蒙藥肉蓯蓉提取物穩定性研究△

閆 暾 齊海平 常欣榮 李 佳 張佳宇 張春紅,*

(1.包頭醫學院，內蒙古 包頭 014040；2.內蒙古眾維實業有限責任公司，內蒙古 呼和浩特 010110)

肉蓯蓉，蒙藥名查干高要，為列當科植物肉蓯蓉Cistnche decerticola Y.C. Ma的干燥帶鱗狀皮的肉質莖，主要寄生在荒漠植物梭梭和紅柳的根部，肉質莖肥厚，所以稱為肉蓯蓉[1]，多于春季苗未出土或出土時采挖，除去花序，切段，曬干。性味甘、酸、咸，溫，能清希拉、消食、補虛。用于希拉引起頭痛、胃酸、吐酸水、陽痿、遺精。

現代藥理研究表明, 肉蓯蓉具有補腎、益精、活血、通便、增加免疫力、增強記憶力的功效[2-4]。主產于新疆、甘肅、內蒙古、寧夏等地，素有“沙漠人參”之美譽，具有極高的藥用價值，為古代的歷史上就是向朝廷進貢的珍品。肉蓯蓉作為藥食兩用的植物，功效確切、無毒性作用[5]，在藥物及保健食品開發中均有很高的價值。但對于肉蓯蓉穩定的研究，目前較少，因此，本研究對不同因素對肉蓯蓉提取物的穩定性的影響進行研究，為其今后的產品開發提供有價值的參考數據。

1 儀器與試劑

1.1 儀器 數顯恒溫水浴鍋(北京市永光明醫療儀器廠)；BT25S型微量電子分析天平(十萬分之一，賽多利斯科學儀器有限公司)、UV-1780型紫外-可見分光光度計(島津儀器有限公司)、20-200ul移液槍(大龍興創實驗儀器有限公司)、移液管、容量瓶、EP管。

1.2 試劑 磷酸氫二鈉(天津市津北精細化有限公司、分析純)、無水檸檬酸(天津市凱信化學工業有限公司、分析純)、蒸餾水、松果菊苷對照品(普天同創生物科技有限公司20171207)。

1.3 藥材 荒漠肉蓯蓉，由內蒙古眾維實業有限責任公司提供，由包頭醫學院李旻輝教授鑒定為肉蓯蓉Cistanche deserticola Y. C. Ma的干燥莖。

2 肉蓯蓉提取物穩定性研究

2.1 肉蓯蓉提取物的制備 肉蓯蓉開水煮沸5min，浸泡過夜軟化切成2mm～3mm的薄片，加入10倍量蒸餾水，加熱回流提取2h，提取3次，合并濾液，濃縮濾液至濃度為1g/mL，取部分稀釋至0.5 g/mL和0.25 g/mL。

2.2 肉蓯蓉提取物中苯乙醇苷含量測定[6]

2.2.1 最大吸收波長的確定 以蒸餾水為參比液，在200～600 nm波長范圍內測定肉蓯蓉提取物溶液的紫外吸收情況，在330nm處，提取物有最大吸收，確定330nm為測定波長。

2.2.2 對照品溶液的配制精密稱取松果菊苷標準品0.0020g，加水溶解轉移到10mL容量瓶中，加水至刻度，搖勻，配置成濃度為0.2mg/mL的松果菊苷對照品溶液備用。

2.2.3 精密度試驗 精密吸取對照品溶液0.2mL用水定容至5mL，330nm波長下測定5次，RSD為0.26%，表明儀器精密度良好。

2.2.4 重復性實驗 精密量取“2.1”項下的提取液0.1mL共3份，蒸餾水稀釋至50mL，在波長330nm處測定其吸光度，RSD值為1.25%。

2.2.5 穩定性實驗 精密量取“2.1”項下的提取液0.1mL，蒸餾水稀釋至50mL，分別在0，2，4，6，8h測定其吸光度， RSD為0.42%，表明樣品在8h內穩定。

