平菇母種培養(yǎng)基優(yōu)化試驗

張玉萍 王 芳 孟麗君 陳 雨 尉敬濤 王 欣 史興海

（1. 山西省生物研究所，山西 太原 030006；2. 山西省農(nóng)業(yè)科學院作物科學研究所，山西 太原 030031）

平菇是山西省食用菌主栽品種之一。山西省地處華北西部的黃土高原地帶，屬于暖溫帶、中溫帶大陸性氣候，夏季炎熱多雨，立秋之后，晝夜溫差大，平菇出菇變得可行，一直到第二年春季，都是平菇鮮菇的盛產(chǎn)期。立秋時節(jié)倒推 60天是平菇制作母種的高峰期，母種質(zhì)量的優(yōu)劣直接影響原種和栽培種的質(zhì)量[1]，因而獲得優(yōu)質(zhì)母種至關(guān)重要。筆者根據(jù)多年的制種經(jīng)驗，將成熟原種的培養(yǎng)基煮汁添加到加富 PDA培養(yǎng)基中，取得良好效果。現(xiàn)總結(jié)報道如下。

1 試驗方法

1.1 供試菌株

平菇早秋615、玉專2號、南京1號、科大雜優(yōu)、早秋 509，均為山西省生物研究所食用菌研究室保存。

1.2 母種培養(yǎng)基配方

PDAP培養(yǎng)基（對照組）：馬鈴薯（去皮）200 g，葡萄糖20 g，瓊脂粉18 g，蛋白胨2 g，水1 000 mL。

PDAP加富培養(yǎng)基（試驗組）：馬鈴薯（去皮）200 g，葡萄糖20 g，瓊脂粉18 g，蛋白胨2 g，原種培養(yǎng)基200 g，水1 000 mL。其中，原種培養(yǎng)基配方為：棉籽殼 84.9%，麩皮 10%，白砂糖 2%，石膏粉2%，磷肥1%，尿素0.1%。

1.3 培養(yǎng)基的制備

（1）PDAP培養(yǎng)基。將馬鈴薯洗凈去皮，切成約1 cm3的小塊，稱取200 g加水1 000 mL，加熱煮沸20～30 min至熟而不爛。用4層紗布過濾取濾液，向其中加入瓊脂粉18 g及經(jīng)溫水溶解的2 g蛋白胨，用文火加熱，并不斷用玻璃棒攪拌，直至瓊脂全部溶化。加入葡萄糖 20 g，加蒸餾水定容至1000 mL。采用 30×200（mm）試管分裝，無棉蓋體試管塞塞口，7支一組，外用牛皮紙包好，棉線繩扎緊，放于高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)。120 ℃恒溫高壓（1.0～1.2 kg/cm2）滅菌30 min，在潔凈的培養(yǎng)間內(nèi)擺好斜面，冷卻備用。

（2）PDAP加富培養(yǎng)基。在煮馬鈴薯的同時將200 g原種培養(yǎng)基用兩層紗布包裹后放入容器內(nèi)煮汁。其他操作同上。

1.4 接種培養(yǎng)

將5個菌株的母種在無菌條件下接種于PDAP培養(yǎng)基試管斜面上，每個菌株接種3支試管，22～25 ℃培養(yǎng)5天。5天后選取生長狀況良好的活化菌株，分別轉(zhuǎn)接到PDAP培養(yǎng)基和PDAP加富培養(yǎng)基試管中，每個品種每種培養(yǎng)基轉(zhuǎn)接5支，3次重復(fù)。22～25 ℃避光培養(yǎng)。

1.5 測量與統(tǒng)計

母種接種3天后開始定時觀察記錄各母種菌絲的生長情況。①菌絲長勢：觀察菌絲濃密度。②菌絲長速：菌絲平均生長速度，每3天劃線并測量，重復(fù)3次取平均值，計算平均生長速率（mm/d）。③均一性：各管之間的生長速度是否一致。利用Spss21.0數(shù)據(jù)分析軟件，對數(shù)據(jù)進行整理，對比其平均值大小，初步判斷對照組與試驗組數(shù)據(jù)的差別。為了進一步確定檢驗試驗組與對照組數(shù)據(jù)之間的顯著差異性，進行獨立樣本t檢驗。以各組數(shù)據(jù)的標準差，來說明菌絲生長的均一性高低。

2 結(jié)果與分析

2.1 菌絲的長勢

圖1為5個平菇菌株在兩種培養(yǎng)基上生長中期的菌絲生長狀況。可以看出，試驗組（T）PDAP加富培養(yǎng)基的菌絲長勢較對照組（C）PDAP培養(yǎng)基的菌絲長勢旺盛、濃密，菌絲呈明顯的波浪狀。

2.2 菌絲的生長速度

由表1可以看出，5個平菇菌株在試驗組（T）加富培養(yǎng)基上的菌絲生長速度均大于對照組（C）。經(jīng)數(shù)據(jù)分析軟件 spss21.0對數(shù)據(jù)進行的獨立樣本 t檢驗結(jié)果（表2），早秋615、玉專2號和科大雜優(yōu)Sig.值小于0.05，試驗組（T）PDAP加富培養(yǎng)基中的菌絲生長速度顯著快于對照組（C）PDAP培養(yǎng)基中的菌絲生長速度。南京1號和早秋509的Sig.值大于0.05，兩種培養(yǎng)基的菌絲長速無顯著差異。

表1 不同菌株在不同培養(yǎng)基上菌絲生長速度（單位：cm/d）

2.3 菌絲生長速度的均一性

表1中，各平菇菌株的菌絲生長速度用其平均值加減標準差來表示，標準差是樣本數(shù)據(jù)方差的平方根，用以衡量樣本數(shù)據(jù)的離散程度，數(shù)據(jù)越大說明樣本數(shù)據(jù)的離散程度越大，均一性越小[2]。由表1可以看出，對照組（C）5個菌株的菌絲生長速度標準差均大于試驗組（T），如早秋 615，C0.471＞T0.143，表明試驗組加富培養(yǎng)基菌絲生長速度的均一性高于對照組。

圖1 5個平菇菌株在兩種母種培養(yǎng)基上的生長情況

表2 不同平菇菌株在不同培養(yǎng)基上菌絲生長速度的獨立樣本檢驗

3 討 論

本試驗從菌絲的長勢、生長速度和均一性3個方面研究5個受市場歡迎的廣溫型深色硬柄平菇菌株在2種不同培養(yǎng)基上的菌絲生長情況：各菌株菌絲在PDAP加富培養(yǎng)基上表現(xiàn)出明顯的生長優(yōu)勢，菌絲生長旺盛，呈波浪狀，菌落邊緣整齊；生長速度均快于對照組，其中早秋615、玉專2號和科大雜優(yōu)3個菌株生長速度顯著快于對照組；且各菌株在PDAP加富培養(yǎng)基菌絲生長的均一性均高于對照組培養(yǎng)基。試驗結(jié)果表明，PDAP加富培養(yǎng)基可作為廣溫型深色硬柄平菇母種的優(yōu)選培養(yǎng)基。