2017年山東菏澤規模化羊場布魯菌病基線調查

宇 凌,范明杰,王慧軍,董翠梅,李金峰,黨安坤,蘭鄒然

（1.山東省菏澤市動物疫病預防控制中心,山東 菏澤 274000;2.山東省曹縣動物防疫監督所,山東 曹縣 274400;3.山東省動物疫病預防與控制中心,山東 濟南 250022）

布魯菌病（以下簡稱為布病）是由布魯菌引起的,主要侵害人和動物淋巴系統和生殖系統的人獸共患傳染性變態反應性疾病,100多年來,該病在全球范圍內廣泛流行,嚴重影響了畜牧業的健康發展,并帶來嚴重的公共衛生問題,同時間接影響了畜產品出口及旅游事業的發展。近年來,布魯桿菌病已成為我國部分畜牧業發達地區威脅人類健康的頭號人獸共患病,我國新疆每年因布病流產、空懷等少生幼畜達100～140萬頭,新疆、青海兩地,每年因本病造成的直接經濟損失約1億元[1]。2016年山東省人間布病確診病例4 092人,達到1973年以來的最高峰（數據來源:2017山東省畜牧獸醫局布病基線調查統計數據）,各地市均有人間布病病例,人間布病2016年較上年增長3.99%,其中菏澤市增長1.39倍（數據來源:2017山東省畜牧獸醫局布病基線調查統計數據）。菏澤位于魯、蘇、豫、皖四省交界處的魯西南,是農業大市,也是畜牧業大市,特別是牛羊養殖深受廣大中小家戶喜愛,截止至2016年底,菏澤市有飼養量在100只以上的養羊場戶3 260個,羊存欄量5 785 004只,能繁母羊2 614 257只（數據來源:2016年菏澤市畜牧生產統計年報）。前些年菏澤一直堅持以青山羊與小尾寒羊自繁自養為主的飼養方式,但隨著當地群眾生活水平的提高及單縣羊肉湯在全國知名度的提高,菏澤市本地消費及用于加工生產羊肉湯外銷的羊肉需求量增大,當地自繁自養的青山羊、小尾寒羊遠遠不夠需求,每年都從外省調入其他品種山羊、綿羊進行短期育肥,增加了布病的傳入風險。為切實做好魯西南地區牛羊布魯菌病防控工作,也為了全面掌握菏澤市畜間羊布病流行情況,菏澤市動物疫病預防控制中心根據國家和省里有關文件要求,于2017年8月通過橫斷面研究對我市規模化羊場（存欄量大于等于100只的羊場）開展了布病流行病學基線調查工作。

1 材料與方法

1.1 病例定義 布病陽性羊只:血清樣品通過布病虎紅平板凝集試驗和試管凝集試驗檢測均為陽性的羊只。

布病陽性場群:場群內至少有1只羊檢測為布病陽性的養羊場戶。

布病陽性縣區:至少檢測出1例布病陽性養羊場戶的縣區。

1.2 研究群和抽樣單元

研究群:菏澤市所有存欄100只以上的羊場（戶）,總共有3 260個場戶。

抽樣單元:對于群體,抽樣單元為每個羊場（戶）;對于個體,抽樣單元為每個羊場（戶）內所有6月齡以上羊只。

1.3 抽樣方案設計 參照Yamen等[2]的方法進行調整。

第1步,初步估算全市要抽取的羊只數。用估計流行率的方法[3]抽取。3 260個100只以上的規模羊場,按95%置信水平,預期流行率5%（根據往年監測結果,本地區羊群布病感染不嚴重）,1%的可接受誤差,初步計算出全市要抽取的羊只數為1 825只。計算公式為:

第2步,計算設計影響:預先確定每個場抽取30只羊,羊布病的ICC根據文獻[3],由于菏澤地區養羊情況與該文獻研究地區情況類似,ICC按0.1來計算,通過以下公式計算設計影響。

