雙歧三聯活菌膠囊輔助常規治療潰瘍性結腸炎的可行性研究

田 進 王曉鳳

深圳市坪山區人民醫院，廣東深圳 518118

潰瘍性結腸炎（ulcerative colitis，UC）作為消化道疾病中常見的疑難病，主要是累及直腸、乙狀結腸的黏膜、黏膜下層的慢性非特異性炎癥[1]。該病發病率較高，多集中在25～50歲發病，我國UC的發病率約為11.6/10萬人[2]，導致UC的原因主要有環境因素、心理因素、遺傳因素及腸道菌群的綜合作用，可啟動腸道免疫及非免疫系統，促進機體產生免疫反應，導致腸道發生炎癥，UC臨床病程較長，遷延不愈，嚴重影響患者的生活質量。目前治療方法主要采取藥物治療，包括氨基水楊酸類制劑、糖皮質激素與免疫抑制劑，但上述藥品不良反應較重，且給患者帶來較大的經濟負擔，導致患者依從性差[3]。益生菌作為新型微生態制劑，運用到UC治療中不僅耐受性好，而且不良反應低，改善臨床癥狀效果明顯，患者依從性好[4]。雙歧三聯活菌膠囊由長型雙歧桿菌、保加利亞乳桿菌、噬熱鏈球菌組成，在改善UC患者腸道內菌群平衡具有較好的效果。本研究通過設計前瞻性對照試驗觀察微生態制劑雙歧三聯活菌膠囊輔助治療UC，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2016年1月～2018年1月收治的潰瘍性結腸炎患者共198例，納入標準：（1）患者滿足潰瘍性結腸炎診斷標準[5]。（2）病情處于活動期。（3）UC病情為輕度、中度。（4）納入研究前三個月內未接受過糖皮質激素、免疫性制劑、細胞毒等藥物治療。排除標準：（1）UC病情為重度。（2）UC臨床分型為急性暴發型。（3）孕婦或哺乳期婦女。（4）依從性差或患有精神疾病者。（5）不愿簽署研究知情同意書的患者。本研究獲得醫院倫理委員會同意，患者及家屬簽訂研究知情同意書。將所有患者按照隨機數表法分為對照組與觀察組，對照組98例，男52例，女46例，年齡32～54周歲，平均（43.2±9.8）周歲，平均病程（2.01±0.78）年，病情輕度63例，中度35例。觀察組100例，男58例，女42例，年齡30～56周歲，平均（44.2±9.1）周歲，平均病程（2.04±0.76）年，病情輕度71例，中度29例。兩組患者一般資料性別、年齡、病程等差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 治療方法

對照組患者接受潰瘍性結腸炎常規治療與護理，口服抗生素、5-氨基水楊酸類制劑：奧沙拉嗪鈉膠囊（浙江華潤三九眾益制藥股份有限公司，H20010061，0.25g×24粒），1.0g/次，口服，1 次 /d，治療周期為6個月。觀察組在對照組治療基礎上給與雙歧三聯活菌膠囊治療，具體方法為：雙歧三聯活菌膠囊（上海上藥信誼藥廠有限公司，S10950032，0.21g×30粒），0.84g/次，2次 /d，口服，治療周期為6個月。

1.3 觀察指標

比較兩組患者UC治療效果、治療前后潰瘍性結腸炎結腸炎癥積分、CD4、CD25調節性T細胞占CD4 T細胞比例及IL-10水平。

UC治療效果結合患者臨床癥狀、內鏡下黏膜情況分為[6]（1）痊愈：患者臨床癥狀、體征完全消失，內鏡下可見病變黏膜恢復正常。（2）顯效：患者臨床癥狀、體征基本消失，在內鏡下可見病變黏膜部分恢復正常，或病變程度減輕。（3）無效：患者臨床癥狀、體征未消失，或出現加重的情況，內鏡下可見黏膜病變程度加重。總有效率=（痊愈例數+顯效例數）/總例數×100%。

結腸炎癥積分評判標準由兩位病理學檢驗人員對6塊活組織進行雙盲評定，在3個高倍鏡觀察下取平均值，分為：0分，顯微鏡下黏膜完全正常；1分：顯微鏡下上皮或黏膜下出現輕微的炎性滲出、水腫或糜爛；2分：顯微鏡下1分的區域超過50%；3分：顯微鏡下可見潰瘍深達黏膜肌層或黏膜下肌層，可見以中性粒細胞為主的炎性滲出[6]。CD4、CD25測定采用密度梯度離心法，將外周血單個核細胞進行分離，加入抗人CD4-FITC與CD25-APC，在空白對照管內加入同等量的FITC與APC標記過的Ig-G，在4℃低溫下保存30min，將未結合的抗體洗去后加入破膜固定劑，1h后加入PBS溶液，使用流式細胞儀測定CD4、CD25占調節性T細胞比例。IL-10測定采取ELISA法，抽取清晨空腹靜脈血5mL，-20℃保存后使用IL-10單克隆抗體試劑盒進行檢測。

