犬輸血療法與輸血反應

杜志國 ， 楊宗統 ， 姜世浩 ， 郭 穎 ， 尹燕博

(1.青島農業大學動物醫學院 ， 山東 青島 266109 ； 2.山東省中醫藥研究院 ， 山東 濟南 250014 ； 3.青島博隆實驗動物有限公司 ， 山東 青島 266200 ； 4.北部戰區總醫院輸血科 ， 遼寧 沈陽 100016)

1 輸血療法國內外現狀

輸血療法是利用輸入正常血液或血液成分進行補血、止血、解毒的有效治療措施，在治療一些危重病例時具有重要作用。目前，國外獸醫臨床上更多地利用成分血制劑替代全血制劑，不但節約了血液資源，還降低了輸血風險。同時寵物血站的建設已十分完善，從供血犬的篩選、血液采集、血液制劑的制備、儲存、運輸直至使用都做出了詳細的要求。高等級的寵物血站不但可以提供犬全血、紅細胞懸液、新鮮冰凍血漿等血液制劑，還可以提供相關的專用設備和經輸血傳播病原的檢測服務，保障了血液制劑的質量與生物安全。和國外相比，國內獸醫臨床上應用較多的為抗凝全血，大體上還停留在“現采現用”進行輸血的階段，這種做法不但存在生物安全的風險，亦造成了血液資源的浪費。同時，臨床醫師篩選供血犬時，沒有篩選標準，采血時亦沒有操作規程，血液制劑的管理與應用上仍存在混亂。國內亟需建立能保障血液制劑的質量與生物安全、確保供血犬動物福利、設施設備完善、產品的儲存和運輸有嚴格標準的寵物血站。

2 犬血型與交叉配血

血型是以血液抗原形式表現出來的一種遺傳性狀。狹義地講, 血型專指紅細胞抗原(DEA)的個體差異。廣義地講, 血型指血液各成分的抗原在個體間的差異。血型系統是根據紅細胞膜上抗原種類的不同，對血液進行分型的體系[1]。目前已發現的犬血型系統超過12個, 經國際標準確定的血型為8種。每個血型系統采用“ DEA+數字”方法進行命名，分別為DEA1.1、DEA1.2、DEA3、DEA4、DEA5、DEA6、DEA7和DEA8。DEA1.1和DEA1.2為DEA1血型系統的2個亞型[1-2]。DEA1血型系統的亞型在同一條犬不會同時出現, 其余血型系統可以單獨或者同時存在于同一條犬[3-6 ]。DEA1.1和DEA1.2血型抗原性最強，分布廣泛，是引發急性溶血性輸血反應的主要原因。犬體內不存在DEA1.1、DEA1.2、DEA4和DEA6的天然抗體[7]，緊急情況下第1次輸血不用交叉配血亦可輸注，不會引起急性溶血性輸血反應。但是如果受血犬以前有過輸血經歷，在血型不清的情況下，會有25%的幾率造成急性溶血性輸血反應。犬血型與地區和品種均有聯系，目前暫未發現有關國內犬血型調查的報告。

為減少因血型原因造成的輸血反應，除緊急情況下第1次輸血外，輸血前應做交叉配血試驗。如果受血犬有輸血史，則必須要做配血試驗，否則極可能產生輸血反應。交叉配血試驗可以分為主側、次側配血和對照3部分。主側配血是受血犬的血漿和供血犬的紅細胞反應，次側配血是受血犬的紅細胞與供血犬的血漿反應。任何程度的凝集或溶血反應，都表明血型不相容。

如果主側配血和次側配血都為陽性，或者主側配血為陽性的，則該供血犬的血液不能輸給受血犬；如果主側配血為陰性，次側配血為陽性，則供血犬的血液應慎用；如果主側配血和次側配血都為陰性，則供血犬血液可以輸給受血犬[8]。

3 常用血液制劑

3.1 犬全血 血液采集到采血袋內與抗凝劑混合所形成的混合物，包括犬新鮮全血和儲存全血。犬新鮮全血為采集后儲存在1～6 ℃環境24 h內的血液，包含紅細胞、白細胞、血小板、血漿蛋白和所有的凝血因子；犬儲存全血為采集后儲存在1～6 ℃環境24 h后的血液，保質期35 d(抗凝劑CPDA-1)，包含紅細胞、穩定的凝血因子和全部血漿蛋白(例如白蛋白，球蛋白)[9]。