設計影響（design effect）=1+（m-1）×ICC,式中,m為每場預先確定要抽取的羊只數,本研究m為30,可以計算出設計影響為4。

第3步,確定最終抽樣的羊只數為1 825×4=7 300（只）,抽樣場數為 7 300/30=243（個）。

第4步,配額將總抽樣場戶數分配到9個縣區,每個縣區分配數見表1。

1.4 場戶的隨機選擇和場戶內羊的隨機選擇 場戶的隨機選擇和場戶內羊的隨機選擇均用系統隨機抽樣方法進行[4]。

1.5 檢測方法 對采集的血清,進行虎紅平板凝集試驗和試管凝集試驗垂直試驗,檢測布病抗體。先用虎紅平板凝集試驗初篩,對檢出的陽性樣品再用試管凝集實驗確診。本次調查參照文獻[5],設定虎紅平板凝集試驗的敏感性、特異性分別為95%、80%,試管凝集試驗的敏感性、特異性分別為85%、90%,垂直聯合試驗的敏感性、特異性分別為81%和98%。

1.6 數據收集和分析 分別收集抽樣羊場的血清學檢測結果,用于后續統計分析。

個體和群體真實流行率的計算:通過抽樣檢測,可以得到羊布病的個體表觀流行率和群體的表觀流行率,利用公式 TP= （AP+Sp-1）/（Se+Sp-1）就可以計算個體和群體的真實流行率。流行率的95%置信區間（CI）可用以下公式計算:

式中其中p為流行率,Z標準正態分布中概率0.05對應的統計數,n為抽樣數量。

2 結果

2.1 個體流行率 根據抽樣方案,將全市的縣區做代號標記,標記為A-I,本次調查全市應抽取243個場的羊血清7 290份,實際檢測了7 282份血清,其中有8份血樣由于質量問題沒有得到檢測結果。7 282份血清中,總共檢出陽性33份,個體表觀流行率為0.45%（95%CI∶0.3% ～0.6%）,個體真實流行率為0.54%（95%CI∶0.4% ～0.7%）（需要交代一下方法的敏感性和特異性）。個體流行率最高的縣區為C縣區,個體表觀流行率為1.07%（95%CI∶0.5% ～2.0%）,個體真實流行率為1.33%（95%CI∶0.6% ～2.5%）,B、E、F和H縣區未檢到陽性（見表1）。

表1 各縣區布病的個體表觀流行率和真實流行率

本次調查總共在5個縣區檢出8個布病陽性規模化羊場,其中A、C和G區分別檢出2個陽性場,D和I區分別檢測出1個陽性場,個體陽性率最高的場在C區,陽性率最高的規模化羊場布病個體表觀流性率達26.67%（95%CI∶12.3% ～45.9%）,個體真實流行率達 31.23%（95%CI∶13.0% ～55.6%）,出現陽性的規模化羊場中,陽性率最低的規模化羊場布病個體表觀流行率達3.33%（95%CI∶0.1% ～17.2%）,個體真實流行率達1.68%（95%CI∶0.0% ～19.2%）（見表2）。

表2 陽性場內表觀流行率和真實流行率

2.2 群體流行率 根據抽樣方案,需要在本市共檢測243個規模化羊場,共檢測出8個陽性場,這8個陽性場分布上于 A、C、D、G 和I縣區,A、C、G 縣區各檢出兩個陽性場,D和I縣區各檢出1個陽性場,而B、E、F和H縣區未檢出陽性場（見圖1）。檢出陽性場的縣區中,I縣區布病群體表觀流行率為最低,為4.55%（1/22）（95%CI∶0.1% ～22.8%）,計算得到的群體真實流行率為 5.73%（95%CI∶0.1% ～28.8%）;G縣區群體表觀流行最高7.69%（2/26）（95%CI∶0.9% ～25.1%）,計算得到的群體真實流行率為9.71%（95%CI∶1.1% ～31.7%）;本次調查全市羊布病群體表觀流行率為3.29%（8/243）（95%CI∶1.4% ～6.4%）,計算得到的群體真實流行率為1.64%（95%CI∶0.0% ～5.6%）。

