豬衣原體病的診斷與防控措施

于新友，李天芝

(山東綠都生物科技有限公司，山東 濱州 256600)

衣原體是衣原體目衣原體科，可分為2個屬10多個種。各種衣原體的致病性不同，能感染豬、牛、羊、兔、鳥類等多種動物，表現不同癥狀或呈亞臨床經過，某些種也能感染人類，是一種人獸共患性病原體。衣原體可在機體內長期潛伏，其失能性和致死性較強，己被聯合國列為潛在的生物戰劑[1]，因此，做好衣原體病的防控工作，具有重要的公共衛生學意義。豬衣原體病是由衣原體引起的一類多種癥狀接觸性傳染病，一般呈慢性經過，某些條件下也會急性暴發，表現為急性經過。該病的一般為散發、呈地方流行性[2]。能引起豬發病的衣原體主要有鸚鵡熱嗜衣原體[3]、家畜嗜衣原體[4]、流產嗜衣原體[5]、豬衣原體[6]和沙眼衣原體[7]。各日齡、品種的豬均能感染[8]。豬群一旦感染，很難清除，康復豬群長期帶毒、排毒。豬衣原體感染可因菌株毒力、豬日齡、體況和外界環境的變化而呈現不同的癥候群，如肺炎、腸炎、結膜炎、關節炎、睪丸炎、子宮炎等，主要導致仔豬的高死亡率和母豬的繁殖障礙疾病，因發病率不高，易被忽視，往往給養豬業造成了巨大的經濟損失。1955年，美國專家Willigam等首次從病豬體內分離到豬衣原體，隨后羅馬尼亞、英國、日本和德國等均有相關報道，目前，該病在全世界范圍廣泛流行。我國楊宜生等于1982年首次報道國內豬群中存在此病，隨后從甘肅、湖北、內蒙、青海、廣西、河南、四川等地都分離出豬衣原體。近年來，豬病流行病學調查結果顯示，豬衣原體病在我國27個省(市)豬場均存在[9]，呈流行態勢。文章主要從豬衣原體病的病原學、流行病學、臨床癥狀、病理變化、診斷及防控等幾個方面進行闡述，以期為該病的診斷及防控提供參考。

1 病原學

衣原體為革蘭氏陰性病原體，能通過細菌濾器，不能合成生物能量物質ATP，嚴格細胞內寄生，具有DNA、RNA兩種核酸，能以二分裂方式進行增殖，是一類大小介于立克次體與病毒之間的微生物。衣原體抵抗力弱，日光照射下最多存活6 d，在外界干燥的條件下可存活5周，在水中可存活 17 d。56℃ 5 min、37℃ 48 h、100℃15 min、紫外線照射30 min可殺滅衣原體。常規消毒劑如2%來蘇爾、2%氫氧化鈉溶液、1%鹽酸溶液、75%酒精溶液可在數分鐘內殺滅衣原體。衣原體對煤酚類化合物和石碳酸具有一定的抵抗力。將衣原體感染的雞胚卵黃囊保存-70℃，衣原體至少可存活10年以上。衣原體為專性細胞內寄生，不能用人工培養基培養，能在6～8日齡雞胚或鴨胚卵黃囊中生長繁殖，也可用細胞培養，常用的細胞有人宮頸癌細胞(HeLa299)、乳倉鼠腎細胞(BHK-21)、非洲綠猴腎細胞(Vero)及小鼠成纖維細胞(McCoy)。衣原體繁殖過程中會產生兩種大小不同的顆粒，較小的為原生小體，直徑0.2～0.4 μm，球狀、橢圓形或梨形，有胞壁，內有核質和核蛋白體，姬姆薩染色呈紫色，是成熟的衣原體，為細胞外形式，無繁殖能力，但具有高度的感染性，當進入易感細胞后，發育成較大的始體。始體，直徑0.7～1.5 μm，圓形，可繁殖，無細胞壁，為細胞內形式，姬姆薩染色呈藍色，無感染性。衣原體可分為強毒力和弱毒力菌株兩大類，不同菌株致病性不同[10]。衣原體對四環素、強力霉素、土霉素、金霉素、紅霉素及螺旋霉素敏感，對慶大霉素、卡那霉素、新霉素、鏈霉素和磺胺類藥不敏感。

