老年2型糖尿病腎病患者尿液足細胞 血清胱抑素C 血清同型半胱氨酸水平與腎功能的相關性

馬建和 孫繼云

糖尿病是一種最常見的代謝疾病，其主要臨床特征為血糖水平升高，患者因長期高血糖狀態而多并發微小血管病變，進而引起眼底、肺部等部位病變[1-2]。2型糖尿病發病隱匿，患者多因合并其他并發癥而入院就診，糖尿病腎病作為2型糖尿病的一種重要并發癥，預后不佳[3-5]。因此，有效的早期診斷指標對糖尿病腎病患者早期診斷、干預，降低糖尿病腎病患者腎病的發生和進展具有重要意義。近年來有文獻[6-7]報道，老年糖尿病患者尿液足細胞水平、血清胱抑素C(serum cystatin C ，Cys C)、 血清同型半胱氨酸(serum homocysteine ，Hcy)水平異常。足細胞是腎小球濾過屏障的重要組成部分，尿液足細胞水平是腎功能的有效評估指標，但關于尿液足細胞計數水平異常與腎功能相關性的研究報道較少。本研究就老年糖尿病患者尿液足細胞、血清Cys C、Hcy水平與腎功能的相關性及其相關強度展開分析，旨在為2型糖尿病腎病腎損害的診斷和治療提供科學依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取首都醫科大學附屬地壇醫院2015年6月至2017年6月收治的98例老年2型糖尿病腎病患者為觀察組，納入標準：①患者診斷均符合中華醫學會糖尿病學分會制定的糖尿病腎病診斷標準[8-9]；②無合并嚴重的肝臟、肺等實質性組織臟器疾病，心腦血管指標檢查未見明顯異常。排除標準：①1型糖尿病的患者[10]；②合并嚴重并發癥的患者；③合并嚴重免疫系統、循環系統疾病或惡性腫瘤者；④伴有肺結核、艾滋病等傳染性疾病的患者。98例2型糖尿病腎病患者Mogensen臨床分期[11]：Ⅰ期10例，Ⅱ期23例，Ⅲ期35例、Ⅳ期25例，Ⅴ期5例。選取同期于我院體檢，且無糖尿病、腎臟疾病的老年患者98例為對照組。兩組患者年齡均>60歲，觀察組患者年齡為60～78歲，對照組患者年齡為61～79歲。兩組患者在性別、年齡等一般資料比較,差異均無統計學意義(P>0.05)，具可比性。詳見表1。本次試驗經本院倫理委員會批準進行。

表1 兩組患者一般資料比較

1.2 方法 檢測并比較兩組患者尿足細胞、Cys-c、 Hcy水平以及腎功能指標：肌酐(creatinine, Cr)、尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)、β2微球蛋白(β2-microglobulin, β2-MG)、尿酸(urine acid, UA)。采用Pearson相關性分析尿足細胞、血清Cys-c、血清Hcy水平與腎功能指標的相關性。所有數據均由2名醫務工作人員整理并核對。

1.3 檢測方法 觀察組患者均于清晨抽取空腹肘靜脈血3.0 mL，對照組于體檢當天取空腹肘靜脈血3.0 mL，轉速為3 000 r/min，離心半徑為10 cm，離心時間為10 min，離心完成后取血清樣品于-70℃冰箱中保存待檢測。所有患者留取100 mL晨尿,將其置細胞涂片離心機制成尿液涂片,將涂片采用小鼠單克隆抗人足細胞標記蛋白-podocalyxin(PCX)抗體進行間接免疫熒光染色，在200倍藍光激發顯微鏡下綠色熒光染色圓形或橢圓形數為足細胞數，觀察上、下、左、右、中 5 個部位 20 個高倍視野下尿足細胞數量并記錄，取其平均值即為每個研究對象尿沉渣細胞涂片尿足細胞數量。采用乳膠增強免疫比濁法檢測血清Cys-c水平。采用循環酶法檢測患者血清同型半胱氨酸Hcy平，試劑盒采用上海基免實業有限公司提供的人Hcy檢測試劑盒；使用AU400全自動生化分析儀檢測腎功能指標：Cr、BUN、β2-MG、UA。

2 結果

2.1 兩組患者尿液足細胞、血清Cys C、Hcy水平比較 觀察組患者尿液足細胞、血清Cys C、Hcy水平均高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。詳見表2。

2.2 兩組患者腎功能水平比較 觀察組患者腎功能指標：Cr、BUN、β 2-MG、UA均高于對照組患者，差異均有統計學意義(P<0.05)。詳見表3。

表2 兩組患者尿液足細胞、血清Cys C、Hcy水平比較

注：Cys C為血清胱抑素C;Hcy為血清同型半胱氨酸

表3 兩組患者腎功能水平比較

注： Cr為血清肌酐，BUN為血清尿素氮，β2-MG 為血清β2微球蛋白，UA為血清尿酸。

2.3 尿液足細胞水平與腎功能指標相關性分析 以觀察組受試對象為單位，采用簡單散點圖擬合尿液足細胞水平與4項腎功能指標：(Cr、BUN、β2-MG、UA)的線性關系，并通過Pearson雙變量相關性分析結果顯示,尿液足細胞水平與Cr(r=0.732,P=0.001)、BUN(r=0.680,P=0.004)、β2-MG(r=0.652,P=0.010)、UA(r=0.757,P<0.001)均呈正相關。詳見圖1。