圖1 2017年菏澤市各縣區羊場布病監測結果

2.3 調入和未調入羊只的羊群布病檢測結果 根據調查結果發現,調入羊只的養羊場戶數總共有92個,檢出布病陽性的8個場均為調入羊只的場戶（見表3）,調入羊只的養羊場戶檢測為布病陽性的概率顯著高于未調入羊只的養羊場戶（卡方檢驗,P ＜0.01）。

表3 調入和未調入羊只的羊群布病檢測結果

3 討論

從表1中可以看出,本次調查規模化羊場布病個體表觀流行率為0.45%,從個體水平來看,全市羊布病流行率處于相對較低水平,且通過統計采樣單信息發現,我市自繁自養的青山羊和小尾寒羊布病陽性率是零,而布病陽性場均與從外省調入羊只有關,這與今年山東省其他縣區的情況類似[5-6];從表2可以看出,出現陽性的規模化羊場,場內個體表觀流行率最低的達到3.33%（95%CI∶0.1% ～17.2%）,最高的已高達26.67%（95%CI∶12.3% ～45.9%）,說明羊場一旦引入布病,容易在場內擴散傳播,造成場群流行率逐漸上升;從表3可以看出有的縣區規模化羊場布病群體表觀流行率已達7.69%,加強羊布病防控已成為當前的緊急任務,應引起高度關注,及時采取針對性防控措施來降低羊群的布病流行率。

通過調查分析,我市規模化羊場出現布病陽性的原因:其一、單縣羊肉湯聞名全國,需求量大,現有羊產量遠遠不能滿足市場需求,需要從周邊省區調進大量羊進行短期育肥,此次調查發現陽性場戶均存在市場調入羊只的情況,羊及羊產品的流通加速,加大了動物的飼養、交易、屠宰、檢疫等環節監管的難度,為布病的傳播創造了客觀條件,增加了羊布病的傳播風險[7]。其二、調入來自外省的羊只,沒有羊調出地開具的檢疫證明和布病檢測報告,養羊場戶引種或買入羊只后基本沒有落地報告,也不進行檢疫和隔離,直接混群飼養,布病傳入的風險很高。

調查結果顯示,本市規模養羊場場群表觀流行率和個體表觀流行率分別為3.29%（8/243）（95%CI∶1.4% ～ 6.4%）和 0.46% （33/7282）（95%CI∶0.3%～0.6%）,群體流行率顯著高于個體流行率（卡方檢驗,P＜0.01）。布病陽性場群均存在從外省調入羊只的情況。

4 布病防控建議

4.1 建議各地檢疫部門嚴格動物調運檢疫工作。各地動物檢疫部門在調出牛羊時都應對調出動物進行布病檢測,防止布病陽性動物調運,動物調入后應及時開展隔離檢測,混群前應開展布病檢測,以防布病陽性動物混入群體。

4.2 建立并加強畜牧獸醫、商業、食藥、衛生等部門的協同作戰機制,嚴把動物及其產品的流通關,規范活羊交易、屠宰、羊肉市場及食品加工企業、餐飲企業的管理。特別對于因布病感染而流產的死胎,個別養殖戶為了圖謀小利益,會偷偷賣掉,流入市場后造成人的感染,應嚴厲查處。鼓勵養殖戶為布病易感活畜參保,一旦出現布病疫情或檢出布病陽性時能把經濟損失降到最低,并有利于病畜和陽性畜的撲殺無害化處理。

4.3 加強布病知識及其危害的宣傳工作。獸醫部門聯合衛計委對養殖戶、屠宰、加工羊肉的人員有針對性地開展健康教育,使這些從業人員自我防護意識得以提高,一旦出現布病類似癥狀,應及時診斷,早期治療,以保證良好預后。

4.4 加強縣級獸醫實驗室建設和獸醫檢驗人員業務培訓,提高基層檢測人員的布病檢測能力和診療水平。縣級獸醫部門每年都要做好本轄區內布病的流行病學調查,為布病的科學防控提供有效技術支持。