1.4 統計學處理

本研究采取SPSS23.0軟件分析，計量資料采用（x±s）表示，符合正態分布的獨立資料采用t檢驗，計數資料以百分比表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組治療效果及結腸炎癥積分比較

觀察組治療總有效率為84.00%，明顯高于對照組治療總有效率74.49%，差異有統計學意義（P＜0.05）。兩組患者治療前結腸炎癥積分比較，差異無統計學意義（P＞0.05），治療后觀察組結腸炎癥積分明顯低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組治療效果及結腸炎癥積分比較

表2 兩組治療前后CD4、CD25、占調節性 T細胞比例及IL-10水平比較（± s）

表2 兩組治療前后CD4、CD25、占調節性 T細胞比例及IL-10水平比較（± s）

組別 CD4/CD25 CD4、CD25占調節性T細胞比例 IL-10（ng/L）治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后對照組（n=98） 35.32±4.08 33.01±3.98 5.56±0.85 6.69±0.91 15.32±1.88 16.02±1.79觀察組（n=100） 35.01±3.98 26.21±4.32 5.58±0.91 9.41±0.77 15.61±1.92 19.92±2.01 t 0.541 11.523 0.160 22.683 1.074 14.425 P＞0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＜0.05

2.2 兩組治療前后CD4/CD25、占調節性T細胞比例及IL-10水平比較

兩組患者治療前CD4/CD25、占調節性T細胞比例與IL-10比較差異無統計學意義（P＞0.05）。治療后，觀察組CD4/CD25水平明顯高于對照組，CD4、CD25占調節性T細胞比例明顯大于對照組，IL-10水平高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

3 討論

現代醫學對于潰瘍性結腸炎的發病機制研究的還不透徹，目前認為影響UC的因素主要有遺傳、環境、飲食、心理作用，此外腸道菌群可影響腸道免疫系統，導致腸道炎癥進一步加重[6]。研究表明[7]，雖然UC發病影響因素較多，但多具有關聯性，如精神心理因素可導致交感、副交感神經興奮，產生一系列免疫功能調節異常。關于UC治療方法除常規運用5-氨基水楊酸類制劑、糖皮質激素及細胞毒藥物外，微生態制劑逐漸被人們所重視。研究表明[7]，UC患者的腸道菌群處于失調狀態。微生態制劑除調節腸道菌群具有較好的效果外，不良反應也較少，患者經濟負擔小，依從性較好。

本研究主要對比觀察雙歧三聯活菌膠囊輔助治療UC的效果，結果發現，觀察組服用雙歧三聯活菌膠囊后UC治療總有效率為84.00%，明顯高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。雙歧三聯活菌膠囊主要由長型雙歧桿菌、保加利亞乳桿菌、噬熱鏈球菌組成，這三種菌群為重要的腸道益生菌，不僅能夠促進腸道內菌群平衡，還有利于維持腸道微生態內環境，可以有效阻止病原體的侵入[8-9]。本研究觀察組結腸炎癥積分治療后明顯低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），說明雙歧三聯活菌膠囊能減輕結腸黏膜炎癥水平，對UC患者結腸炎癥具有一定的緩解或治療作用。研究表明[10]，雙歧三聯活菌膠囊能有效降低UC患者臨床癥狀積分與結腸炎癥積分，與本研究結果一致。關于雙歧三聯活菌膠囊在UC中的藥理機制目前研究還較少，但對于奧沙拉嗪治療UC藥理機制較明確，即作為新型5-ASA衍生物，通過抑制前列腺素的合成，并增強細胞膜通透性，從而減輕或抑制炎癥反應[11]，但UC患者一旦停服奧沙拉嗪，病情就會反復，且長期服藥帶來的不良反應：腹瀉、軟便等，嚴重影響患者的生活質量[12]。所以輔助用藥就顯得尤為關鍵，本研究發現雙歧三聯活菌影響免疫系統主要通過影響CD4、CD25細胞，而這兩類免疫細胞具有免疫抑制性、免疫無能性兩大特征[13-14]，其作用于免疫系統是通過抑制免疫性T細胞活性，促進抑制性細胞因子例如IL-10、TGF-β的活性，從而起到抑制炎癥反應的作用[15]。本研究觀察組治療后CD4/CD25水平明顯高于對照組，占調節性T細胞比例明顯大于對照組，IL-10水平明顯低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），說明了雙歧三聯活菌膠囊對CD4、CD25的直接影響作用。目前認為[14-15]，CD4、CD25調節性T細胞的變化可能與腸道菌群有關，一方面CD4、CD25細胞是由于腸道在正常菌群產生的外源性抗原誘導產生，此外，腸道正常菌群可組織非成熟樹突狀細胞成熟，從而促進CD4、CD25調節性T細胞成熟，因此，正常菌群失調可導致CD4/CD25細胞比例發生變化[16-17]。

綜上所述，雙歧三聯活菌膠囊輔助運用于潰瘍性結腸炎的治療中，能有效提高治療效果，降低結腸炎癥積分，改善患者免疫功能，值得臨床運用。