痰標(biāo)本真菌涂片對侵襲性肺部真菌感染的診斷價值

劉 雯

（本溪市第一人民醫(yī)院檢驗科，遼寧 本溪 117002）

真菌感染在近些年的發(fā)病趨勢呈升高之勢，其中以白色念珠菌、克柔念珠菌、光滑念珠菌、曲霉菌最為常見[1]。侵襲性肺部真菌感染是一種因真菌感染肺部而出現(xiàn)的疾病，不包括真菌過敏或真菌寄生引起的肺部過敏反應(yīng)或炎癥，嚴(yán)重情況下可造成肺組織壞死或經(jīng)血行播散發(fā)生轉(zhuǎn)移[2]。侵襲性肺部真菌感染由于缺乏典型的臨床表現(xiàn)與影像學(xué)特征，常常不能早期明確病原學(xué)診斷，從而延誤了治療，影響疾病的轉(zhuǎn)歸與預(yù)后。本研究旨在探討痰標(biāo)本真菌涂片對侵襲性肺部真菌感染的診斷價值，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇2016年1月至2017年8月84例侵襲性肺部真菌感染患者，均符合《侵襲性肺部真菌感染的診斷標(biāo)準(zhǔn)與治療原則(草案)》，其中男47例，女37例，年齡27～66歲，平均年齡（40.52±9.88）歲。

1.2 方法：所有受檢者均采集晨起空腹留取咳出的第一次痰，具體方法：首先將注射用糜蛋白酶（上海第一生化藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H31022113）4000U溶于0.9%生理鹽水10 mL中進行霧化吸入，用一次性吸痰管（杭州美泰醫(yī)療器械有限公司）吸痰，對痰少的患兒輕叩胸骨柄上方，以促進痰液排除。用標(biāo)本瓶收集痰液，避免痰液內(nèi)有唾液、鼻涕、胃內(nèi)容物。半小時內(nèi)送檢，以避免原始菌死亡或變質(zhì)。經(jīng)判斷所有痰標(biāo)準(zhǔn)均達到合格標(biāo)準(zhǔn)。按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》，30°下將痰標(biāo)本在培養(yǎng)基（濟南百博生物技術(shù)公司）中培養(yǎng)24 h，在電子顯微鏡下挑出真菌孢子，然后鑒定菌種，以ATCC14053白色假絲酵母菌（中國食品藥品檢定研究院）為質(zhì)控菌株。每天觀察培養(yǎng)結(jié)果，真菌培養(yǎng)2次以上均為陽性判斷為真菌培養(yǎng)陽性，如果至5 d后仍無真菌生長則為陰性。

2 結(jié)果

84例痰真菌培養(yǎng)陽性69例（82.1%），共分離出真菌77株，其中白色念珠菌38株（49.4%），光滑念珠菌19株（24.7%），光滑念珠菌11株（14.3%），克柔念珠菌7株（9.1%），熱帶念珠菌2株（2.6%）。

3 討 論

肺組織具有高容量、低壓力、低阻力的特點，十分容易發(fā)生真菌感染。侵襲性真菌感染常是一些腫瘤、濫用廣譜抗生素以及長期大劑量使用激素、免疫抑制劑等患者的并發(fā)癥。據(jù)文獻報道，急性白血病患者繼發(fā)急性白血病的比例達到10%～25%，病死率高達60%[3]。研究表明，高齡、≥3種廣譜抗生素使用超過2周、侵入性操作、多臟器功能障礙、低白蛋白血癥是侵襲性真菌感染的獨立危險因素[4]。

侵襲性真菌感染患者的臨床表現(xiàn)缺乏特異性，診斷困難，一般只能“疑診”或“擬診”，常常對于發(fā)熱、中性粒細胞減少，而在使用廣譜抗生素治療后無效的患者，采取的是經(jīng)驗性用藥，病死率高，感染念珠菌的病死率達到30%～40%，而感染曲霉菌的病死率更高大50%～100%[5]。痰標(biāo)本真菌涂片是診斷侵襲性真菌感染的不可或缺的手段，《侵襲性肺部真菌感染的診斷標(biāo)準(zhǔn)與治療原則(草案)》將痰標(biāo)本真菌涂片作為診斷侵襲性真菌感染的微生物學(xué)證據(jù)之一。本研究結(jié)果顯示，84例痰真菌培養(yǎng)陽性率為82.1%，共分離出真菌77株，其中以白色念珠菌最多。念珠菌是人類口腔中的正常定植菌，研究表明，在正常人的痰標(biāo)本中有20%～55%可分離出少量念珠菌，主要通過吸入與血源性播散進行感染。其次，在侵襲性真菌感染患者痰標(biāo)本中還可分離出光滑念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、熱帶念珠菌，分別為24.7%、14.3%、9.1%。可見，痰標(biāo)本真菌涂片可為侵襲性肺部真菌感染提供重要的診斷依據(jù)，臨床意義價值高。不過，留取痰標(biāo)本的時間對培養(yǎng)結(jié)果有一定的影響。一般情況下，晨起留取痰標(biāo)本具有一定的優(yōu)勢，一方面是晨起空腹唾液少，以及無嘔吐，因而能夠減少影響因素的干擾；另一方面，夜間迷走神經(jīng)興奮，產(chǎn)生的痰液量較多，清晨交感神經(jīng)興奮，所以更便于痰液的排出，痰液比較黏稠，其中含有的細菌數(shù)較多，所以有利于提高真菌培養(yǎng)的陽性率[5]。而其他時間留取痰標(biāo)本容易受到唾液、嘔吐物等的污染，從而陽性真菌培養(yǎng)結(jié)果。選擇適合的標(biāo)本采集時間有助于提高真菌培養(yǎng)陽性率。

侵襲性肺部真菌感染的痰培養(yǎng)、血培養(yǎng)、胸腔積液培養(yǎng)等的陽性率整體較低，以及真菌G試驗和GM試驗的特異性也不高，應(yīng)結(jié)合患者的癥狀、體征、自身危險因素等進行綜合的判斷，以達到早期診斷。