2 流行病學

能感染豬的衣原體也能感染其他多種哺乳動物和鳥類，多為人獸共患性病原體。豬衣原病發病率為5%～95%，一年四季均可發病，秋冬季節多發，各品種和日齡的豬均易感，懷孕母豬和仔豬受到的危害最為嚴重，初產母豬的流產率為40%～90%，斷奶仔豬的病死率為20%～60%。病豬和帶菌豬是主要傳染源，其他被感染的動物如豬場內的飛鳥、鼠類也能成為傳染源。可水平傳播也能垂直傳播，衣原體通過眼鼻分泌物、糞尿、乳汁、流產的胎兒、胎衣和羊水等排出體外[11]，污染飼料、飲水及周圍環境，經消化道、呼吸道傳染其他豬只，也可經過交配感染健康豬。豬場內的蚊、蠅等也能間接傳播該病。初次感染該病的豬場癥狀表現更明顯，損失更嚴重，感染后母豬、公豬可長期帶毒，排毒可長達1年，很難凈化，因此，持續的潛伏性傳染是本病的主要流行特征。當豬群飼養密度大、通風不良、營養不良或受到應激因素影響時均能誘發該病[12]。

3 臨床癥狀

該病的潛伏期為3～11 d。不同豬群感染后表現的臨床表現不同，仔豬感染衣原體后臨床表現多樣，可表現為生長發育不良，精神沉郁，食欲不振，體溫升高、顫抖，咳嗽、呼吸困難，鼻孔流出漿液性分泌物。眼結膜潮紅，角膜混濁，羞明，流淚，眼角有大量分泌物出現，腹瀉，脫水。也可出現一些神經癥狀如興奮，尖叫，盲目地沖撞或轉圈運動，倒地，四肢呈劃水狀。還可出現關節炎的一些癥狀如關節腫脹、跛行等。

母豬感染衣原體后多呈隱性經過，自身不表現出明顯的臨床表現，只是在懷孕后期突發生流產、早產、產死胎或弱仔，流產胎兒水腫和出血，胎衣暗紅色，有水泡，有臭味，弱仔一般個頭較小，體弱，頭部、腹下及四肢皮膚呈彌漫性出血，拱奶無力，多在出生后2 d死亡。初產母豬發病率高，可達90%。一般愈后良好，一般不會發生不育和再次流產，但如果發生分娩后胎衣滯留，有可能導致細菌繼發感染，形成子宮內膜炎；治療不及時，母豬可能會死亡。少數流產母豬也可出現關節炎、眼結膜炎。

公豬感染衣原體后精神沉郁、食欲不振、體溫升高，臨床表現為尿道炎、睪丸炎、附睪炎[13]、腹股溝淋巴結腫大、精液量少、精液帶有血絲、品質下降，以致受配母豬的受胎率下降，即使受孕，流產死胎率明顯升高。有時也可表現為肺炎、關節炎。有的公豬只是隱性帶毒，并不表現出明顯的臨床癥狀。

4 病理變化

仔豬的病理變化主要為肺臟腫大，質地變硬，有出血點或出血斑，肺泡膨脹不全，并含有大量的滲出液，氣管、支氣管有大量黏液性分泌物。關節周圍組織水腫、出血，關節腔內大量纖維素性滲出液，含有黃色絮狀物。腸系膜淋巴結充血、水腫，腸道黏膜出血，內容物稀薄如水，有的紅染。肝脾腫大，出血。腎臟腫大有出血點，呈土黃色。腦膜充血、水腫，腦脊液增多，渾濁。肝臟腫大，有時與腸道粘連，發生纖維素性腹膜炎。母豬子宮內膜水腫、出血，有不規則的壞死灶，流產胎兒水腫，頭頂和四肢呈彌漫性出血，心臟和肺臟常有漿膜下點狀出血，肝臟充血。公豬腹股溝淋巴結腫大，睪丸腫脹、變硬，輸精管出血、陰莖水腫、出血或壞死，尿道上皮脫落、壞死。

