陳皮組成成分及檢測方法研究進(jìn)展

李尚科，李跑,*，杜國榮,3，丁勝華，單楊，蔣立文，劉霞

（1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院，食品科學(xué)與生物技術(shù)湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖南長沙 410128；2.湖南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院湖南省農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，果蔬貯藏加工與質(zhì)量安全湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖南長沙 410125；3.上海煙草集團(tuán)有限責(zé)任公司技術(shù)中心北京工作站，北京 101121）

陳皮為蕓香科植物橘及其栽培變種的成熟果皮，存放時間越久，果皮中的辛辣氣味越弱，藥用效果就越好[1]。陳皮在廣東、福建、四川、重慶、浙江、江西、湖南等地均有大規(guī)模生產(chǎn)，其中以廣東新會的廣陳皮最為出名[2]。陳皮可用于胸腹脹滿、痰多咳嗽、胃失和降、惡心嘔吐等癥狀的治療，是不可多得的藥食同源佳品。陳皮用途廣，用量大，近年來，有大量研究對陳皮中的化學(xué)成分及其檢測手段進(jìn)行了深入探討。陳皮中含有大量具有藥理價值的化學(xué)成分，如黃酮類、揮發(fā)油類、生物堿類以及微量元素等。為了準(zhǔn)確定性定量分析這些物質(zhì)，人們試驗(yàn)了大量的檢測方法，如分光光度法、電化學(xué)法、色譜及其聯(lián)用技術(shù)等。本文旨在歸納總結(jié)陳皮中的功能成分其主要檢測手段，并對檢測技術(shù)的發(fā)展進(jìn)行了展望。

1 陳皮的主要化學(xué)組成

國內(nèi)外大量研究表明，陳皮成分中含有大量的黃酮類、揮發(fā)油類、生物堿類和微量元素等物質(zhì)。

1.1 黃酮類成分

黃酮類化合物是影響陳皮生理活性的重要物質(zhì)，主要體現(xiàn)在抗氧化活性、降低甚至去除氧自由基等方面的功能上[3]。黃酮類化合物包括橙皮苷（Hesperidin）、新橙皮苷（Neohesperidin）、川陳皮素（Noloiletin）、紅橘素（Tangeretin）、柚皮蕓香苷（Narirutin）等，占比可達(dá)80%以上。橙皮苷占總量的50%以上，其主要功效為增強(qiáng)毛細(xì)管的堅(jiān)韌度，防止微血管破裂出血，從而維持血管正常滲透壓，降低心血管疾病的發(fā)生率，具有良好的藥用價值[4-5]。

1.2 揮發(fā)油類成分

揮發(fā)油又稱精油，是一類難溶于水、易溶于有機(jī)溶劑中、具有揮發(fā)性的油狀液體，有獨(dú)特的芳香氣味，由脂肪族化合物、含硫含氮化合物、芳香族化合物、萜類及其含氧衍生物構(gòu)成[6]。陳皮揮發(fā)油有抗氧化活性、抗微生物、祛痰、促消化、排氣和軟化血管等功效。周欣等[7]利用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對不同年份新會陳皮中揮發(fā)油的組成和含量進(jìn)行了測定。結(jié)果顯示，新會陳皮中的揮發(fā)油成分隨時間推移逐漸增加，同時也會生成某些未知成分。崔佳韻等[8]利用DPPH、ABTS、羥基自由基清除和總還原能力進(jìn)行了探究試驗(yàn)，也對不同年份的新會陳皮揮發(fā)油的抗氧化能力進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，陳皮中的抗氧化物質(zhì)具有較優(yōu)的清除自由基以及還原能力，且揮發(fā)油含量越高效果越好。

1.3 生物堿類成分

辛弗林是陳皮中含量較高的生物堿類物質(zhì)，含量為0.2%～0.6%，具有收縮血管、刺激血壓、擴(kuò)張氣管和支氣管、提高新陳代謝、增加熱量消耗等功能[9]。宋玉鵬等[10]利用高效液相色譜法測定了不同陳皮來源藥材（茶枝柑、溫州蜜柑、大紅袍、福橘）中辛弗林的含量差異，結(jié)果證實(shí)，辛弗林的含量差異影響廣陳皮品質(zhì)的主要因素。

