HCT值實時修正全血CRP測定結果的評估

馬繼榮，周景藝，顧 怡，沈文艷，沈 薇

（上海交通大學醫學院附屬仁濟醫院檢驗科，上海 200127）

C反應蛋白（C-reactive protein，CRP）是一種急性時相反應蛋白，在機體受到感染或組織損傷時可急劇升高，是一種非特異性炎癥標志物。對CRP的研究已有近80年歷史，各臨床實驗室開展普遍，免疫比濁法為最常見的檢測方法。按標本選擇，有血清和全血2種模式，前者多在生化或免疫特定蛋白分析儀上開展，后者多用于門、急診檢測，快速簡便。全血模式檢測CRP，各廠商按照血細胞比容（hematocrit，HCT）40%左右進行換算，這種換算方法對正常人群（HCT為35%～45%）沒有太大影響，對異常標本應予以糾正[1-2]，但實際工作中往往難以做到。本研究擬評價采用HCT值實時修正全血CRP測定結果的價值。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2017年8月患者血常規標本222例，其中5例標本低于檢測限，統計時剔除，最后入組標本217例，其中37例HCT＜35%、128例HCT為35%～45%，52例HCT＞45%。部分血常規標本采取人工棄去部分血漿方式，以提高HCT結果準確性。

1.2 方法

1.2.1 標本采集與測定 采集患者4 mL靜脈血，乙二胺四乙酸二鉀抗凝，所有標本采集后2 h內完成全血模式下血常規和CRP檢測。標本經800×g離心15 min后，分離血漿，用BN Ⅱ特定蛋白分析儀（德國西門子公司）檢測CRP。

1.2.2 儀器及試劑 XN 2800血常規CRP流水線（日本希森美康公司），流水線包含2臺XN-B4全自動血液分析儀（日本希森美康公司）和1臺PA 990特定蛋白分析儀（深圳普門公司）。血常規試劑及CRP試劑（散射比濁法）均為原裝配套試劑。BN Ⅱ特定蛋白分析儀及配套CRP試劑盒（散射比濁法）。所有儀器在檢測標本前均進行了校準和性能驗證。

1.3 根據HCT值實時糾正CRP結果

在臨床上CRP濃度均是指該標本的血清CRP濃度值，為了與臨床上相統一，當使用全血標本進行檢測時，需要將其直接測得的結果（濃度值）進行換算，才能得到該標本的血清CRP濃度值。換算公式為：

式中C全血標本為全血標本測試時，經過HCT校正后的CRP濃度值；C直接測得為全血標本直接測試，在標準曲線中回歸計算得到的CRP濃度值；HCT真實為全血標本真實的HCT值。

當HCT固定為40%時，為了實時糾正CRP的結果，減少HCT對測試結果的影響，應對其結果進行實時修正，其修正公式為：

式中C修正后為全血標本測試時，經過真實的HCT校正后的CRP濃度值；C測得為全血標本測試，使用默認40%的HCT值得到的CRP濃度值；HCT真實為全血標本真實的HCT值。

1.4 統計學方法

采用SPSS 11.0軟件進行統計分析。以BN Ⅱ特定蛋白分析儀的測定結果為靶值進行比較分析。

2 結果

HCT＜35%，HCT為35%～45%和HCT＞45%的標本的不同分組間全血模式CRP結果用HCT固定40%和HCT實時糾正后，與血漿模式BNⅡ特定蛋白分析儀CRP結果的相關性見圖1～圖3。

HCT＜35%，HCT為35%～45%和HCT＞45%的標本的全血模式CRP結果用HCT固定40%與實時糾正之間結果的偏差比較見表1、表2。

圖1 HCT＜35%的標本用HCT糾正CRP前后與BN Ⅱ特定蛋白分析儀結果的比對

圖2 HCT為35%～45%的標本用HCT糾正CRP前后與BN Ⅱ特定蛋白分析儀結果的比對

圖3 HCT＞45%的標本用HCT糾正CRP前后與BN Ⅱ特定蛋白分析儀結果的比對

表1 HCT值最低和最高的標本CRP檢測結果的比較

表2 固定HCT為40%與HCT實時糾正之間CRP結果的比較

3 討論

CRP主要用于評估炎癥，在細菌性疾病以及心血管疾病診斷中有較為廣泛的應用。在門診和急診，CRP通常和血常規聯合檢測，用于快速鑒別診斷是細菌性炎癥還是病毒性炎癥，為治療提供依據。為了快速檢測，門診和急診CRP檢測一般使用乙二胺四乙酸抗凝全血，按HCT 40%左右進行換算，使之與特定蛋白儀上血清CRP結果間有可比性，但這種換算方法對HCT為35%～45%的標本基本可行，對HCT異常的標本應予以糾正[1-2]。眾所周知，門診和急診是檢驗科中對時間要求最嚴格的科室，為了方便，糾正CRP的工作難以開展。本研究使用的XN 2800血常規CRP流水線可利用HCT值對全血CRP測定結果進行實時糾正，理論上更為準確。

通過對217份標本進行分析，本研究發現HCT＜35%和＞45%的標本，通過利用HCT值實時糾正后的CRP結果與BN Ⅱ特定蛋白分析儀的相關性明顯提升；而HCT為35%～45%的標本，修正與否無明顯差異。對于HCT＜35%的37份標本，HCT未糾正的CRP結果與BN Ⅱ特定蛋白分析儀的相關方程為Y=1.191 9X+1.660 7（r2=0.9743）；HCT糾正后的相關方程為Y=1.047 9X+0.224 9（r2=0.982 6）。對于HCT為35%～45%的128份標本，HCT未糾正的CRP結果與BN Ⅱ特定蛋白分析儀的相關方程為Y=1.152 7X-1.880 8（r2=0.985 7）；HCT糾正后的相關方程為Y=1.132 7X-1.288 2（r2=0.983）。對于HCT＞45%的52份標本，HCT未糾正的CRP結果與BN Ⅱ特定蛋白分析儀相關方程為Y=0.580 7X+5.740 4（r2=0.949 8）；HCT糾正后的相關方程為Y=0.900 0X+2.839 1（r2=0.984 2）。同時對3個組的CRP結果與BN Ⅱ特定蛋白分析儀CRP結果之間的偏差進行分析，結果顯示HCT＜35%的標本，糾正后平均偏差從11.77 mg/L減少為2.75 mg/ L；HCT＞45%的標本，糾正后的平均偏差從-11.84 mg/L減少到-1.35 mg/L，糾正前后數據比較差異有統計學意義（P＜0.01）。顯而易見，利用HCT值糾正CRP能提高結果準確性。

當然，僅從相關性比較，雖然糾正后的相關性有所提高，但分析糾正前固定HCT為40%的CRP結果與BN Ⅱ特定蛋白分析儀之間的相關性，HCT＜35%和＞45%的標本r2值分別達到了0.974 3和0.949 8，也能基本滿足臨床需求，因此我們重點關注了HCT最低和最高的標本，對于HCT降低的標本，偏差大小與HCT值降低呈負相關，對HCT升高的標本，偏差大小與HCT值降低呈正相關。可見這些極端標本使用未糾正結果偏差很大，甚至影響到臨床治療，提醒無論有沒有全自動儀器，檢驗人員一定要有充分認識，予以糾正。

綜上所述，本研究通過流水線將血常規與CRP檢測整合，證實了利用HCT值糾正CRP結果與BN Ⅱ特定蛋白分析儀的CRP結果有很好的符合性，尤其對HCT特別低或特別高的標本有比較高的應用價值。