大腸埃希氏菌O157∶H7/NM標準物質制備

柯 璐 戴曉麗 徐 珊 黃嫦嬌 林 杰

（1.福建出入境檢驗檢疫局技術中心 福建福州 350003；2.福建省檢驗檢疫技術研究重點實驗室）

1 前言

生物特性標準物質是標準物質中特殊的一類，在提高實驗室的測試水平和科研能力上有重要作用，是檢測技術高效、準確運行的重要前提和保障[1]。含基質的生物特性標準物質的研究已成為標準物質研制的重點，我國在含食品基質的食源性致病菌標準品領域仍處于起步階段[2]。大腸埃希氏菌O157∶H7/NM（Escherichia Coli O157∶H7/NM）是腸出血性大腸埃希氏菌的主要病原血清型。雞肉、牛肉、生奶及其制品，蔬菜、水果及其制品等均可能受其污染，受污染的食物在外觀與氣味上不明顯，但是仍可使人患病，嚴重者甚至會引起死亡[3，4]。因此，研制添加基質的大腸埃希氏菌O157∶H7/NM定量標準物質有重要意義。本文以大腸埃希氏菌O157∶H7/NM為目標菌，添加雞肉粉，配合保護劑通過冷凍干燥法制備含一定菌數的標準物質，并進行均勻性和穩定性驗證，為今后開展含基質的微生物標準物質的研究提供一定參考作用。

2 材料與方法

2.1 材料與試劑

2.1.1 菌源

大腸埃希氏菌O157:H7/NM（E.coli O157:H7/NM，以下簡稱“O157”）（上海漢尼公司），ATCC 43895。

2.1.2 基質

雞胸脯肉（市場）低溫運輸，-20℃儲存備用。

2.1.3 試劑（表 1、表 2）

表1 保護劑

表2 培養基及其他試劑

2.1.4 其他

一次性針頭過濾器（33 mm，0.22 μm）（廣州賽國生物科技有限責任公司）；一次性使用無菌注射器（江蘇康友醫用器械有限公司）；5 mL西林瓶（配套丁基膠塞）（安徽華欣藥用玻璃制品有限公司）；篩網：50目標準篩。

2.2 儀器與設備

主要儀器與設備詳見表3。……