3.2 犬紅細胞懸液 用多聯采血袋采集血液，經離心移去大部分血漿后，加入紅細胞保存液制備而成，儲存于1～6 ℃，保質期為42 d。

3.3 犬新鮮冰凍血漿 血液采集后6-8 h內在4 ℃環境下離心制備的血漿迅速在-50 ℃以下冰凍成塊的產物，儲存于-20 ℃以下的環境中，冰凍狀態一直持續到應用之前。使用時融化，融化后的成分接近于新鮮液體血漿，保質期1年，其含有全部的凝血因子及血漿蛋白[10]。

3.4 犬冰凍血漿 全血采集后超過8 h或在全血保存期內經離心后分離出的血漿，立即放入-50 ℃環境下冰凍成塊，即為冰凍血漿，儲存于-20 ℃以下的環境中，冰凍狀態一直持續到使用之前，保質期5年。與新鮮冰凍血漿相比，冰凍血漿缺乏不穩定的凝血因子V和Ⅷ。新鮮冰凍血漿保質期1年，期滿后可作為冰凍血漿使用，保質期在原有的基礎上再加4年[10]。

4 血液制劑的用法與適應癥

通常情況下，除非是輸注大量血液或受血犬體溫低，否則輸血前不需要對血液加溫，加溫會加速紅細胞老化，促進微生物生長[11]。血漿制劑在輸注前，需在37 ℃水浴中加熱溶解。輸注開始時應緩慢，建議前15 min輸注的速度為0.5～1 mL/kg·h，檢測體溫、呼吸、心跳。如無異常，可適當加快輸注速度，建議5～10 mL/kg·h，可根據臨床情況調整。此后每隔30-60 min進行1次監測[12]，應在4 h內完成輸注，防止增加細菌污染的風險。

臨床上選擇血液制劑時，要根據機體損失的血液成分的類型與數量來決定。正確使用血液成分進行治療可以達到更好的療效，同時避免了輸入的血液中多余成分帶來的危險[13]。

受血犬需要補充多種血液成分，或者損失血量超過了總血量的50%時，要補充全血。當機體損失血量小于總血量50%時，可以輸注擴容劑和紅細胞懸液[14]。犬紅細胞懸液的紅細胞壓積約為60%～70%(正常全血制劑的紅細胞壓積約為35%～43%)。慢性出血、溶血性貧血或非再生性貧血等情況下，紅細胞懸液的治療效果優于全血。因為在輸注全血時，多余的血漿可能會導致受血犬血容量過多[15]。

臨床上，要根據紅細胞壓積(HCT)值來計算輸血量，計算公式如下：

輸血量=受血犬體重(kg)×90(犬血液含量mL/kg)×(正常紅細胞壓積-受血犬的實際紅細胞壓積)/血液制劑紅細胞壓積

血漿制劑的使用在人類和獸醫臨床上仍存在爭議[16]。目前主要用于補充各種原因引起的凝血因子缺乏，補充白蛋白，預防大量輸注紅細胞懸液引起的稀釋性凝血病，補充胰腺炎引起的α-巨球蛋白的缺乏等。也可用于手術時凝血時間增加而沒有出血傾向的病例，但具體療效仍有爭議。目前普遍認為10～20 mL/kg的劑量即可達到治療效果[17]。有經驗顯示，對犬只實施開胸、剖腹產等大手術時，輸注新鮮冰凍血漿有助于預防犬只出現出血性傾向。輸注血漿有利于犬只的術后恢復，尤其對老年犬。

5 輸血反應

輸血反應是指在輸血過程中或之后受血犬出現了原發疾病不會引起的新的癥狀或體征。合理使用血液制劑，可減少輸血反應的發生幾率[18]。臨床醫師首先確定輸血治療是否必要，應根據檢測結果和動物整體狀況做出準確評估[19]。使用輸血療法時，應慎重選擇血液制劑，有針對性地治療疾病。輸血反應可分為免疫介導和非免疫介導兩類，也可根據發生時間分為急性輸血反應(輸血后48 h以內)和遲發性輸血反應(輸血后48 h以外)[20-21]。免疫介導的輸血反應主要為溶血性輸血反應、急性過敏反應、白細胞、血小板過敏反應等。非免疫介導的輸血反應主要為輸血前溶血、細菌感染、循環超負荷、檸檬酸鹽中毒、稀釋性凝血病、高血氨癥、低體溫、空氣栓塞、肺栓塞、酸中毒等[19]。