2.2.6 加樣回收率 精密量取已知松果菊苷含量的肉蓯蓉提取物3份，分別精密加入松果菊苷對照品配置成濃度為中高低的供試品溶液測得加樣回收率為99.1%。

2.2.7 線性關系考察 精密吸取對照品儲備液5mL用蒸餾水稀釋使成0.00625mg/mL、0.0125mg/mL、0.025mg/mL、0.05mg/mL、0.1mg/mL，在330nm處進行測定，得回歸方程是y=3.1148x-0.0716(R2=0.9991)。

2.3 pH對荒漠肉蓯蓉提取物穩定性的影響

2.3.1 檸檬酸-磷酸氫二鈉的緩沖溶液的配制 取0.96克檸檬于50ML容量瓶中用蒸餾水稀釋至刻度，取磷酸氫二鈉3.6克于50mL容量瓶中用蒸餾水稀釋至刻度線。分別取不同體積的檸檬酸溶液與磷酸氫二鈉溶液混合，配制成pH為2.0、5.0、6.0、7.0、8.0的緩沖溶液。

2.3.2 取“2.1”中0.5g/mL的肉蓯蓉提取物與緩沖液以1:1混合，所得混合液pH值分別為4.10、5.12、6.05、7.00、7.13。將所得混合液灌裝入滅菌EP管，密封放置，測定第0、2、4、6、8、12、13、15d樣品中苯乙醇苷含量。結果見圖1

2.4 溫度對荒漠肉蓯蓉提取物穩定性的影響 取6份“2.1”項下0.5g/mL提取液分別置于5mL EP管中，分別置于室溫、50℃、60℃、70℃、80℃、90℃在0h、1h、2h、3h、4h、6h、8h測定樣品中苯乙醇苷含量，結果見圖2。

2.5 放置時間對荒漠肉蓯蓉提取物穩定性的影響 取“2.1”項下不同濃度提取物1g/mL、0.5g/mL、0.25g/mL，分別灌裝入滅菌EP管中，于第0d、5d、10d、15d、20d、30d進行取樣，測定其中苯乙醇苷含量，結果見圖3。

2.6 光線對荒漠肉蓯蓉提取物穩定性的影響 取“2.1”項下提取物(0.5g/mL)，灌裝于滅菌EP管中，一批置于自然光照處，另一批避光保存。于第0d、5d、10d、15d、20d、30d進行取樣，測定其中苯乙醇苷含量，結果見圖4。

3 結果及結論

通過研究結果可以發現，荒漠肉蓯蓉提取物在較高溫度(50℃～90℃)下表現出很好的穩定性，在此溫度下8h，苯乙醇苷含量變化較小。在光照及避光條件下，提取物常溫放置15d，主要成分含量均未表現出明顯變化。不同濃度提取物(1g/mL、0.5 g/mL、0.25 g/mL)在常溫放置30d過程中，苯乙醇苷含量未出現明顯變化。在不同pH條件下，提取物中苯乙醇苷含量變化較大，均呈現出下降趨勢，pH值越低，苯乙醇苷含量下降越快，表明肉蓯蓉提取物對pH變化較為敏感，易受此因素的影響。

4 討論

現代藥理研究表明，肉蓯蓉有潤腸通便、保肝、抗骨質疏松、抗氧化、抗衰老、抗疲勞等作用[7]。其中起主要作用的一類成分便是苯乙醇苷類物質，國內外很多學者對此類成分的藥理作用進行了研究，主要集中在苯乙醇總苷、松果菊苷、毛蕊花糖苷的藥理作用上，研究表明此類成分具有抗衰老、提高記憶力、調節免疫、改善性功能、防止肝損傷等作用[8]，因此研究肉蓯蓉提取物中此類成分的穩定性對今后肉蓯蓉類產品開發具有重要意義。

通過本研究發現，肉蓯蓉提取的穩定性受到pH影響較大，而且隨著pH的降低，其降解速度加快，與文獻中苷類在酸性環境下水解快，在中性和堿性下水解相對較慢相一致[9]。此外，賈寶國[10]的研究表明，在有Cu2+、Fe3+存在的情況下，肉蓯蓉中苯乙醇苷的降解速度也會增加。因此，在進行肉蓯蓉提取或產品加工過程中避免廣義酸堿的添加及金屬離子的引入，可增加藥物的穩定性，提高產品開發的成功率。