胚胎停育絨毛染色體檢測及相關治療研究進展

楊 姝，趙莉萍*

（包頭醫學院研究生院，包頭醫學院附屬包鋼三醫院婦產科，內蒙古 包頭 014010）

胚胎停育，是婦產科常見的疑難病，其發病主要與遺傳、免疫、內分泌等因素相關，但具體的發病機制還不能完全了解，而且治療效果也不顯著，使得胚胎停育成為目前臨床上急需解決的難題之一[1]。

遺傳因素應該是胚胎停育最主要的病因因素。目前，對基因等微觀層面的研究已成為研究胚胎停育病因的熱點，這為研究胚胎停育的發病機制提供了新思路，同時也為臨床治療提供了新方向。筆者將列舉目前文獻報道的幾種檢測染色體的方法，同時對因遺傳因素所導致的胚胎停育的相關治療進行說明，以期為臨床實際工作中闡明胚胎停育相關的遺傳機制，降低其發生率，促進婦女生殖健康提供理論依據和指導。

1 概 述

胚胎停育在臨床上可以分為兩類，一類是受精卵著床后沒有發育出胎芽，超聲檢查孕7周后只可見一空孕囊，另一類是曾有胎芽發育但不久之后胎芽停止發育而死亡，超聲結果孕囊中有胎芽但是沒有檢測出原始心管搏動[2]。

近年來，由于社會、家庭等因素高齡孕婦逐漸增多，胚胎停育的發生率也不斷上升，有些患者出現了多次胚胎停育，因此對胚胎停育的病因進行深入的研究，完善各種檢測方法有利于進一步闡明胚胎停育的發病機制，從而為臨床的診斷和治療工作奠定一定的基礎。

胚胎的絨毛細胞由滋養層細胞以及胚外中胚層細胞組成，它與胎兒組織具有完全一致的遺傳性狀，通過對胚胎絨毛進行染色體的檢測，可以客觀地反映出胎兒自身的情況。

2 胚胎停育絨毛染色體檢測的幾種方法

2.1 細胞培養核型分析技術

對染色體的核型分析是檢測絨毛組織染色體異常的首選方法[3]。

陳霞慧等對824例胚胎停育患者絨毛組織的核型分析，結果證實了染色體數目異常是導致胚胎停育染色體異常最主要的原因，而數目異常的原因可能主要是在形成配子或在受精卵形成過程中，某一條染色體沒有成功分離，導致了胚胎無法正常發育[5]。

雖然細胞培養核型分析易受到標本污染、培養周期長等的影響，而且它的檢測范圍也受到限制[4]，但是它依舊是一種值得應用的檢測手段。

2.2 熒光原位雜交技術

FISH技術將原位雜交技術與染色體顯帶技術相結合，利用堿基互補配對原則，在一定條件下用標記探針DNA與目標DNA進行雜交后，在熒光顯微鏡下對待測DNA進行定性以及定位分析。

FISH省去了細胞培養、染色體制備的時間，可是由于它有限的探針數，不能排除所有可能異常的胚胎染色體非整倍體[5]，而且標記探針的位置受到了限制，在可以明確診斷的異常中，也存在有部分診斷盲區。

2.3 熒光定量PCR技術(QF-PCR)

QF-PCR檢測通過擴增短串聯的重復序列，對流產標本以及需要產前診斷的標本進行染色體拷貝數異常的診斷[6]。

2.4 多重連接探針擴增技術

先把目的基因復制在依賴探針上，然后將捕獲的目的片段用一對通用的引物進行擴增，之后對擴增產物進行毛細管電泳，最后對所獲得的目的片段進行分析[3]。

2.5 微陣列技術

以單核苷酸多態性為基礎的SNP array以及以比較基因組雜交為基礎的array CGH。二者均具有分辨率高、高通量的特點[7]。但它不能對染色體的平衡易位、倒位等作出診斷分析，此外由于它的敏感性高而容易產生過度診斷。

2.6 核型細菌人工染色體標記-微球鑒別/分離法(KLBoBs)

BoBs檢測分為Prenatal BoBs和KaryoLite BoBs(KLBoBs)兩種，Prenatal BoBs是對染色體非整倍體、9種微缺失進行檢測的方法，KL-BoBs可以檢測出24條染色體的非整倍體的變化，但是因為探針位置的原因它不能檢測出微缺失綜合征[8]。

2.7 高通量測序技術

NGS技術能夠快速而且準確的檢測出染色體異常、全基因組拷貝數變異(copy number variants，CNVs)等情況，它不需要進行細胞培養，也不會受到標本污染等的影響，所以使得檢測的結果更加準確和可靠。高通量測序技術目前已經運用到鑒定與不明原因胚胎停育相關的遺傳改變中。

絨毛膜絨毛樣品的常規核型分析受到細胞培養及其分辨率的限制。Shen等的研究顯示，通過陣列CGH和NGS實現了早期自發性流產對CVSs染色體異常的高檢測率。具體而言，亞微觀重組的檢測對于患有復發性流產的夫婦的遺傳咨詢是重要的。

新興的高通量測序技術幫助人們進一步揭開了遺傳領域的神秘面紗，為之后對微缺失和微重復與致病性的關系研究提供了方法，也為生殖遺傳學咨詢開辟了新的方向。

3 遺傳因素所致胚胎停育相關治療

在臨床上醫生通過對胚胎停育患者絨毛組織進行染色體檢查和分析，可以幫助此類患者在再次妊娠時進行必要的產前診斷以及遺傳咨詢，盡可能避免有染色體異常的患兒出生。通過大力開展這項工作，可以避免不必要的保胎、避免畸形兒的出生，并且對更好地普及優生優育也有重要作用。

對于胚胎停育的患者，核型分析應該至少進行一次，因為異常的胚胎核型傾向于重復自身，也是預后良好的預測因子。了解胚胎停育的病因可以澄清復發風險，并有助于確定未來計劃生育的適當管理。

據報道，孕前遺傳學篩查，包括了雖然沒有臨床癥狀但是對某種疾病患病風險增高的攜帶者的相關檢查，以及對可能把某一種臨床已知的遺傳性疾病的突變傳遞給了胎兒的女性進行相關檢查。但是孕前檢查并不能決定胎兒去留，還必須對患者進行一些有創檢測，如果發現胎兒確實受累才可以選擇終止妊娠。

4 預 防

孕前保健和孕前咨詢在女性順利妊娠方面起到了非常重要的作用，通過了解和改變備孕女性的不良生活方式和不正確的行為習慣來干預這些不良醫學狀況，然后可以有效地降低相關圍生期疾病以及高危妊娠的發生率和孕婦的死亡率。

王曉霜等通過對大樣本孕前保健檢查結果以及妊娠結局的分析，總結得出了孕前保健檢查可以為優生遺傳咨詢提供客觀數據，對備孕育齡女性作出科學的健康指導，提升妊娠期安全以及母嬰妊娠結局的質量，因此孕前保健檢查對優生優育有重要意義。侯大喬等研究顯示濃茶、咖啡、被動吸煙等因素都是導致胚胎停育的相關危險因素；而良好的性格、心情愉悅等也是避免胚胎停育的保護因素。

綜上所述，胚胎停育已經受到國內外學者的廣泛關注，多種檢測方法用于研究胚胎停育染色體相關問題，其中高通量測序技術作為新興技術可以用作絨毛組織染色體異常檢測的首選方法。在防治工作上應大力開展遺傳咨詢和產前診斷，而孕前檢查、孕期產檢也是必不可少的。此外，對于胚胎停育患者臨床心理干預措施能明顯改善其心身健康，緩解不良情緒反應，提高患者的治愈率。