大圓顎針魚骨骼標本的制作

黃永彬 張財文 焦潤杰 周海燕 王 松

(安徽科技學院生命與健康科學學院 鳳陽 233100)

魚類在動物進化史中占有十分重要的地位，且具有脊椎動物最復雜的骨骼系統，由于魚類的骨骼埋藏在肌肉之中，其形態與性狀受環境影響變化較小。因此，在研究魚類的形態特征、分類及演化等方面具有重要的意義，其骨骼標本也為專業課程教學中提供了真實、直觀的形態學素材[1]。

大圓顎針魚(Tylosurusgiganteus)屬于顎針魚目顎針魚科，系海洋暖水性上層魚類，分布于西太平洋及印度洋，以及我國的南海和臺灣海峽地區，是世界上目前已知唯一的一類頭骨與脊柱具有翠綠色骨骼的魚類[2]。傳統的骨骼標本制作方法，在脫脂和漂白的過程中，其骨骼會褪去翠綠色而變成白色，使標本不能真實地反映該科魚類骨骼的情況。目前對顎針魚科骨骼標本的制作尚未見報道。本實驗通過對大圓頷針魚骨骼標本的制作，使其全部骨骼在不受損傷的情況下清楚地展現出來，特別是其翠綠色的骨骼顏色得以保留。為研究該科魚類的骨骼形態特征，也為動物學及魚類學等教學提供第一手資料。

1 實驗材料

1.1 實驗動物 實驗用大圓顎針魚采自福建廈門沿海，體長95～105cm。

1.2 試劑與用品 解剖盤、解剖刀、解剖剪、解剖針、鑷子、標本缸、細線、熱熔膠、銅線、NaOH、 H2O2、二甲苯、丙烯染料。

2 實驗方法

2.1 魚的挑選 選擇成熟、新鮮完整的大圓顎針魚，冰凍保存。

2.2 剝皮去內臟 將實驗用大圓顎針魚取出，流水浸泡至軟化，解剖，去除內臟，將眼睛挖出，剝去皮膚，用清水洗凈魚體。

2.3 剔除肌肉 ①將胸鰭、腹鰭、背鰭、臀鰭、尾鰭連同肩帶、腰帶和支鰭骨等分別取下，剔除大塊肌肉；②盡量去除軀干部和尾部的肌肉，并從第2～3節椎骨處分離頭部與軀干部，用小鑷子深入枕骨大孔將腦髓清除；③大塊肌肉基本剔除干凈后，再用手術刀和小鑷子仔細地剔除附在骨骼上的小塊肌肉，細小的部位可用牙刷，在水中輕輕地刷去肌肉；④沿脊椎方向將脊柱與肋骨分開，分離每根肋骨，按順序用玻璃板進行固定；⑤剔除頭部肌肉時要格外小心，動作要輕，可配合牙刷輕輕洗刷，因為魚類口的部位和眼眶部位的骨骼細小，以免損傷骨骼，不容易去除的肌肉可以保留，待下一步再進行處理。

2.4 脫脂與腐蝕 ①將質量濃度為5g/L的洗衣粉水溶液加熱至沸騰，浸入魚頭骨和已經剔除大塊肌肉的脊柱骨約1min左右(此過程也有脫脂的作用)，當觀察到肌肉變軟時取出，用鑷子和牙刷繼續去除殘留的肌肉。魚的肋骨和鰭由于骨骼較為柔軟，容易變形，因此不能進行水煮；②將頭部，軀干部的骨骼放入盛有1% NaOH溶液的標本缸中進行腐蝕，處理過程中應經常觀察標本的變化情況，待到殘留肉質變成透明狀即可取出，用清水浸洗，再用毛刷刷去殘存的肌肉；魚鰭可單獨放置于1% NaOH溶液的標本缸中腐蝕，肋骨上的肌肉很容易剔除，因此不需要進行腐蝕；③腐蝕后的骨骼轉入盛有二甲苯溶劑的帶蓋容器中進行脫脂，約4～5d后取出，洗凈。

2.5 漂白 ①將脫脂和腐蝕后的骨骼(頭骨、脊柱和鰭等)分別放置于3% H2O2溶液的帶蓋容器中浸泡漂白，約1～2d后取出，清水沖洗干凈，晾干；②由于肋骨數量較多，細長而柔軟，為了防止變形和順序混亂，要采用玻璃板固定后再進行漂白。取出后洗凈晾干，在植物標本夾中墊上幾層吸水紙，將肋骨按順序放入其中夾緊，以固定肋骨的形狀。

2.6 復色 大圓顎針魚的頭骨與脊柱具有天然的翠綠色，通過以上步驟，顏色基本已經褪去，因此還必須進行復色處理。先用丙烯染料進行調色，調配至與頭骨與脊柱顏色一致的翠綠色，配成1%的溶液。再將頭骨與脊柱骨放入染色約2h后取出，即可恢復其天然的翠綠色。

2.7 整形裝架 處理后的骨骼經過晾干處理后，即可整形裝架。先用銅絲穿過各個脊椎骨的椎管，固定脊柱。再穿入頭骨，整理好每塊骨骼的形態，用熱熔膠將脫離的骨骼互相連接牢固，把整體連接整形裝架。最后將帶骨和鰭骨擺好位置，進行粘貼和固定。等到標本完全干燥后，再用白乳膠將骨骼固定一次，標本的定型就完成了。

2.8 保色保存 大圓顎針魚脊柱及頭骨大部具有翠綠色，經過丙烯染料復色后極易氧化，因此需等標本完全干燥后，立即噴涂多層清漆，以保證骨骼與空氣完全隔絕，達到長久保存和保色的作用。

3 結果與討論

魚類骨骼數量多，容易脫落(特別是肋骨)，因此傳統制作骨骼標本的方法很容易造成骨骼的散架，脫落和變形，不利于后期的拼接和裝架，而且在脫脂和漂白的過程中，其骨骼會褪去翠綠色而變成白色。本實驗通過以下幾種方法來保持大圓顎針魚骨骼標本的完整性和真實性： ①采用降低濃度和延長時間對魚體進行腐蝕，脫脂和漂白，雖然加長了標本制作時間，但完整地保護了標本的形態特征；②大圓顎針魚肋骨數量多，細長且較為柔軟，很容易變形，因此不能進行高溫腐蝕和脫脂，采取2塊玻璃板按順序將肋骨固定后再進行漂白，取出晾干后，立即放入墊有吸水紙的植物標本夾中夾緊，以固定肋骨的形狀和順序；③鰭骨也很容易變形，因此也不能進行高溫腐蝕和脫脂，只能通過冷剔的方法盡可能剔除肌肉；④頭骨和脊柱采用1%丙烯染料染色的方法，來恢復大圓顎針魚骨骼的天然翠綠色，復色后噴上清漆可防止氧化(圖1)。

圖1 大圓顎針魚骨骼標本