聯用酶聯免疫法、免疫熒光法和散射比濁法檢測不同時期系統性紅斑狼瘡的效果研究

何 麗

(合江縣人民醫院，四川 瀘州 646200)

系統性紅斑狼瘡是患者自身結締組織發生免疫性、炎癥性病變的一種疾病。此病患者多為青年女性[1-2]。目前，此病的發病原因尚不明確，可能與患者的身體存在感染、內分泌紊亂、免疫系統功能障礙及其遺傳因素等有關[3]。此病患者的臨床表現較多，也可出現多個系統功能的癥狀。對此類患者的病情進行診斷易發生誤診。對系統性紅斑狼瘡患者進行免疫學檢測其抗ds-DNA抗體、抗Sm抗體均為陽性。這兩種抗體是系統性紅斑狼瘡患者發生病變的標志性抗體。但此類患者的抗ds-DNA抗體、抗Sm抗體的陽性檢出率均較低。通過檢測這兩種抗體也不能判斷出系統性紅斑狼瘡患者病情的分期。為了提高對系統性紅斑狼瘡患者的病情進行診斷的確診率、明確其病情的分期，可使用散射比濁法對其體內補體C3的水平、補體C4的水平進行檢測。補體C3、補體C4是對系統性紅斑狼瘡患者的病情進行補充檢測的有效指標，對其進行這兩種檢測不僅可明確系統性紅斑狼瘡患者病情的分期，也可有效地顯示出患者進行治療和護理的效果，進而可有效改善患者的預后。本研究主要是探討聯用酶聯免疫法、免疫熒光法和散射比濁法檢測不同時期系統性紅斑狼瘡的臨床效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本文的研究對象為2016年1月至2017年9月期間合江縣人民醫院收治的86例系統性紅斑狼瘡患者和同期進行健康體檢的43例健康人。將43例健康人作為對照組。將43例活動期系統性紅斑狼瘡患者作為觀察Ⅰ組，將43例非活動期系統性紅斑狼瘡患者作為觀察Ⅱ組。在對照組受檢者中，有男6例，女37例；其年齡為21～56歲，平均年齡為(37.07±5.13)歲。在觀察Ⅰ組受檢者中，有男6例，女37例；其年齡為22～54歲，平均年齡為(37.13±5.12)歲。在觀察Ⅱ組受檢者中，有男5例，女38例；其年齡為21～55歲，平均年齡為(36.97±5.15)歲。三組研究對象的一般資料相比，P＞0.05，具有可比性。

1.2 納入標準及其排除標準

觀察Ⅰ組受檢者和觀察Ⅱ組受檢者的病情符合系統性紅斑狼瘡的診斷標準，并被確診；這些患者均簽署了自愿參與本次研究的知情同意書。這些患者的排除標準是：未患有尿毒癥等其他影響其腎臟健康的疾病；不存在心、脾等其他臟器的器質性損傷；未患有血液病。

1.3 方法

對三組受檢者均使用酶聯免疫法、免疫熒光法和散射比濁法進行檢測。具體的方法是：1)取血：⑴在清晨空腹的狀態下，抽取受檢者5 ml的靜脈血作為血液標本。將其血液標本裝入無菌干燥的試管中。⑵在采集血液標本30 min后，對血液標本進行離心處理。將離心機的轉速設為3000 r/min，將離心的時間設為10 min。⑶分離血清后，在確認血液標本沒有高脂血與溶血后，取＞150 μL的血液標本，將其放置于-30℃的冰箱中保存、待測。2)使用酶聯免疫法對血液標本中的抗ds-DNA抗體進行檢測。進行此項檢測需使用抗雙鏈DNA抗體檢測試劑盒(生產企業為北京利米生物科技有限公司，批準文號為京械注準20162400068)。3)使用免疫熒光法對血液標本中的抗Sm抗體進行檢測。進行此項檢測需使用抗核抗體譜檢測試劑盒(生產企業為Zeus Scientific,Inc，批準文號為國械注進20162404949)和特定的試劑。4)使用散射比濁法對血液標本中補體C3的水平、補體C4的水平進行檢測。進行此項檢測需使用H760型號的全自動特定蛋白分析儀(生產企業為深圳市希萊恒醫用電子有限公司，批準文號為粵械注準20152400252)和特定的試劑。5)本次研究需使用熒光顯微鏡[生產企業為歐蒙醫學實驗診斷股份公司(EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG)，批準文號為國械注進20162222960]和特定的抗體參照物(生產企業為上海恒遠生物科技有限公司)。本次研究中的各項檢測均嚴格按照操作說明書進行規范操作。

