Caspase-8、PCNA和nm23與子宮內膜異位癥的相關性研究*

黃 建 郭金強 周偉新 馮春宇 凌學民

廣東省深圳市龍崗區第二人民醫院 1 婦科 2 診斷科 3 病理科 518012

子宮內膜異位癥(Endometriosis,EMs)是指具有生長能力及功能的子宮內膜組織(腺體或間質)出現在子宮腔被覆內膜及宮體肌層以外的其他部位所致的疾病[1]。多發生于育齡女性，臨床表現主要為疼痛、不孕、盆腔粘連等，嚴重影響女性的身心健康。由于目前子宮內膜異位癥的發病機制尚不明確，本文從分子水平研究Caspase-8、PCNA和nm23在子宮內膜異位癥患者及正常子宮內膜組織的表達情況，為子宮內膜異位癥的早期診斷和治療提供理論依據和臨床參考指標，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 以2012年5月—2017年12月于我院婦科就診的患者為觀察對象，分為實驗組和對照組。實驗組為行開腹或者腹腔鏡手術進行治療的子宮內膜異位癥患者40例，對照組為同期因不孕癥(排除器質性疾病及子宮內膜異位癥)行子宮內膜活檢正常子宮內膜患者33例。所有病例都經過了病理學診斷確診，排除子宮內膜異位癥以外的內膜病例。所有入組的患者月經周期具有規律性，并且手術治療前3個月內均未接受過激素治療，均未處于妊娠或哺乳狀態。排除其他需要依賴激素治療的疾病，如功能性子宮出血等。實驗組平均年齡(33.38±6.02)歲，平均體重(52.48±6.28)kg；對照組平均年齡(32.94±5.59)歲，平均體重為(50.70±5.03)kg，所有患者在年齡、體重方面差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。所有入組患者均簽署知情同意書，且方案通過本院倫理委員會批準。

1.2 檢測方法 所有標本均用甲醛溶液固定，常規石蠟包埋，連續切片，分別用常規HE染色，免疫組織化學S-P方法檢測Caspase-8、PCNA和nm23蛋白的表達。陽性結果判定標準：光鏡下每張切片選取5個有代表性高倍鏡視野，計數1 000個細胞，計算陽性細胞百分率。陰性：無陽性染色細胞或者陽性染色細胞數<5%；弱陽性，5%≤陽性染色細胞<25%；陽性：25%≤陽性染色細胞數≤50%；強陽性：陽性染色細胞>50%。

1.3 統計學方法 用SPSS19.0軟件進行統計分析。免疫組化實驗結果應用等級資料的秩和檢驗對相關組間進行顯著性檢驗；采用Spearman相關分析法對Caspase-8、PCNA和nm23與子宮內膜異位癥表達的關系進行相關性分析。P<0.05 為差異具有統計學意義。

2 結果

實驗組的Caspase-8表達以陰性和弱陽性為主，陰性率為60.00%；PCNA的表達以弱陽性及以上為主，總陽性率(弱陽性+陽性+強陽性)為90.00%；nm23的表達則以陰性和陽性為主，陰性率和陽性率均為32.50%，實驗組和對照組的Caspase-8、PCNA和nm23中的表達在各自等級具有明顯差異，且差異具有統計學意義(P<0.05)。經Spearman相關分析，子宮內膜異位癥組患者Caspase-8和PCNA的表達呈負相關(r=-0.730，P=0.000)，Caspase-8和nm23表達呈正相關(r=0.798，P=0.000)。詳見表1。

3 討論

子宮內膜異位癥是困擾女性健康的問題之一，給女性帶來巨大的身心壓力甚至影響生育[3]。據有關文獻報道，子宮內膜異位癥在育齡婦女的發病率達6%～10%。然而子宮內膜異位癥的發病原因與發病機制尚不明確，存在多種假說，如子宮內膜種植學說、遺傳學說、免疫學說機制等。近年來有不少學者從分子水平對子宮內膜異位癥的發病原因及機制進行了研究[4-6]，以尋求病因，希望根源入手為該病的診斷治療提供方法。

本文通過對以行開腹或者腹腔鏡手術治療的子宮內膜異位癥患者和同期因不孕癥(排除器質性疾病及子宮內膜異位癥)行子宮內膜活檢正常子宮內膜患者的Caspase-8、PCNA和nm23蛋白表達水平進行分析后，認為兩組的Caspase-8、PCNA和nm23蛋白表達在各自等級具有明顯差異，且差異具有統計學意義(P<0.05)，并且經Spearman相關分析，子宮內膜異位癥患者Caspase-8和PCNA、nm23的表達水平均具有相關性(P<0.05)，其中Caspase-8與PCNA為負相關關系，與nm23為正相關關系。Caspase家族是一組蛋白酶，能夠介導即將死亡細胞的蛋白水解，對于細胞凋亡過程中的啟動、完成中具有非常重要的作用，Caspase-8是關鍵的啟動子。在本文中Caspase-8在實驗組的陰性率高于對照組，可能是子宮內膜細胞Caspase-8低表達，能夠逃脫免疫監視、清除，抵制細胞凋亡，從而可以異位黏附種植[2]。PCNA參與DNA多聚酶活性作用，和細胞增長具有密切關系，在子宮內膜異位癥中保持著內膜細胞增殖的能力[4]。

表1 Caspase-8、PCNA和nm23蛋白在兩組中的表達

綜上所述，Caspase-8、PCNA和nm23蛋白表達水平在實驗組和對照組的表達具有顯著差異性，可能與子宮內膜異位癥分子學機制有關，為子宮內膜異位癥在分子水平進一步研究提供了理論依據。