醬發(fā)現(xiàn)，黃原膠每組檢測(cè)差異小于10%。另外，在應(yīng)用ELISA技術(shù)方面還研究了檢測(cè)食品中罌粟堿的可能性，發(fā)現(xiàn)引進(jìn)樣品稀釋法進(jìn)行檢測(cè)具有良好的效果。由此可見(jiàn)，ELISA技術(shù)在檢測(cè)食品用劑方面具有廣闊的應(yīng)用前景。

2.2 應(yīng)用于檢測(cè)畜產(chǎn)品微生物與生物毒素

（1）檢測(cè)畜產(chǎn)品微生物

在保障食品安全方面，人們逐漸認(rèn)識(shí)到了微生物的重要性，并逐步加強(qiáng)了對(duì)微生物的檢測(cè)，畜產(chǎn)品極易被微生物污染。在檢測(cè)實(shí)踐中，應(yīng)用EILSA技術(shù)檢測(cè)畜產(chǎn)品微生物含量，通常能夠檢測(cè)出致病菌與一般污染，例如，某檢測(cè)中心在監(jiān)管魚(yú)蝦貝類養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)市場(chǎng)中大量魚(yú)蝦貝類產(chǎn)品都具有存在沙門(mén)氏菌污染的情況。對(duì)于這一現(xiàn)象，該檢測(cè)中心使用了ELISA技術(shù)，希望能夠防范魚(yú)蝦貝類產(chǎn)品與桿菌交叉反應(yīng)。檢測(cè)人員在實(shí)際工作中往往會(huì)受到多種因素影響，例如，復(fù)雜的檢測(cè)環(huán)境，比方說(shuō)檢測(cè)大腸桿菌，在一般條件下難以培養(yǎng)出大腸桿菌，若改變條件進(jìn)行培養(yǎng)有可能使其復(fù)蘇，這會(huì)損害人體健康，因此，在檢測(cè)該類微生物時(shí)要求較高且難度較大，一般技術(shù)難以滿足檢測(cè)需求，此時(shí)為了達(dá)到安全、高效、準(zhǔn)確的檢測(cè)目的，檢測(cè)人員也可以采用ELISA技術(shù)，在短時(shí)間內(nèi)通過(guò)固相載體吸附抗原實(shí)現(xiàn)對(duì)產(chǎn)品的檢測(cè)，此法更科學(xué)安全有效。

（2）檢測(cè)畜產(chǎn)品生物毒素

畜產(chǎn)品中含有生物毒素的根源在于食物鏈的作用，生物毒素對(duì)人體生命健康的威脅較大。使用ELISA技術(shù)能夠發(fā)現(xiàn)致病生物毒素，例如，真菌毒素、藻類堵塞等。ELISA技術(shù)在檢測(cè)生物毒素方面應(yīng)用研究較為完善，技術(shù)應(yīng)用效果良好，在檢測(cè)工作中需要根據(jù)檢測(cè)毒素的種類選取有針對(duì)的ELISA試劑盒。例如，檢測(cè)黃曲霉素，黃曲霉素是畜產(chǎn)品中最為普遍的生物毒素，對(duì)人體危害較大，選擇ELISA技術(shù)檢測(cè)該毒素，早在1998年的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中就得出僅需要2h左右就可以準(zhǔn)確判斷出產(chǎn)品內(nèi)是否含有該毒素。該檢測(cè)結(jié)論為后續(xù)ELISA技術(shù)在檢測(cè)生物毒素方面的應(yīng)用奠定了良好的基礎(chǔ)。

3 應(yīng)用于檢測(cè)轉(zhuǎn)基因食品

在檢測(cè)轉(zhuǎn)基因食品方面，目前美國(guó)FDA已經(jīng)開(kāi)發(fā)出使用雙夾心ELISA技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因玉米產(chǎn)品。以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因玉米為例，ELISA試劑盒具有檢測(cè)Cry9C蛋白的功能，應(yīng)用ELISA技術(shù)將CP4-EPSPS與抗體相結(jié)合，可得出檢測(cè)結(jié)果。在檢測(cè)大豆轉(zhuǎn)基因方面，13個(gè)歐盟成員國(guó)與瑞典總計(jì)37個(gè)實(shí)驗(yàn)室表明，檢測(cè)大豆轉(zhuǎn)基因的準(zhǔn)確度高達(dá)99%。ELISA分析檢測(cè)技術(shù)較傳統(tǒng)分析檢測(cè)技術(shù)靈敏度更高、特異性更強(qiáng)，且對(duì)設(shè)備要求不高、檢測(cè)成本低、自動(dòng)化程度高。但是ELISA技術(shù)從學(xué)科角度看，其綜合性較強(qiáng)，需要多種學(xué)科支持，在部分領(lǐng)域還存在問(wèn)題。第一，由于待檢測(cè)物質(zhì)含量低、存在交叉反應(yīng)，許多物質(zhì)需要和OVA、BSA等物質(zhì)結(jié)合后才擁有免疫原性，且并非所有物質(zhì)都能夠制出抗體，ELISA技術(shù)受到檢測(cè)物質(zhì)本身的制約；第二，ELISA技術(shù)自身不足，制備特殊抗體難度大，例如，制備單克隆抗體需要大量時(shí)間，且在反應(yīng)條件、反應(yīng)時(shí)間、酶標(biāo)板等方面要求較高。另外，應(yīng)用ELISA技術(shù)檢測(cè)成分有限，對(duì)試劑要求高，檢測(cè)人員必須認(rèn)識(shí)到pH值、溶劑等因素對(duì)ELISA技術(shù)的影響。

4 總結(jié)

ELISA技術(shù)準(zhǔn)確性、安全性均較高，只需要使用少量有機(jī)試劑就能夠獲得高品質(zhì)的檢測(cè)結(jié)果。ELISA技術(shù)在食品安全檢測(cè)中的有效運(yùn)用能夠準(zhǔn)確、高效地檢測(cè)出食品中含有的危害物質(zhì)，進(jìn)而提示相關(guān)人員采取有效方式進(jìn)行處理，保證在食品流入市場(chǎng)前，解決危害人體安全的所有因素。