5 診斷

根據流行情況、臨床癥狀及病理變化可做出初步診斷，該病應與一些引起繁殖障礙的疫病如豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、流行性乙型腦炎、豬細小病毒感染、豬偽狂犬病、豬流感、布魯氏菌病、鉤端螺旋體病、弓形蟲病、附紅細胞體病以及其他病原和霉菌毒素所致的流產和繁殖障礙進行區別，還應注意與因飼養管理不良和營養缺乏引起的非傳染性繁殖障礙進行鑒別。發生呼吸障礙時，應與豬流感、豬巴氏桿菌病、傳染性胸膜肺炎等疾病進行區別。發生關節炎時，應與豬丹毒絲菌、豬鏈球菌、副豬嗜血桿菌等感染進行區別。發生腹瀉時，應與大腸桿菌病、傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉等疾病進行區別。

要確診的話需要進行實驗室檢查，常用的試驗室檢查方法鏡檢、有病原分離鑒定、間接血凝試驗(IHA)、酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、分子生物學檢測方法等。需首先采集病死豬的肝臟、脊髓液或流產胎兒的內臟組織，做觸片或涂片，干燥、甲醇固定10 min，再用姬姆薩染色液染色30～60 min，蒸餾水沖洗，晾干，鏡檢。油鏡下可見被染成紫色或藍色的小體，紫色的是原體，藍色的是始體。可用小鼠、雞胚或細胞等進行衣原體的分離，選取的病料樣品可以是肺臟、脾臟、關節液、腦脊液、胎盤等。對嚴重污染的病料一般用小鼠分離，病料處理后腹腔接種3～4周齡小鼠，0.5 mL/只，接種后4～10 d撲殺，剖檢小鼠可見脾臟腫大，腹腔內有纖維素性滲出物，取肝、脾等做成觸片，鏡檢可見大量純凈的衣原體。雞胚分離衣原體時可選用6～7日齡雞胚，卵黃囊接種鏈霉素處理的病料樣品，0.3 mL/胚，初次分離時可能不致死雞胚，需盲傳2～3代，一般雞胚于接種后3～10 d死亡，無菌取雞胚卵黃囊膜涂片，若鏡檢發現有大量衣原體原生小體則可確定。衣原體雖然可用細胞分離，但分離率一般不如雞胚分離效果好，因衣原體對細胞的吸附力較弱，可在培養基中添加一定比二乙氨基乙基葡聚糖以增加衣原體對細胞的吸附力[14]，提高分離效率。IHA是豬血清中衣原體抗體檢測最常用的方法，該法采用純的衣原體致敏綿羊紅細胞，敏感性高、特異性強，操作簡便，不需要專門的儀器設備，適合基層應用，目前已有商品化的試劑盒。但這種方法也存在一定的問題，重復性差，可能會出現假陽性結果。目前也有商品化的ELISA檢測試劑盒用于衣原體血清抗體檢測，如以色列Biogal公司的ImmunoComb診斷試盒，但價格較貴。分子生物學檢測方法是檢測衣原體病原的方法，常用有PCR、熒光定量PCR方法等，但因衣原體種類繁多，檢測時可能因引物序列與病原不匹配造成漏檢，檢測時采用新鮮的病料樣品如肺、肝、脾臟、關節液、腦脊液、精液、喉拭子、陰道拭子。最好采用多種方法檢測，進行綜合判斷，以提高檢測的準確行，有針對性的采取相應的措施，避免豬場造成大的損失。

