胃癌組織中microRNA-214和MGAT5表達及預后的相關性分析*

全細云 ， 李 明 ， 陳棟良，鄧 燚，彭 曼

1. 湖南省株洲市中心醫院病理科(株洲412000)；2.湖南省株洲市中心醫院急診科(株洲 412000)

胃癌是一種嚴重危害人們生命健康的惡行腫瘤。隨著社會和經濟的發展，工業的不斷進步，周圍環境污染越來越嚴重，胃癌的患病人數越來越多，嚴重影響了人們的生活質量[1]。據相關資料顯示，胃癌的發病率在消化系統癌癥中的發病率越來越高?？旃澴嗟纳钍沟萌藗兊娘嬍硺O其不規律，進而導致胃癌的發病率越來越高，嚴重影響了人們的生活質量。對于該種疾病不易進行診斷，導致治療不及時，延誤治療的最佳時期，不利于患者的病情恢復。在臨床的診斷過程中，由于癌癥病癥的特殊性，容易在身體各處進行轉移，這樣會加大診斷結果的難度，使得醫生對患者的病情不能準確了解?；颊叩貌坏接行У闹委煟瑢е禄颊叩牟∏檠诱`[2-3]。microRNA可以調節基因的表達活性，被應用于腫瘤發病機制中。因此，microRNA-214和MGAT5可以調控多個靶細胞來控制疾病的發展與發生。對于microRNA-214和MGAT5的研究尚不透徹，仍有一些問題沒有解決，作用的機制尚未明朗。因此該文章就隨機選取在我院治療的80例胃癌患者探究胃癌組織中microRNA-214和MGAT5的表達及預后的相關性分析。

資料與方法

1 一般資料 隨機選取2015年6月至2017年6月在我院治療的80例胃癌的患者作為研究對象，收集其進行手術切除的胃組織標本作為研究對象，患者的胃癌組織作為研究組，患者的癌旁正常胃黏膜組織作為對照組?；颊叩钠骄挲g(39.1±6.3)歲；男41例，女39例，<60歲的患者為45例,>60歲的患者為35例；腫塊大小>5 cm的患者為55例,腫塊大小<5 cm的患者為25例；按WHO國際組織分類標準:管狀腺癌(高、中分化型)35例，低分化及未分化型腺癌45例；按國際抗癌聯盟(UICC)臨床TNM分期:Ⅰ、Ⅱ期30例，Ⅲ、Ⅳ期50例；出現淋巴結轉移的患者為45例，未出現淋巴結轉移的患者為35例；患者術前均未接受過放化療及其它針對腫瘤的治療。

納入標準：所有的患者在進行手術后病情較為穩定，還有意識，能夠配合醫生的治療。沒有其他的疾病。排除標準：患有其他的疾病，例如腎功能不全、下肢深靜脈血栓、關節脫位、心肺的功能不全以骨折以及有精神方面的問題等等。沒有其他的疾病。

2 檢驗方法 首先，對胃癌患者的胃癌組織以及胃黏膜組織進行切除保存。使用10%的福爾馬林液進行固定，使用石蠟進行包裹，制成切片，進而進行后續的病理分析實驗。進行病理分析的樣本均要經過2名或者以上的高級稱職的病理分析師進行相應的病理分析，選取的胃癌患者均未進行放化療的治療[4-5]。 免疫組織化學染色及分析的方法：免疫組織化學生物素，親和素一酶結合物(ABC)法按照說明書上的指示嚴格執行，將石蠟切片去除蠟之后，進行水化，然后置于3%的過氧化鈉溶液中靜置10 min 左右，在室溫下靜置，去除組織中內源性過氧化物酶，將其放入0．01 mol/L檸檬酸鹽緩沖液中進行浸泡，并采用微波法對組織進行抗原修復10 min左右；接著在室溫下采用5%山羊血清進行封閉處理30 min；加一抗濕盒在4℃下進行孵育過夜；加即用型二抗，在室溫條件下進行孵育30 min左右；接著使用二氨基聯苯胺(DAB)進行顯色3 min左右，使用蘇木素進行復染操作，進行封片。對于最后的染色結果由2位高級職稱的病理分析師進行讀片，得出結果[6-8]。若讀片過程中，出現兩者不一致的結果時，需要雙方進行協商得到最后的結果。免疫組織化學染色結果的判斷：在400倍的光鏡下對4個不同的視野進行計數，若細胞質中出現棕黃色顆粒，則結果計數為陽性，最終染色的結果要與陽性的細胞數以及染色的強度相結合，進行半定量的分析[9]。