圖1 尿液足細胞水平與腎功能指標水平散點圖

注：1a為尿液足細胞水平與肌酐水平散點分布圖；1b為尿液足細胞水平與尿素氮水平散點分布圖；1c為尿液足細胞水平與β2微球蛋白水平散點分布圖；1d為尿液足細胞水平與尿酸水平散點分布圖

2.4 血清Cys C水平與腎功能指標相關性分析 以觀察組受試對象為單位，采用簡單散點圖擬合血清Cys C水平與4項腎功能指標：(Cr、BUN、β2-MG、UA)的線性關系，并通過Pearson雙變量相關性分析結果顯示，血清Cys C水平與Cr(r=0.757,P<0.001)、BUN(r=0.721,P=0.001)、β2-MG(r=0.674,P=0.003)、UA(r=0.781,P<0.001)均呈正相關。詳見圖2。

圖2 血清Cys C水平與腎功能指標水平散點圖

注：2a 為血清Cys C水平與肌酐水平散點分布圖；2b 為血清Cys C水平與尿素氮水平散點分布圖；2c為血清Cys C水平與β2微球蛋白水平散點分布圖；2d為血清Cys C水平與尿酸水平散點分布圖

2.5 血清Hcy水平與腎功能指標相關性分析 以觀察組受試對象為單位，采用簡單散點圖擬合血清Hcy水平與4項腎功能指標：(Cr、BUN、β2-MG、UA)的線性關系，并通過Pearson雙變量相關性分析結果顯示,血清Hcy水平與Cr(r=0.703,P=0.001)、BUN(r=0.711,P=0.004)、β2-MG(r=0.679,P=0.013)、UA(r=0.736,P<0.001)均呈正相關(r>0，P<0.05)。詳見圖3。

圖3 血清Hcy水平與腎功能指標水平散點圖

注：3a 血清Hcy水平與肌酐水平散點分布圖；3b 血清Hcy水平與尿素氮水平散點分布圖；3c血清Hcy水平與β2微球蛋白水平散點分布圖；3d血清Hcy水平與尿酸水平散點分布圖

3 討論

2型糖尿病患者血糖水平持續增高可引起血液微環境改變，其中脂代謝紊亂系最常見的一種繼發血液微環境改變[12-13]。糖尿病患者循環系統高糖和高脂狀態可導致血液粘滯度增加，大量免疫球蛋白和纖維蛋白原等在腎小球血管內膜下不斷沉積，進而導致腎小球小動脈血管壁結構改變，彈性下降，最終導致腎小球血流動力學發生改變[14-16]。糖尿病腎病患者腎小球結構改變后腎素-血管緊張素-醛固酮系統和激活血小板和凝血過程激活，進而引起尿酸鹽結晶沉積于血管壁，損傷血管內膜，并引起多種心血管相關疾病，預后不佳[17-19]。目前尚缺失糖尿病腎病腎功能影響因素的研究。

本研究發現，觀察組患者的尿液足細胞、血清Cys C、Hcy水平均顯著高于對照組，且各腎功能指標Cr、BUN、β 2-MG、UA均顯著升高(P<0.05)，分析其原因是腎小球發生病變時：①足細胞密度降低，對清蛋白等的濾過功能減弱，因而患者可出現蛋白尿，足細胞可脫落并隨尿液被排出體外；②Cys C經腎小球濾過并由腎小管上皮細胞重吸收率下降，進而導致血清Cys C水平升高；③糖尿病腎病患者由于腎臟功能障礙激活腎素-血管緊張素-醛固酮系統和激活血小板和凝血過程，患者血管損傷風險增加，當血管損傷后瘢痕修復并進展為粥樣硬化的過程中，患者血清Hcy水平則相應增高；④Cr、BUN、β2-MG、UA均由腎臟濾過重吸收，當腎臟發生損傷時其重吸收率降低，進而導致水平升高。

龔江等[20]的研究表明，血清Cys C、Hcy 對2 型糖尿病腎病早期診斷治療和預后評估有重要的臨床意義；董閃閃等[21]的研究報道表明，尿液足細胞與糖尿病腎病患者機體氧化應激水平相關，2型糖尿病合并不同程度腎臟功能障礙患者尿液足細胞水平存在顯著差異，與本研究結果相符，但2項研究均未對異常指標腎臟功能指標的相關性進行分析。本次研究通過對尿液足細胞、血清Cys C、Hcy水平分別于糖尿病腎病患者Cr、BUN、β2-MG、UA水平進行相關性分析顯示，尿液足細胞、血清Cys C、Hcy水平分別與Cr、BUN、β2-MG、UA均呈正相關，分析其原因主要是尿液足細胞、血清Cys C、Hcy水平均與腎臟濾過功能有關。

綜上所述，老年糖尿病腎病患者尿液足細胞、血清Cys C、Hcy水平與腎功能的相關性顯著，且各指標水平間呈明顯的正相關。