屏障系統中SPF實驗動物的飼養與管理

朱玉 秦嫘 何寶國

（齊齊哈爾醫學院 161042）

除清潔級動物應排除的病原外，不攜帶主要潛在感染或條件致病和對科學實驗干擾大的病原，這類動物被稱為無特殊病原體 (Specific Pathogen Free，SPF) 動物。在動物實驗過程中，不同種屬、同一種屬中不同品系的動物對藥理反應也不同，如果應用了不健康的實驗動物，還可能無法獲得實驗數據，致使實驗失敗。由于SPF 實驗動物遺傳背景明確，健康狀況優良，實驗反應敏感，實驗數據準確，常常被用來做藥物和毒性反應實驗，但SPF 動物對飼養環境要求較高，對管理水平要求嚴格，所以必須飼養在屏障系統中，實行嚴格的微生物控制才能符合實驗動物標準。

1 人員要求

管理人員應為醫學、動物學等相關專業人員，并經嚴格的專業培訓，儀器、設備操作熟練，能認真執行無菌操作，嚴格控制污染，熟悉相關各物品等無菌操作方法和程序，并嚴格按照方法執行。管理人員要有強烈的責任心強，要經常檢查各種儀器設施的運轉情況，按照各儀器、設備使用、維護方法進行操作，做到正確操作、常檢查、勤清潔。

2 SPF實驗動物飼養的要求

飼養SPF 級實驗動物單位必須擁有實驗動物使用許可證；實驗動物所需的飼料來源合理，采用正確方法處理后再進行飼喂，必須從具有實驗動物飼料生產許可證的單位購買，所用飼料經過高壓或輻照滅菌后再喂給實驗動物；沒有特殊要求時，實驗動物采用自由飲水，且需要飲用經過凈化和消毒處理后的水；使用優質實驗動物墊料，做到勤更換；勤觀察，即觀察動物精神狀態、是否打架、吃食和飲水情況等，把不健康的動物及時取出并處理，要時刻觀察飼養的環境指標：包括溫度（18～29℃）日溫差 （3℃以內）、相對濕度 （適宜 40%～70%）、換氣次數 （l0 次/h）、氣流速度 （0.18m/s 以內）、壓差（25Pa）、潔凈度 （一萬級）、氨濃度 （l5mg/m3）、噪音 （≤60dB）、光照度 （150～300Lux）。

3 SPF實驗動物管理的要求

進出屏障系統室內要嚴格按照正確流向走動：人員進出屏障系統流向：一更衣室→二更衣室→風淋→潔凈走廊→飼養區→實驗區→次潔凈走廊→緩沖間→出屏障系統；物品進出屏障系統流向：雙扉高壓消毒器 (傳遞窗、渡槽) →潔凈儲物間→潔凈走廊→緩沖間→出屏障系統→洗消間；動物進出屏障系統流向：外運→檢疫室→繁殖區→潔凈走廊→實驗區→次潔凈走廊→緩沖間→出屏障系統。

SPF 動物飼養區及配套設施啟用前，需經過多次清潔、除塵、清洗、抹拭。然后用甲醛+高錳酸鉀煙熏 24～48h 后，開啟送風排風系統24～48h，將殘留的刺激氣味排凈，工作人員換上高壓消毒的凈化防塵服到飼養區內，將煙熏用的用具清理好，用草酸液將濺出的高錳酸鉀污跡抹去，搞好衛生。并通過省級動物監測部門的技術監測，獲得設施合格證后方可使用。嚴格控制動物質量，一定要在國家動物種子庫引種，以保證動物的質量符合標準化要求。

4 SPF實驗動物日常飼養管理方法

飼料應無菌、高營養，每次投放3～4d 的飼料量；按雄：雌比例為1：4～5，隨機同籠；每只動物均有記錄掛卡，詳細記錄動物的種屬、品系、代號 (名字)、出生日期、留種日期、交配日期和與配動物代號、生產日期、生產仔數、存活狀況、斷奶日期，正在進行實驗動物應有實驗記錄卡，記錄動物的種屬、品系、性別、實驗性質、組別和編號、實驗目的和進行結果，并將記錄卡完整保存。飼養管理人員如發現有死亡的動物時，應立即取出動物尸體并及時處理后記錄，同時將死亡動物所用物品消毒處理。