6 防控措施

1)加強飼養管理，飼喂全價優質配合飼料，提高豬群免疫力；豬舍保持適宜的溫度、濕度，豬群飼養密度合理，加強通風，減少豬群應激。豬舍保持清潔衛生，糞便與污物要經過消毒后堆積發酵處理，并每周兩次對通道消毒、產房消毒、圈舍消毒、場區環境消毒進行防控。

2)堅持自繁自養，全進全出的飼養模式，盡量減少引種，禁止從衣原體疫區引種，引種時要隔離飼養半個月，并進行檢疫，確定無衣原體感染或隱性感染后，方可并入大群飼養。豬場內要殺滅蚊、蠅、鼠等，防止飛鳥等動物(如貓、野鼠、狗、野鳥、家禽、牛、羊等)進出養殖場。控制人員進出，非本場飼養人員禁止進人豬場，人員進入豬場要進行嚴格消毒，并更換鞋、工作服。對種豬要定期檢疫，確診健康無疫后方可配種。對發病豬隔離飼養，豬舍周圍、過道用3%氫氧化鈉消毒。每天1次，連續消毒7 d。淘汰發病及感染豬，尤其是隱性感染種公豬。最大限度地減少應激因素。加強產房衛生工作，以防新生仔豬感染該病。對病死豬及流產的胎兒、胎衣以及排泄物和污染物，應采取焚毀、深埋等無害化處理，同時用2%來蘇爾或2%氫氧化鈉等有效消毒劑進行嚴格消毒，加強產房衛生工作，以防新生仔豬感染本病。

3)豬場一旦發生豬衣原體病，豬場飼養管理人員要注意自身的防護，如穿工作服、戴口罩和手套，并注意消毒，服用四環素、強力霉素或環丙沙星等抗菌藥物，可有效地防治本病的傳染。

4)目前有羊用衣原體疫苗，但沒有豬用衣原體疫苗，只能采用抗生素進行防治，豬群發病在早期可用四環素、強力霉素、土霉素、青霉素、紅霉素、麥迪霉素、金霉素、泰樂菌素、螺旋霉素等多種抗生素治療，為防止抗藥性的出現可采用多種藥物輪換、穿梭使用。因衣原體的細胞內生長及隱性、持續性感染特點，抗生素治療效果不理想，最好對該病要早發現、早治療。對發病的新生仔豬，可每千克體重肌肉注射1%土霉素1 mL，每天1次，連續治療7 d，病重仔豬另加5%葡萄糖溶液20 mL耳靜脈推注加以補液。發病種豬肌內注射10%強力霉素，用量為每千克體重20 mg，每天2次，連用3 d。當母豬發生流產時用土霉素1 000 g/t拌料，連喂10 d，有很好的效果，治療后恢復發情。在豬衣原體流行期間，全群飼料中添加四環素300 mg/kg，可預防該病。此外，公母豬配種前1～2周及母豬產前2～3周按0.02%～0.04%的比例將四環素類抗生素混于飼料中，連用1～2周，可提高受胎率，以預防新生仔豬通過垂直感染該病，增加活仔數及降低新生仔豬的病死率。

7 小結

豬衣原體病是豬的一種重要的接觸性傳染病，在世界范圍廣泛流行，給養豬業造成了巨大的經濟損失，但因其常呈慢性經過，隱性感染較多，且臨床表現多樣，沒有典型的病變特征，常被忽視。某些能感染豬的衣原體如鸚鵡熱嗜衣原體、流產嗜衣原體和沙眼衣原體也能感染人，因此，豬場工作人員一定加強學習，提高對該病的認識，重視該病，一旦豬場有疑似病例出現，一定要做好自身的防控，避免受到感染。并采用實驗室方法診斷該病，及早確診，盡快采取相應的措施，使損失降到最低。目前只有羊衣原體病基因工程亞單位疫苗，尚沒有正式批準文號的豬衣原體滅活疫苗，雖然一些科研單位試制，但一直未申請正式批號。豬衣原體種類繁多，科研人員應對該病做好流行病學調查，有針對性的分離豬衣原體，并研制疫苗，從而更好地做好該病的防控工作。