1.4 微量元素

陳皮中的微量元素主要為硒和銅，其中硒具有增強(qiáng)免疫力、預(yù)防糖尿病、抗衰老等作用，銅具有維持造血功能、保持心臟血管彈性、抗流感等功能。林廣云等[11]利用原子吸收分光光度法對多年陳皮中多種微量元素進(jìn)行了檢測，得到了鉀、鈉、鈣、鎂、銅、鋅、鐵、鍶和錳的含量。周件貴等[12]以鄰苯二胺鹽做顯色劑，運(yùn)用紫外分光光度計(jì)法在波長335 nm 下硒元素含量進(jìn)行了測定，結(jié)果表明，陳皮中的硒元素含量為2.36～9.83 μg/g。

1.5 其他成分

果膠也是陳皮的重要組成成分，含量可達(dá)15%～30%。李萍等[13]以陳皮為原料，采用酸法提取粗果膠，正交試驗(yàn)優(yōu)化提取工藝，比較了幾種吸附劑對粗果膠的純化效果。她還提出，陳皮含有許多多酚類、維生素、對羥福林等成分。盛釗君等[14]對不同年份陳皮產(chǎn)品的多酚抗氧化活性進(jìn)行了研究，結(jié)果表明，隨著陳皮陳化時間的增加，多酚含量逐漸減少，陳皮的抗氧化活性也相應(yīng)降低。灑麗明等[15]采用離子對高效液相色譜法測定陳皮及其制劑中對羥福林的含量，平均回收率為99.5%，RSD 為1.70%。

2 陳皮化學(xué)成分的檢測方法

陳皮有效成分檢測方法主要有四大類，即分光光度法、電化學(xué)法、色譜法以及氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法。

2.1 分光光度法

分光光度法主要分為紫外分光光度法和熒光光度法等，這類方法由于操作簡單、檢測速度快、效率高等特點(diǎn)而得到了廣泛的應(yīng)用。

紫外分光光度法只適用于總黃酮含量的測定，無法實(shí)現(xiàn)對單一黃酮類的檢測[16]。鄭國棟等[17]利用紫外-可見分光光度法對不同產(chǎn)地生產(chǎn)的陳皮總黃酮以及多糖含量進(jìn)行了測定，結(jié)果表明總黃酮和多糖在一定范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，重現(xiàn)性好且結(jié)果準(zhǔn)確。伍長春等[18]在200～600 nm 波長范圍內(nèi)利用多種方法對蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液以及樣品比色液進(jìn)行光譜掃描，從而選出較優(yōu)的陳皮總黃酮分光光度法。康永勝等[19]利用分光光度法，以蘆丁為參考，對提取的黃酮化合物進(jìn)行了顯色實(shí)驗(yàn)，成功得到了陳皮提取物中的總黃酮含量。在中性或弱堿性及亞硝酸鈉存在的條件下，黃酮類化合物可與鋁鹽生成螯合物，利用該方法可測得陳皮中黃酮類化合物含量。李玉琪等[20]根據(jù)此類原理實(shí)現(xiàn)了赤土茯苓總黃酮含量的測定，最終得到總黃酮含量約為0.4%。

根據(jù)熒光強(qiáng)度與待測物的濃度成正比的性質(zhì)，在紫外線照射下，黃酮類化合物可與某些金屬離子的絡(luò)合物產(chǎn)生熒光，從而可以建立黃酮類化合物的熒光光度檢測方法。張敏等[21]提取了十種中藥的總黃酮（含陳皮），以蘆丁為參考，探究十種中藥總黃酮的含量。結(jié)果顯示，利用熒光光度法可以實(shí)現(xiàn)除山楂外所有中藥總黃酮的測定。

2.2 電化學(xué)法

2.2.1 極譜法

極譜法主要通過測定物質(zhì)在電解過程中產(chǎn)生的極化電流-電位（或電位-時間）線性來確定被測物質(zhì)濃度的電化學(xué)分析方法。胡勁波等[22]利用極譜法分析了陳皮中主要黃酮類物質(zhì)——橙皮苷，發(fā)現(xiàn)橙皮苷在極譜儀上出現(xiàn)明顯的導(dǎo)數(shù)波峰。鄒洪等[23]用單掃示波極譜法測定了中藥陳皮中總黃酮的含量，發(fā)現(xiàn)其具有較好的線性關(guān)系。

2.2.2 毛細(xì)管電泳法

毛細(xì)管電泳法是運(yùn)用彈性石英毛細(xì)管作為樣品的分離通道，輔以高壓直流電場提供驅(qū)動，最終依據(jù)樣品中不同成分之間分配行為上的差異而實(shí)現(xiàn)分離。李海玲等[24]利用毛細(xì)管電泳針對川陳皮素與牛血清白蛋白的相互作用進(jìn)行了探究。武井[25]使用毛細(xì)管電泳對陳皮中的黃酮類物質(zhì)含量進(jìn)行了測定，從而確立了總黃酮檢測的最佳條件，并應(yīng)用于含有陳皮類黃酮成分的保健食品檢測。