1.4 觀察指標

觀察并記錄三組受檢者抗ds-DNA抗體的陽性檢出率、抗Sm抗體的陽性檢出率、補體C3的水平及補體C4的水平。

1.5 統計學方法

將本次研究中的數據錄入到SPSS21.0統計軟件中進行分析處理，計量資料用()表示，采用t檢驗，計數資料以%表示，采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組受檢者抗ds-DNA抗體的陽性檢出率、抗Sm抗體的陽性檢出率的比較

與對照組受檢者相比，觀察組受檢者抗ds-DNA抗體的陽性檢出率、抗Sm抗體的陽性檢出率均更高，P＜0.05。與觀察Ⅱ組受檢者相比，觀察Ⅰ組受檢者抗ds-DNA抗體的陽性檢出率、抗Sm抗體的陽性檢出率均更高，P＜0.05。詳情見表1。

表1 三組受檢者抗ds-DNA抗體的陽性檢出率、抗Sm抗體的陽性檢出率的比較[n(%)]

2.2 三組受檢者補體C3的水平、補體C4水平的比較

觀察Ⅱ組受檢者與對照組受檢者補體C3的水平、補體C4的水平相比，P＞0.05。與對照組受檢者、觀察Ⅱ組受檢者相比，觀察Ⅰ組受檢者補體C3的水平、補體C4的水平均更低，P＜0.05。詳情見表2。

表2 三組受檢者補體C3的水平、補體C4水平的比較(g/L ，)

表2 三組受檢者補體C3的水平、補體C4水平的比較(g/L ，)

注：*與觀察Ⅱ組相比，P＜0.05；t1值、P1值表示觀察Ⅰ組與對照組相比；t2值、P2值表示觀察Ⅱ組與對照組相比。

指標 觀察Ⅰ組 觀察Ⅱ組 對照組 t1值 P1值 t2值 P2值例數 43 43 43補體C3的水平 0.61±0.15* 0.88±0.09 0.94±0.18 9.236 0.001 1.955 0.054補體C4水平 0.26±0.05* 0.86±0.11 0.92±0.17 24.424 0.001 1.943 0.055

3 討論

系統性紅斑狼瘡是臨床上常見的一種全身性疾病。有學者認為，此病的病因多與環境因素、遺傳因素及體內的激素分泌因素等有關。此病患者以出現發熱、出現蝶形紅斑、關節疼痛及體重下降等為主要的臨床表現[5]。按照其病程的進展可將此病患者分為早期系統性紅斑狼瘡患者和晚期系統性紅斑狼瘡患者。早期系統性紅斑狼瘡患者的臨床癥狀可自行消退，數月后便可消失。晚期系統性紅斑狼瘡多會累及患者的皮膚黏膜、肌肉、骨骼及中樞神經系統等，嚴重的還會累及其心、肺、腎等其他的臟器組織。對此病患者進行抗ds-DNA抗體、抗Sm抗體檢測是診斷其是否患有系統性紅斑狼瘡的主要方法。抗ds-DNA抗體、抗Sm抗體是臨床上公認的系統性紅斑狼瘡患者發生病變的標志性抗體。系統性紅斑狼瘡患者體內抗ds-DNA抗體的滴度越高，表示其腎臟的受損程度及其系統性紅斑狼瘡的病情越嚴重。系統性紅斑狼瘡患者體內抗Sm抗體的滴度與其病情是否處于活動期無關。檢測患者的抗Sm抗體只可輔助診斷其是否患有系統性紅斑狼瘡。為了提高對系統性紅斑狼瘡患者的病情進行診斷的確診率、明確其病情的分期，可對患者體內補體C3的水平、補體C4的水平進行檢測。健康人體內補體C3的水平、補體C4的水平均在0.8～1.2 g/L之間。系統性紅斑狼瘡患者在發病初期，其體內補體C3的水平、補體C4的水平幾乎不會發生改變。當患者的病情惡化后，其體內補體C3的水平、補體C4的水平會急速下降，且其回升的速度較慢。在患者的病情得到有效的緩解和控制后，其體內補體C3的水平、補體C4的水平會逐漸升高，直至恢復至正常水平。因此，可通過檢測患者體內補體C3的水平、補體C4的水平明確其病情的分期情況。本次研究的結果顯示，聯用酶聯免疫法、免疫熒光法和散射比濁法檢測不同時期系統性紅斑狼瘡的效果顯著。