云浮地區1 927名婦女HPV感染狀況及基因分型情況分析

江炎章 溫日葵 歐雅文

宮頸癌目前已成為威脅全世界女性健康的第二大惡性腫瘤，宮頸癌的發生發展與人乳頭瘤病毒(HPV)感染密切相關[1]。隨著人們健康意識的提高，HPV的檢測越來越受到臨床醫生的重視和女性的關注。由于人們生活方式的改變，宮頸癌的發病率有逐年升高的趨勢[2]。根據相關調查資料顯示，HPV 感染具有明顯的地域性,不同國家或地區HPV的感染率及型別分布均存在差異[3]。全面掌握地區女性宮頸 HPV 感染的相關危險因素，對于 HPV 感染與宮頸癌病變的早期防治有著十分重要的意義[4]。本研究對云浮地區女性人群中HPV感染狀況及基因分型情況進行調查分析，旨在發現本地區女性HPV感染率和感染的主要HPV基因型的分布及其流行病學特征，可為本地區宮頸癌的防治提供科學的依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析我院在2016年11月—2018年7月進行宮頸癌篩查的女性1 927例，所有就診者均自愿進行HPV-DNA檢測。

1.2 方法

1.2.1 采樣方法 用亞能生物技術(深圳)有限公司生產的宮頸脫落細胞采集器(宮頸刷)進行采樣。取出宮頸刷置于宮頸口，單方向旋轉4～5周以獲得足量的上皮細胞標本，然后將宮頸刷頭部放入細胞保存液管中，沿刷柄折痕處將宮頸刷柄折斷，旋緊管蓋，做好標本標識。

1.2.2 標本保存 標本一經采集，應盡快送檢；標本室溫保存不超過12 h，2～8℃保存不超過7 d，-20℃以下保存不超過3個月。避免反復凍融。

1.2.3 主要儀器 亞能YN-H16分子雜交儀。

1.2.4 試劑 使用亞能生物技術(深圳)有限公司生產的人乳頭瘤病毒基因分型(23型)檢測試劑盒。

1.2.5 檢測方法 PCR和DNA反向點雜交法。

1.2.6 實驗原理 利用HPV的基因特點設計特異引物，可以擴增出23種HPV基因型的目的片段，再將擴增產物與固定在膜條上的包括17種高危型和6種低危型在內的分型探針進行雜交，依據雜交信號的有無來判斷各HPV基因型的存在。

2 結果

1 927例女性的HPV-DNA結果中，檢測HPV陽性的有465例，陽性率為24.13%；在感染 HPV 的 465 例女性中，感染高危型 HPV(包括16型、18型、31型、33型、35型、39型、45型、51型、52型、53型、56型、58型、59型、66型、68型、73型、82型) 者有 407 例，感染率為21.12%，占總感染者數的87.53% ；感染低危型HPV(包括6型、11型、42型、43型、81型、83型)者有 58 例，感染率為3.01%，占總感染者數的12.47% 。見表1。

表1 1 927例標本HPV DNA結果分析 (n,%)

注：1)多重高危型指含有至少一個或多個高危型HPV基因；2)多重低危型指所含基因型全為低危型HPV基因

其中感染單純高危型HPV的主要基因型分別為HPV-58型、18型、56型、68型、66型等，分別占總感染者數的13.76%、11.40%、6.02%、4.73%、4.52%；感染單純低危型HPV的主要基因型分別為HPV 11型、43型，分別占總感染者數的4.52%、3.66%。見表2。

表2 361例感染單純型HPV的基因型結果分析 (n,%)

3 討論

目前大量的研究與實踐結果表明，嚴重危害女性健康的宮頸癌是惟一一種可以經過醫學干預使發病率和死亡率下降的人類惡性腫瘤[5]。感染 HPV基因型在人群中的分布有近130多種亞型，根據在致宮頸癌的危險性不同,分為高危型HPV和低危型HPV兩大類[6]，而且感染不同HPV-DNA亞型其致病性和后果也有不同[7-8]。研究證實，高危型 HPV的持續感染是宮頸癌發生的前提條件[9]。

本研究結果顯示，云浮地區1 927名女性體檢檢測 HPV總陽性率為24.13%，其中高危型HPV感染率為21.12%，占總感染者數的87.53% ；低危型HPV感染率為3.01%，占總感染者數的12.47% 。感染單純高危型HPV的主要基因型分別為HPV58型、18型、56型、68型、66型、59型和31型；感染單純低危型HPV的主要基因型分別為HPV11型、43型；多重高危型感染率為5.29%，占總感染者數的21.94%，以攜帶高危HPV58型為主。HPV的多重高危型感染比單一高危型感染會增加宮頸病變的發展[10]。

由于HPV感染的分布有地域性，現行引入我國的宮頸癌疫苗不一定完全適合我國人群[11]。目前我國引入的宮頸癌疫苗有二價、四價和九價三種，其中二價疫苗包括HPV-16型和18型；四價疫苗包括HPV-6型、11型、16型和18型；九價疫苗包括HPV-6型、11型、16型、18型、31型、33型、45型、52型和58型。由此可見，目前的三類宮頸癌疫苗所包含的HPV-DNA類型與云浮地區女性感染的主要HPV-DNA類型不完全相符，接種這三類宮頸癌疫苗并未能完全很好地預防和保護本地區女性遠離宮頸癌的危害，希望宮頸癌疫苗的研發可以向多組合HPV基因型的方向發展，可以根據不同地區女性感染主要HPV基因型進行選擇性接種組合疫苗，從而能夠更好地預防女性宮頸癌的發生。同時云浮屬于廣東省的粵西山區城市，居民經濟收入不高，目前的宮頸癌疫苗價格相對比較昂貴，很多家庭都消費不起，希望政府能夠在預防宮頸癌這方面投入更多的財政補貼，讓更多的女性能夠接種到宮頸癌疫苗，從而更好地預防宮頸癌的發生，提高女性的生活質量和幸福感。