2.3 色譜法

2.3.1 薄層掃描色譜法

薄層掃描色譜法指利用一定波長的光照射在薄層板上，對薄層色譜中有紫外或可見吸收的斑點(diǎn)或經(jīng)照射能激發(fā)產(chǎn)生熒光的斑點(diǎn)進(jìn)行掃描，結(jié)合其圖譜信息用于樣品分析的一類方法。周芳等[26]利用薄層掃描色譜法對六種不同來源的陳皮中黃酮類化合物的含量進(jìn)行了檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，橙皮苷、川陳皮素、橘皮素皆與圖譜具有良好的線性關(guān)系。

2.3.2 高效液相色譜法

高效液相色譜法是以液體為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測，從而實(shí)現(xiàn)對試樣分析的色譜方法。高效液相色譜法主要用于陳皮及其制劑中橙皮苷和橘皮素含量的測定。呂小健[27]利用高效液相色譜法在最優(yōu)分離條件下得到了橘皮素和川陳皮素兩種單體。趙斌等[28]利用高效液相色譜法測定了陳皮藥材中所提取的橙皮苷，試驗(yàn)過程中，陳皮中橙皮苷的平均回收率可達(dá)99.5%。

2.3.3 指紋圖譜

指紋圖譜為復(fù)雜物質(zhì)經(jīng)一定條件處理后，結(jié)合相應(yīng)的分析技術(shù)，得到的能夠揭示其化學(xué)特征的色譜或光譜圖。因此，色譜指紋圖譜可實(shí)現(xiàn)對陳皮等中草藥質(zhì)量的有效探究。徐展翅等[29]建立了廣陳皮的高效液相色譜指紋圖譜，采用不同產(chǎn)地陳皮為研究對象，最終表明廣陳皮與其他5 個品種的普通陳皮高效液相色譜指紋圖譜存在一定的差異。羅艷等[30]也建立了同樣的廣陳皮指紋圖譜，采用相似度評價系統(tǒng)對廣陳皮與陳皮的不同產(chǎn)地、不同日期的指紋圖譜進(jìn)行了相似度對比，并運(yùn)用聚類分析方法對其進(jìn)行了分析，最終實(shí)現(xiàn)了共有峰的高效液相色譜指紋圖譜建立，并實(shí)現(xiàn)了對廣陳皮與陳皮的100%鑒別。易倫朝等[31]也利用指紋圖譜法對不同柑橘果皮進(jìn)行分析，比較發(fā)現(xiàn)不同品牌陳皮指紋圖譜上存在明顯差異，但存在某些樣品產(chǎn)生新橙皮苷峰。

2.4 氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)

氣相色譜法是一種對易于揮發(fā)而不發(fā)生分解的化合物進(jìn)行分離與分析的技術(shù)。在陳皮檢測中廣泛用于黃酮類化合物的分離與測定。氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)是指將氣相色譜儀與質(zhì)譜儀有機(jī)結(jié)合起來，被廣泛應(yīng)用于復(fù)雜組分的分離與鑒定。郭暢[32]采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對陳皮精油中揮發(fā)性成分進(jìn)行鑒定分析，最終鑒別出陳皮精油中含有124 種揮發(fā)性物質(zhì)。嚴(yán)寒靜[33]利用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)得出陳皮中揮發(fā)油成分受儲存時間的影響。貯存時間越久，成分和含量上皆出現(xiàn)分子量較小的成分降低，分子量較大成分升高的現(xiàn)象。

3 展望

綜上所述，陳皮的化學(xué)成分主要為黃酮類化合物和揮發(fā)油。經(jīng)過多年的深入研究，高效液相色譜等方法在陳皮成分分析領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。近年來隨著各種先進(jìn)化學(xué)分析儀器、檢測儀器的引入以及聯(lián)用技術(shù)等新方法的出現(xiàn)，液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)、中藥指紋圖譜等新型方法對陳皮化學(xué)成分的研究也將更加深入，陳皮化學(xué)成分的提取及含量測定方法將得到提升。但陳皮中還存在的大量微量的功效成分還未挖掘出來，還需要利用更加先進(jìn)的分析手段如核磁共振以及高維色譜等進(jìn)行分析。此外，由于陳皮成分的復(fù)雜性，不同年份以及不同產(chǎn)地陳皮成分的差異還需要進(jìn)一步研究。隨著未來檢測手段的不斷發(fā)展，陳皮中的化學(xué)成分也將得到更充分的研究和應(yīng)用。