不同醇溶劑對油茶籽粕中茶皂素提取率對比

◎ 肖 涵，陳海燕

（1.吉林農業大學食品科學與工程學院，吉林 長春 130118；2.長春科技學院，吉林 長春 130600）

茶皂素是山茶科山茶屬植物中皂素的統稱，廣泛存在于各種茶類植物的根、莖、葉、花和果實中[1]，具有皂苷的一般通性，味苦、辛辣、發泡力強，易溶于含水甲醇、含水乙醇、丁醇、戊醇、冰醋酸和醋酸等[2]。茶皂素具有抗滲消炎、殺菌抗病毒、溶血活性、解酒毒、抗氧化、降血脂以及促進植物生長等作用，作為一種天然非離子型表面活性劑，具有洗滌、去污、發泡和乳化等用途。味苦有毒的茶籽餅粕，主要用于肥料、燃料、清塘劑等，資源未能得到有效利用[3]，茶籽果實提取完茶油之后的茶皂素含量可以達到12%。本文利用茶皂素可溶于醇的性質，運用醇提法進行油茶籽粕中茶皂素的提取，并對比不同醇溶劑、不同醇濃度對于茶皂素提取率的影響，以期為油茶籽粕的醇提技術提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

油茶籽粕，購于廣東省梅州市平遠縣；茶皂素標準品，購自成都曼斯特生物科技有限公司；AB-8大孔吸附樹脂，購自山東東鴻化工有限公司；甲醇、乙醇、正丁醇、正戊醇、冰乙酸和高氯酸（天津市大茂化學試劑廠，分析純）。

1.2 儀器與設備

KQ-250DE型數控超聲波清洗器，購自昆山市超聲儀器有限公司；SHZ-D（Ⅲ）型循環水真空泵、HH-4型數顯恒溫水浴鍋，購自邦西儀器科技有限公司；101-0BS型電熱恒溫鼓風干燥箱，購自湖南力辰儀器科技有限公司；UVmini-1280紫外可見分光光度計，購自島津儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 茶皂素的提取

油茶籽榨完油后的殘渣，烘干粉碎，過20目篩，準確稱取油茶籽粕粉末4份，各5.00 g，置于100 mL錐形瓶中，分別加入75 mL不同濃度的甲醇、乙醇、正丁醇和正戊醇，超聲輔助提取30 min，抽濾，濾渣重復提取步驟同上，共提取3次合并濾液[4]。濾液過AB-8大孔吸附樹脂柱，洗脫，收集洗脫液進行濃縮干燥，得茶皂素樣品。

1.3.2 茶皂素的含量測定

（1）標準曲線和回歸方程的建立。準確稱取茶皂素標準品0.015 0 g，溶于甲醇并定容至50 mL，備用。準確稱量香草醛0.506 1 g，溶于冰醋酸并定容至10 mL，備用[5]。精密量取茶皂素標準液0、0.2、0.4、0.6、0.8 mL和1.0 mL于6支比色管中，水浴蒸干，再向每支比色管加0.8 mL高氯酸、0.2 mL已配好的香草醛-冰醋酸溶液，70 ℃水浴30 min，然后冰浴5 min后向各比色管加入5 mL冰醋酸，550 nm處測定吸光值[6-8]。以吸光度為縱坐標（y），標準溶液質量濃度為橫坐標（x），繪制標準曲線。

（2）茶皂素含量測定。準確稱取茶皂素樣品0.015 0 g，溶于甲醇并定容至50 mL為樣液，備用。按上述標準曲線的建立條件進行樣液的吸光度測定，將吸光度代入回歸方程得樣品中茶皂素的含量。根據公式（1）計算茶皂素的提取率。

2 結果與分析

2.1 標準曲線的繪制

在吸收波長550 nm處經香草醛-冰醋酸顯色，測定不同濃度的茶皂素標準品反應液的吸光度。以茶皂素標準液濃度（mg/mL）為橫坐標，吸光度為縱坐標，制作標準曲線，得到回歸方程y=3.019x+0.008 9，R2=0.998 4。

2.2 不同濃度醇類對提取率的影響

檢測所用的4種醇類在濃度40%～90%時對提取率的影響，將提取液純化干燥后得到茶皂素樣品，測定吸光度代入標準曲線方程得到提取量，結果見表1。

表1 不同濃度醇溶劑的提取率表

結果表明：同濃度下乙醇提取率最高，其次為甲醇、正戊醇，正丁醇最低，各醇類的提取率隨濃度的升高而增大為基本趨勢，甲醇和乙醇在濃度達到60%以后提取率變化不明顯，達到90%時呈現下降趨勢；正戊醇在40%～80%時，提取率隨濃度增加而升高，濃度達到90%時呈現下降趨勢；正丁醇在40%～90%時，提取率隨濃度增加而升高，不同于其他三者在濃度為90%時，提取率均下降的趨勢。在濃度達到90%時，各醇類對提取率影響差距最小，提取率趨近一致。

3 結論

通過試驗對比甲醇、乙醇、正丁醇和正戊醇在不同濃度下對油茶籽粕中茶皂素提取率的結果，得出結論：提取劑濃度相同時，乙醇的提取率最高，其次為甲醇、正戊醇、正丁醇；不同濃度醇提時，甲醇和乙醇在濃度達到60%以后提取率變化不大，本著節約成本原則以60%為最佳提取濃度；正戊醇最佳提取濃度為80%；正丁醇最佳提取濃度90%。本研究結果表明，實驗的4種醇中，同濃度下乙醇的提取率最高，正丁醇的提取率最低。以最佳經濟效益為指標，選擇最佳提取醇類為乙醇且濃度60%，此條件下驗證試驗提取率為4.52%。