染色強度：陰性(0分)，染色弱但結果高于陰性對照(1分)，染色結果清晰，容易辨認(2分)，染色強(3分)。陽性細胞數：≤25%(1分)，26%～≤50%(2分)，51%～≤75%(3分)，>76%(4分)。MGAT5低表達組為0～8分，MGAT5高表達組為9～12分[10]。

結 果

1 研究組和對照組microRNA-214和MGAT5水平的對比 患者胃癌組織中的microRNA-214和MGAT5表達率要比患者胃黏膜組織中的microRNA-214和MGAT5表達率要明顯高(P<0.05)，見表1。

表1 研究組和對照組microRNA-214 和MGAT5水平的對比

2 是否出現淋巴結轉移的胃癌患者的的對比 在胃癌中出現淋巴結轉移的患者的microRNA-214和MGAT5表達率要比未出現淋巴結轉移患者的量要明顯的高(P<0.05)， 見表2。

3 胃癌不同的時期患者microRNA-214和MGAT5水平的對比 在胃癌患者中Ⅰ期、Ⅱ期的血清中的microRNA-214和MGAT5表達率要比Ⅲ期的表達率要明顯的高(P<0.05)；在胃癌患者中Ⅰ期、Ⅱ期的microRNA-214和MGAT5表達率要比Ⅳ期的水平要明顯的高(P<0.05)，在胃癌患者中Ⅲ期的microRNA-214和MGAT5表達率要比Ⅳ期的表達率要明顯的高(P<0.05)。見表3。

表2 是否出現淋巴結轉移的胃癌患者中 microRNA-214和MGAT5水平的對比

表3 胃癌不同的時期患者microRNA-214 和MGAT5表達率的對比

4 microRNA-214表達率與胃癌患者臨床病例因素的相關性 胃癌患者中男性患者的microRNA-214表達率要比女性患者的要低(P<0.05)，<60歲的胃癌患者要比>60歲的患者的microRNA-214表達率要明顯低(P<0.05)；腫塊大小<5 cm的胃癌患者的microRNA-214表達率要比腫塊大小>5 cm的胃癌患者的表達率要明顯偏低(P<0.05)；分化程度呈高、中分化的胃癌患者的microRNA-214表達率要比分化程度呈低、未分化的含量要明顯偏低(P<0.05)。見表4。

表4 microRNA-214表達率與胃癌患者臨床 病例因素的相關性

討 論

隨著社會的不斷進步，工業發展越來越快，環境污染越來越嚴重，最后導致癌癥的發病率越來越高[11]。該病癥在早期時癥狀不明顯，因此常規的檢測并不能及時診斷出。這也就導致了患者病情的延誤，錯過了最佳治療時間，導致癌癥的病死率增加。該種病癥后期會出現病情轉移的現象，這就更加加大了臨床診斷的困難性。胃癌癥要盡早治療，治療時間越早，患者的身體恢復情況就越好，對細胞表面糖蛋白的寡糖的改變引起細胞的粘附和遷移行為的顯著變化。在編碼蛋白的活性的增加可能與侵襲性惡性腫瘤的進展相關[12]。

隨著胃癌表達率發病率越來越高，胃癌組織中microRNA-214和MGAT5的表達的研究迫在眉睫，該文章就隨機選取2015年6月至2017年6月在我院治療的80例患胃癌的患者探究胃癌組織中microRNA-214和MGAT5的表達及預后的相關性分析。據研究表明，胃癌患者在治療過程中microRNA-214和MGAT5的表達不同。患者胃癌組織中的microRNA-214和MGAT5表達率要比患者胃黏膜組織中的microRNA-214和MGAT5表達率要明顯高。

