PARP-1在三陰乳腺癌細胞中的表達及與Ca153和CEA的臨床相關性研究

林丹麗，陳機瓊，馮慧艷，鄒享珍，劉妙娥，王毅軒，鄒前福

(東莞樟木頭醫院 檢驗科，廣東 東莞523633)

乳腺癌的發病率逐年升高[1，2]，治療主要以綜合治療為主，只有當腫瘤細胞相應的激素受體如人類表皮生長因子受體2(HER-2)、雌激素受體(ER)或孕激素受體(PR)蛋白陽性表達時，乳腺癌的靶向治療或者全身治療藥物才能夠發揮抗腫瘤的作用[3]。三陰乳腺癌(TNBC)是指HER-2、ER和PR表達狀態均呈陰性的乳腺癌亞型[4]，它的復發率和轉移率較高，患者的生存時間較短，預后也較其他類型的乳腺癌患者差，而且不能從靶向治療和內分泌治療中受益[5]。聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)是真核細胞內的聚ADP核糖聚合酶，在DNA的損傷修復中具有重要作用[6]。本研究對PARP-1在60例三陰乳腺癌患者細胞中的表達及與Ca153和CEA的臨床相關性進行研究，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2017年1月到2018年2月在本院，廣州金域醫學檢驗中心和周邊醫院檢驗科已經診斷為三陰乳腺癌的60例患者作為研究對象。年齡26-68歲，平均年齡(61.93±7.11)，其中18例為低分化(3級)，26例為中分化(2級)，16例為高分化(1級)。納入標準：符合乳腺癌相關診斷標準且經免疫組織化學法證實ER、PR和HER-2均為陰性表達。排除標準：在采集標本之前接受過化療、放療或者其他治療；含有其他可能影響該研究結果的疾病者；有其他惡性腫瘤者。另選取30例非三陰乳腺癌的患者作為對照組，年齡25-68歲，平均年齡(61.54±7.27)歲，其中7例為低分化，16例為中分化，7例為高分化。兩組一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)。所有患者均簽署知情同意書且該方案已經獲得倫理委員會的批準。

1.2 方法

利用免疫組織化學染色技術將兩組患者的乳腺組織固定脫水后用石蠟包埋制成厚約4.0 μm的切片，然后采用SP法檢測PARP-1的表達水平。單克隆抗體PARP-1購于Santa Cruz公司，SP法檢測試劑盒購于北京中杉金橋公司，按試劑盒說明書進行操作。使用磷酸鹽緩沖液(PBS)溶液代替一抗作為陰性對照，陽性樣本片作為陽性對照。在高倍鏡下觀察樣本，每個視野計數100個腫瘤細胞，每張切片觀察5個視野。

1.3 觀察指標

細胞核或者細胞質內出現棕黃色顆粒時為陽性反應，發生陽性反應的細胞為陽性細胞。陽性反應的強度根據染色的深淺和視野內陽性細胞所占的比例進行判定。按染色深淺I進行評分：陰性為0分；黃色為1分；棕黃色為2分；棕色為3分。按視野內陽性細胞所占百分比P進行評分：>75%為4分；>50%-75%為3分；5%-50%為2分；5%-25%為1分；≤5%為0分。PARP-1表達水平分值S=P×I[7]。S值<3分為陰性表達，S值≥3分為陽性表達，其中最高分為12分。

1.4 統計學分析

本研究所有數據均采用SPSS 20.0軟件進行統計學分析，計數資料采用χ2檢驗，相關性分析采用Pearson相關分析。P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 三陰乳腺癌和非三陰乳腺癌細胞中PARP-1的表達

三陰乳腺癌細胞中PARP-1表達及陽性率較非三陰乳腺癌細胞中高，兩組比較差異具有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 PARP-1在TNBC和NTNBC細胞中的表達(例數，%)

2.2 PARP-1與Ca153在三陰乳腺癌細胞中表達的相互關系

三陰乳腺癌細胞中PARP-1與Ca153的表達呈正相關(r=0.52,P<0.05)。見表2。

表2 三陰乳腺癌細胞中PARP-1與Ca153表達之間的相關性

2.3 PARP-1與CEA在三陰乳腺癌細胞中表達的相互關系

三陰乳腺癌細胞中PARP-1與CEA的表達呈正相關(r=0.26,P<0.05)。見表3。

表3 三陰乳腺癌細胞中PARP-1與CEA表達之間的相關性

3 討論

乳腺癌在臨床上較為常見，是女性最常見的惡性腫瘤之一。三陰乳腺癌的惡性程度高，淋巴結轉移率和復發率也較高，預后較差，對女性的生命健康造成嚴重威脅。目前臨床上尚未出現對三陰乳腺癌有效的靶向治療和全身治療方法。

PARP-1是PARP家族中最有特點和含量最多的一員，它的本質是核蛋白酶，可以在除中性粒細胞外的人體所有有核細胞中表達。PARP-1對DNA斷端敏感性高，與DNA斷端結合后被激活，啟動DNA損傷修復系統，修復損傷DNA。PARP-1的高表達可見于所有類型的乳腺癌[8-11]，其中以在ER、PR或HER2陰性的乳腺癌中PARP-1的高表達更為明顯[12]。本研究結果顯示，PARP-1在三陰性乳腺癌細胞中陽性表達率為66.67%，在非三陰乳腺癌細胞中的陽性表達率為13.34%，兩組比較差異具有統計學意義(P<0.05)。血清Ca153水平常在乳腺癌中過度表達,被公認為乳腺癌較為特異的腫瘤標志物[13]。CEA常用于乳腺癌、肺癌、消化道腫瘤和胰腺癌等輔助診斷，因為它是一種非特異性的腫瘤標志物，所以常常與其他腫瘤標志物聯合檢測[14],還有文獻表示CEA對乳腺癌的診斷治療、療效和預后的觀察有一定意義[15]。相關性分析發現，在三陰乳腺癌細胞中PARP-1與Ca153和CEA均呈正相關(r分別為0.52、0.26，P<0.05)，說明PARP-1可用于乳腺癌特別是三陰乳腺癌的診治和預后判斷中。

綜上所述，PARP-1在三陰乳腺癌細胞中高表達且與Ca153和CEA的表達均呈正相關。