高攀 吳桐忠 劉鵬 路宗緯 景亞平


摘要:對塔額墾區6個團場的15個羊養殖場(戶)采樣并分離大腸桿菌,用紙片擴散法進行抗菌藥物敏感性檢測。結果共分離76株大腸桿菌,臨床藥敏試驗顯示,67.1%的菌株對5~10種的抗菌藥耐藥,32.9%的菌株對10種以上的抗菌藥物耐藥,無完全耐藥菌株,其中,164團分離株的耐藥情況較嚴重,61.5%的菌株對10種以上的抗菌藥物耐藥,161、165、168與170的情況稍好。塔額墾區規?;B殖場中的羊源大腸桿菌對當前臨床上允許使用的多種類型抗菌藥物呈現一定程度的耐藥,尤其是對臨床中使用較多的青霉素、阿莫西林等耐藥,這種耐藥性的產生將對大腸桿菌病的抗菌藥物治療形成嚴重挑戰,應選擇性地使用抗菌藥物,避免亂用、濫用抗菌藥物,建議以流行菌株的耐藥性為依據開展臨床治療。
關鍵詞:羊規模養殖場;大腸桿菌;臨床藥敏試驗
中圖分類號:S859 ? ? ? ?文獻標識碼:A ? ? ? ?文章編號:1007-273X(2019)12-0005-03
畜牧業一直是新疆塔額墾區經濟發展的支柱產業之一,養羊業在畜牧業生產中始終處于重要不可替代的位置。大腸桿菌是腸道菌群的共生菌,可作為耐藥基因貯藏庫[1]。羊大腸桿菌病由致病性大腸桿菌(Escherichia coli)感染羊腸道或全身組織而引起,臨床主要分為敗血型和腸道型2種[2]。敗血型主要表現全身癥狀,是由大腸桿菌侵入機體血液和組織液引起,體溫升高可達42 ℃,以15日齡到2月齡間的羔羊發病最嚴重;腸道型以腸炎表現為主,主要發生于1周內的羔羊,病羊體溫可升高到40~41 ℃,不及時治療可在24 h內死亡,病死率達80%,給養羊業造成的經濟損失較大[3]??咕幬锸撬~墾區治療該病的常用藥物,主要有慶大霉素、安普霉素、恩諾沙星、氟苯尼考、多西環素、阿莫西林以及磺胺類藥物等[4]。隨著規?;教岣吆涂咕幬飶V范使用,對抗菌藥物已呈現出越來越普遍的耐藥性[5],給臨床治療帶來很大困難,了解塔額墾區各地養殖場羊大腸桿菌的耐藥譜,篩選出高敏抗菌藥物或組合進行治療,能有效提高治療效率,并延緩抗藥性的快速蔓延。研究從多個團場的不同養殖場中隨機采取樣品,分離、鑒別出大腸桿菌,并參考抗菌藥物敏感性試驗執行標準及第23版資料增刊[6],進行分離菌株的臨床藥敏試驗,分析羊大腸桿菌的耐藥現狀,為基層臨床獸醫合理用藥提供參考。
1 ?材料與方法
1.1 ?材料
2018—2019年,在新疆塔額墾區161、164、165、167、168、170團6個團場選取2~3個養殖場(戶),肛子拭隨機采集羊糞樣。
1.2 ?方法
肛拭子接種于大腸桿菌特異性培養基,即伊紅美藍和麥康凱瓊脂,37 ℃培養12~18h,觀察菌落形態。大腸桿菌在麥康凱培養基上的菌落形態特征為桃紅色或微紅色,菌落中心呈深桃紅色,圓形,扁平,邊緣整齊,表面光滑,濕潤;在伊紅美藍培養基上形成紫黑色菌落,并帶有綠色金屬光澤。將純化后的單個菌落接種于全自動微生物鑒定系統(VITEK 2 Compact System)進行生化鑒定,確定其菌種。
1.3 ?臨床藥敏試驗
臨床藥敏試驗使用紙片法,抗菌藥物藥敏紙片選取臨床常用抗菌藥物并參考“抗菌藥物敏感性試驗執行標準”中“美國臨床微生物學實驗室非苛養菌常規藥敏試驗和報告抗菌藥物的建議分組”,共選取20種藥物進行敏感性檢測,分別為青霉素、阿莫西林、頭孢唑啉(先鋒Ⅴ)、頭孢他啶(復達欣)、頭孢拉定(先鋒Ⅵ)、頭孢哌酮(先鋒必)、鏈霉素、慶大霉素、阿米卡星(丁胺卡那霉素)、麥迪霉素、阿奇霉素、強力霉素(多西環素)、氟苯尼考、多粘菌素B、諾氟沙星(氟哌酸)、恩諾沙星、環丙沙星、左氧氟沙星、復方新諾明、克林霉素(氯潔霉素)。量取抑菌圈直徑大小,反映分離病原對藥物的敏感程度。藥敏試驗中使用的培養基、培養時間、試驗操作、質控菌株等均按照抗菌藥物敏感試驗的執行標準進行[7]。
2 ?結果與分析
2.1 ?161團分離菌株臨床藥敏試驗結果
161團15株大腸桿菌的抗菌藥物臨床藥敏試驗顯示,所有的菌株對強力霉素、克林霉素耐藥;90%以上的菌株對青霉素、麥迪霉素耐藥;80%以上的菌株對阿莫西林、頭孢拉定耐藥;60%以上的菌株對鏈霉素、慶大霉素、氟苯尼考耐藥;40%以上的菌株對阿米卡星、阿奇霉素、諾氟沙星耐藥;對頭孢唑啉、頭孢他啶、頭孢哌酮、多粘菌素B、恩諾沙星、環丙沙星、左氧氟沙星、復方新諾明表現敏感,耐藥株不超過40%。試驗結果見表1。
2.2 ?164團分離菌株的臨床藥敏試驗結果
164團13株大腸桿菌的抗菌藥物臨床藥敏試驗顯示,所有的菌株對青霉素、阿莫西林、麥迪霉素、強力霉素、克林霉素耐藥;90%以上的菌株對氟苯尼考耐藥;80%以上的菌株對頭孢拉定耐藥;60%以上的菌株對鏈霉素、慶大霉素、阿米卡星、阿奇霉素、諾氟沙星耐藥;對頭孢唑啉、頭孢他啶、頭孢哌酮、多粘菌素B、恩諾沙星、環丙沙星、左氧氟沙星、復方新諾明表現敏感,耐藥株均不超過40%。試驗結果見表2。
2.3 ?165、167、168團分離菌株臨床藥敏試驗結果
165、167、168團36株大腸桿菌的抗菌藥物臨床藥敏試驗顯示,所有的菌株對克林霉素耐藥;90%以上的菌株對青霉素、麥迪霉素、強力霉素耐藥;80%以上的菌株對阿莫西林、頭孢拉定耐藥;60%以上的菌株對鏈霉素、慶大霉素、氟苯尼考耐藥;40%以上的菌株對阿米卡星、阿奇霉素、諾氟沙星耐藥;對頭孢唑啉、頭孢他啶、頭孢哌酮、多粘菌素B、恩諾沙星、環丙沙星、左氧氟沙星、復方新諾明表現敏感,耐藥株均不超過40%。試驗結果見表3。