腫瘤細胞在患者體內不斷地快速增長，體內的血管中的血液運輸的營養已經不能維持腫瘤細胞的生長，因此，腫瘤細胞會誘導產生新的腫瘤血管，增加血管中血液運輸的速率，為腫瘤細胞提供更多的營養，促進其的生長與浸潤。在腫瘤細胞生長過程中，會有淋巴液在身體中移動，進而加快腫瘤細胞的快速轉移，以便獲取更多的營養物質供自己生長。MGAT5含量的變化與患者身體內的許多病理以及生理變化有關系，當細胞遷移、細胞分化、細胞增殖以及腫瘤的形成時人體內的MGAT5含量會發生相應的變化。在胃癌中出現淋巴結轉移的患者的microRNA-214和MGAT5的表達率明顯高于未出現淋巴結轉移的患者，Ⅲ、Ⅳ期的microRNA-214和MGAT5表達率明顯高于Ⅰ期、Ⅱ期患者；細胞表面的糖蛋白會參與腫瘤的一系列過程，在腫瘤發展的不同階段，患者體內的MGAT5水平會明顯不同。MGAT5在人體內的含量與各種病理與生理的過程有關系，例如：細胞分化、細胞的遷移、細胞的增殖以及腫瘤的形成這些過程。MGAT5的改變可以對腫瘤細胞之間的相互作用有一定的調節作用，對腫瘤細胞的運動有一定的促進作用。MGAT5是一種高爾基體糖基轉移酶和Ⅱ型跨膜糖蛋白，可以決定復雜型糖鏈結構。對于蛋白質翻譯之后的蛋白質的修飾起著一定的作用。

近年來，隨著社會的高速發展，人們的飲食越來越不規律，消化系統的疾病的發病率越來越高，胃癌的發病率在消化系統癌癥中越來越高，嚴重影響了患者的生活質量。胃癌極高的發病率不僅僅危害患者的生命健康，而且對于患者的家庭也帶來了沉重的經濟和精神負擔[13]。 MicroRNAs 是近些年來出現的一種非蛋白質編碼 RNAs ，該種物質可以準確的了解到腫瘤的發現進程，為臨床上腫瘤的研究開拓了新的途徑，成熟的 microRNA 具有調節基因的表達活性的功能。據數據顯示， miRNA 的表達水平在不同種類的腫瘤中是不相同的它們會在體內起到抑癌基因和原癌基因的作用。據相應的數據表明， microRNA-214與腫瘤有些密切的聯系。microRNA-214可以通過和PTEN 的 3 ’ - 非翻譯端結合， 與下調 PTEN 蛋白表達，活化 Akt 通路可以用來誘導細胞繼續存活，進而產生順鉑的耐藥性[14]。

據相應數據統計可以得到，microRNA-214 該種物質在乳腺癌組織中表達極高，與腫瘤細胞的侵襲性有著密切的聯系。microRNA-214在患者體內起到調控的作用，調控患者體內腫瘤細胞。但是目前對于該種物質在胃癌組織中的機理還不太明確，初步研究發現與患者的性別、年齡、腫塊的大小、分化的程度有關系。男性胃癌患者的microRNA-214和MGAT5表達率明顯低于女性患者；在年齡方面，<60歲的胃癌患者要比>60歲的患者的microRNA-214和MGAT5表達率要明顯低，腫塊<5cm的胃癌患者的microRNA-214和MGAT5表達率要比腫塊>5cm的胃癌患者要明顯偏低，分化程度呈高、中分化的胃癌患者的microRNA-214和MGAT5表達率要比分化程度呈低分化的要明顯偏低[15]。該實驗運用了免疫組化方法，對胃癌患者體內的胃癌組織以及胃黏膜組織進行測定，進而分析microRNA-214與臨床病理因素的關系，了解microRNA-214胃癌組織中的表達與哪種因素存在關系。進而應用到臨床中，通過調節人體中microRNA-214的水平來達到抑制胃癌的發生。

綜上所述，microRNA-214和MGAT5在胃癌組織中高表達，能夠預測胃癌的發展、發生以及預后，在臨床診斷和治療過程中會起到一定的預示作用。