5.1 免疫介導的輸血反應

5.1.1 溶血性輸血反應 抗原抗體介導的溶血性輸血反應是由IgG和IgM介導的II型過敏反應，分為急性和遲發性。主要癥狀為心動過速、呼吸困難、血壓降低、身體虛弱、流涎、顫栗、抽搐、嘔吐、發熱。以上癥狀并不是溶血性輸血反應的特有癥狀，在其他原因導致的輸血反應中也會出現[19]。急性反應可導致彌散性血管內凝血(DIC)，休克，急性腎衰和死亡[19,22-24]。急性輸血反應是先前致敏的DEA1型陰性的犬，再次輸入DEA1.1與DEA1.2型陽性的紅細胞引起的。通過放射性同位素標記的方法發現，輸入血型兼容的紅細胞時，其半衰期為21 d；輸入不兼容的DEA1型陽性紅細胞時，半衰期只有30 min[22]。遲發性反應的主要原因是體內存在的血型抗體濃度較低，體外檢查無法發現，進行輸注后引發的溶血性輸血反應，癥狀比較溫和，一般不需要治療[25]。

5.1.2 急性過敏反應 多數急性過敏反應是由IgE介導的I型過敏反應[23]。其嚴重程度取決于肥大細胞脫顆粒程度和血管活性物質的釋放程度[26]。主要癥狀為瘙癢、紅疹、蕁麻疹[27]。

5.1.3 白細胞、血小板過敏反應 非溶血性輸血反應引起的發熱，是最常見的輸血反應。輸注血液制劑后體溫增加至少1 ℃，同時沒有其他引起發熱的原因時，可考慮是受血犬對輸注的白細胞或/和血小板過敏。

5.2 非免疫介導的輸血反應

5.2.1 輸血前溶血 紅細胞在輸血前溶血的現象可利用實驗室手段和目視觀察的方法進行檢查。血液制劑過期，不適當的儲存、運輸及輸注方式，細菌污染，均可以導致紅細胞發生輸血前溶血。除細菌污染和過期導致的輸血前溶血外，其他原因導致的溶血除了降低血液制劑的療效外，一般不會造成更嚴重的后果[20]。

5.2.2 細菌感染 革蘭陰性菌如銅綠假單胞菌、枸櫞酸桿菌、耶爾森鼠疫桿菌及各種大腸菌群都可以在低溫條件下生長，并利用枸櫞酸鹽作為碳源[20,28]。臨床癥狀包括發熱、嚴重低血壓、溶血、嘔吐、腹瀉和DIC。此外還有可能導致菌血癥、局部膿腫、敗血癥等。

5.2.3 循環超負荷 循環超負荷是大量或快速輸入血液制劑導致的，可引起充血性心力衰竭和肺水腫，是小動物常見的輸血反應之一。有潛在心臟病的受血犬，即使是標準的輸注量與輸注速度，也可能會導致循環超負荷。臨床上以咳嗽、呼吸困難和心動過速為主要癥狀[19]。

5.2.4 檸檬酸鹽中毒 血液制劑中的檸檬酸鹽等抗凝劑，能夠螯合鈣，導致體內循環的鈣離子減少。肝功能正常時，機體能高效快速代謝檸檬酸鹽，因此低血鈣癥是一種罕見的并發癥。但有兩種很大幾率造成低血鈣情況，一種情況為肝臟受到損傷時，檸檬酸鹽不能快速代謝；另一種情況為大量快速輸注血液制劑導致肝臟不能完全代謝檸檬酸鹽。臨床癥狀以震顫為主，嚴重的情況下會出現四肢搐搦[19]。

上述是常見的犬輸血反應，其他如稀釋性凝血病、高血氨癥、低體溫、空氣栓塞、肺栓塞、酸中毒等，不再詳述。

6 小結

隨著寵物行業的快速發展，輸血療法在獸醫臨床上得到越來越多的應用。但是，輸注血液制劑的過程是有風險的。建立嚴格供血犬質量標準，嚴格按照操作規范制備、儲存和運輸血液制劑，合理評估輸注血液制劑的必要性，嚴格執行輸血前交叉配血，可有效降低因輸血傳播疾病和引起不良反應的風險。隨著我國寵物醫師隊伍職業素養的不斷提升，從供血犬的篩選、血液采集、血液制劑制備、血站建設，一直到血液輸注各個環節的規范化、標準化，越來越受到行業的關注。我們要學習國外寵物血站建設的相關標準和運行經驗，參考國內人類血站的標準和規范，制定我國寵物輸血的行業標準和規范，并使之成為國家標準，滿足寵物事業日益發展的需要。