UF-1000i尿液沉渣分析儀在尿液管型檢測中的應用分析

紀鳳卿 滕 菁 陳君穎

廈門市中醫院檢驗科，福建廈門 361009

管型（casts）為尿液沉渣中較有重要臨床意義的成分之一，其出現提示可能有腎實質性損害。盡管尿液全自動化檢測極大提高了檢驗科的工作效率，但是鑒于自動化儀器本身的一些局限性，尿液成分鑒別存在交叉干擾及管型的形態復雜，致使管型經常難以區分辨認[1]。有諸多因素影響儀器對管型檢測的準確性，易造成假陰性、假陽性。本研究隨機選取本院2018年1～4月2130份尿液標本采用干化學AX4030分析儀，UF-1000i尿液沉渣分析儀進行分析，以顯微鏡檢法判定管型檢測真陽性、真陰性標準，從而統計UF-1000i尿液沉渣分析儀檢測管型存在假陽性率、假陰性率，并且分析檢測管型存在假陽性，假陰性的干擾因素，提出初步處理措施。

表2 UF-1000i檢測出的假陽性結果

1 資料與方法

1.1 一般資料

標本來源隨機選取本院2018年1～4月門診、住院尿液標本2130例，其中男1058例，女1072例，年齡1～91歲，平均48歲。

1.2 儀器、試劑

京都干化學分析儀AX4030，配套試劑及伯樂質控品；日本sysmex UF-1000i尿沉渣分析儀，配套試劑及質控品，Olympus公司CX-21雙目顯微鏡。標本采用湘儀牌SC2542離心機低速離心。

1.3 檢測方法

按照科室相關SOP完成室內質控檢測，以確保檢測結果的準確性。收集的門診、住院尿液均為中段尿，混勻后取10mL倒入一次性尿管。先用于AX4030、UF-1000i檢測，然后用CX-21顯微鏡鏡檢。離心鏡檢流程按照《全國臨床檢驗操作規程》[2]，將此10mL新鮮混勻的尿，以1500r/min轉速，離心5min，倒去上清液，剩余0.2mL混勻后，進行管型鏡檢。

1.4 結果判讀標準

女性管型正常參考范圍為0～2.4μL、男性管型正常參考范圍為0～2.25μL，男女病理管型正常參考范圍為均是0～0.5μL；顯微鏡鏡檢陽性標準：正常值參考范圍為：0～1/HP；超過以上范圍均視為陽性，干化學法尿液蛋白質陽性標準：Pro為（+）、（+）、（2+）、（3+）。

1.5 統計學方法

計數資料以[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗，以SPSS18.0統計軟件進行數據結果處理。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 顯微鏡法與UF-1000i分析儀兩種方法檢測尿液管型的結果

運用顯微鏡法與UF-1000i分析儀法對2130份尿液標本進行分析，收集有關管型數據。其中UF-1000i法和顯微鏡法的陽性率是11.60%、4.51%，兩者比較 χ2=72.296，P=0.000，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩種檢測方法檢測尿液管型結果[n（%）]

2.2 UF-1000i檢測出的假陽性、假陰性結果

以人工顯微鏡法判定管型檢測真陽性、真陰性標準。UF-1000i檢出假陽性151例，假陽性率為7.09%；UF-1000i檢出假陰性6例，假陰性率為0.28%。

2.3 UF-1000i法分析2130份尿液管型假陽性結果

所有尿液標本經UF-1000i檢測尿液管型，出現151例假陽性結果見表2。各種干擾物（黏液絲、各種結晶及細菌成團、白細胞及上皮細胞成團）所占比例分別為60.93%、23.84%、15.23%。

3 討論

UF-1000i尿液分析儀的原理是采用半導體激光流式細胞/核酸熒光染色技術，根據熒光流式細胞、電阻抗檢測細胞大小及電導率信息進行綜合分析判別，從而進行精準、定量的尿液有形成分分析[3-5]。UF-1000i尿液分析儀檢測管型時，存在以下干擾因素：（1）含有纖維、黏液絲等類似管型物質的尿液標本，儀器識別誤判；（2）尿液中少數脫落的上皮細胞與管型具有相類似的形態和染色性[6]，出現誤判；（3）標本中存在部分真菌也容易被熒光染色之后識別誤判[6]；（4）尿液中部分有形成分相互積聚形成與管型類似物也會被誤判，如聚集成團狀、串狀的白細胞團，膿細胞團也會誤判成管型[7-8]。

本研究發現UF-1000i尿液分析儀檢測管型時，會受到黏液絲，各種結晶、細菌成團，白細胞、上皮細胞成團等因素的干擾，并未發現有真菌干擾引起的假陽性。本研究以鏡檢法檢測為陽性判定為真陽性標準，發現UF-1000i分析儀法與人工鏡檢法檢測管型的陽性率性有差異。這與國內諸多學者研究結論一致[9-11]。此差異除了大部分與儀器本身局限性而存在干擾因素有關外，還與檢驗師細胞形態學水平差異及主觀判別，離心吸樣誤差等導致管型計數結果有一定差異有關。 此外還發現在這些假陽性標本中相當一部分為住院標本，不管是管型檢測值還是本研究病理管型檢測值均略高于所設定參考值，經鏡檢法發現均為陰性。此部分假陽性結果是受尿液檢驗前質量控制影響所致。該住院尿液標本送達檢驗科的時間到完成檢測時間大于2h而導致尿液黏液絲出現，各種結晶析出，細菌滋生，進而成團結塊，形成類管型導致檢測假陽性。對于不是住院的尿液管型檢測也存在類似假陽性情況，我們認為也可能是由于本地區人群生理遺傳特征所致。中國是遼遠廣闊的多民族國家，各民族各地域人群具有自己獨特的生理遺傳特征，自然各地區人群生理醫學客觀指標參考值勢必存在一定差異。為此重新尋找適合本地區人群尿液管型參考值數據資料是十分必要。為此我們建議實驗室可通過適當調整管型正常參考范圍從而減少這部分假陽性率，減少人工鏡檢率[12]。有關管型重新設置參考值，均應嚴格按照ISO15189或者CAP認可的標準化流程驗證后，方可重新建立修改本實驗室的尿液沉渣報告單的管型參考值范圍。綜上所述，UF-1000i分析儀檢測管型假陽性率高，要想使假陽性率降低，應及時進行手工顯微鏡法，甚至考慮重新調整管型數據參考值，以保證檢測結果準確性及管型分類。

同時本研究還發現一部分干化學法尿液蛋白陰性，但是UF-1000i檢測管型陽性，人工鏡檢也確實檢出各種管型。究其原因[13]主要是干化學法測定尿蛋白存在干擾因素較多，浸液時間過長和過短都會出現假陰性。出現假陰性的原因[13]：（1） 干化學試帶法測定的蛋白只針對白蛋白為主，對球蛋白、T-H 糖蛋白及 B-J 蛋白均不敏感。（2） 試紙法尿蛋白的原理為 pH 指示劑蛋白誤差原理，當 pH值≤3或者其他一些藥物如大劑量青霉素、慶大霉素、含碘造影劑可致假陰性。（3）試帶法需要足夠的反應和標本量，若浸泡時間過短或過長，導致試帶上試劑被洗脫，標本量不足、反應不完全均可造成假陰性。針對以上假陰性原因若UF-1000i檢測發現管型及病理管型，應用人工顯微鏡檢法加以確認。若人工顯微鏡檢法確認有管型，可根據管型形成條件可認為干化學試紙法尿蛋白陰性結果為假陰性。此外本研究也發現0.28%標本，UF-1000i分析儀檢測管型陰性，但是干化學AX4030檢測尿液蛋白陽達2+以上，尿液PH為酸性，經人工顯微鏡鏡檢存在管型。這部分假陰性歸因于管型短小或溶解，或者標本的電導率低出現漏診[3]及管型內顆粒無法被熒光染料染色造成儀器漏檢[14]。

對于UF-1000i分析儀檢測尿液管型假陽性，假陰性情況，以及UF-1000i分析儀對管型只能定量分析，無法區分管型類型，要區分則只能依靠人工顯微鏡法。我們建議建立一套完整的管型鏡檢規則以彌補UF-1000i分析儀檢測管型存在局限性。本室目前采用鏡檢規則[15]：（1）AX4030尿液蛋白質陰性，UF-1000i分析儀管型或者病理管型陽性即鏡檢，對于此種情況本研究團隊也試圖重新建立相應參考值，提高鏡檢效率。（2）AX4030尿液蛋白質陽性2+以上，尿液PH為酸性，UF-1000i分析儀管型或者病理管型陽性即鏡檢。（3）AX4030尿液蛋白質陽性2+以上，尿液PH為酸性， UF-1000i尿沉渣分析儀管型或者病理管型陰性，依據臨床診斷及檢驗師自己職業判斷標本適當加以人工顯微鏡鏡檢管型存在與否。（4）AX4030、UF-1000i分析儀兩者檢測均為陰性，直接報告陰性。可見UF-1000i分析儀聯合AX4030干化學分析儀只要增加合適的鏡檢規則，對管型檢測即可起到優化檢出作用[16]。此外我們提倡應嚴格把控尿液送檢時間，應控制在2h以內，以減少室溫時間過長導致尿液結晶析出，細菌、黏液絲產生，導致管型檢測假陽性的出現。并且在人工鏡檢同時充分應用UF-1000i分析儀管型散點圖優勢對管型類型加以區別分類。

綜上所述，UF-1000i尿液分析儀測定尿液管型有一定先進性，但由于儀器局限性仍存在一定的假陽性、假陰性，且無法對管型可靠高效分類。人工顯微鏡鏡檢法仍是尿液管型檢測的“金標準”，但鑒于人工鏡檢法需進行離心處理，費時、精確度差，結果容易受檢驗技師細胞形態學水平影響，無法滿足大批量樣本檢測需求。故目前大醫院檢驗科急需尿液儀器開發商研制出更先進的尿液有形成分儀器，或者進一步優化升級現有儀器，以期為臨床提供更為準確可靠的管型檢測數據，減少檢驗技師人工鏡檢率，提高檢驗科檢測效率。