用蛋白質(zhì)羰基含量評價抗氧化保健食品的研究

李衛(wèi)國

在現(xiàn)代社會，衰老一直是困擾每個女性的問題。為了延緩衰老，都想盡辦法，如去美容院、打美容針、做手術(shù)、吃保健品等。其中抗氧化保健品是最常用的手段。抗氧化保健食品之所以有延緩衰老的作用，主要是因為該種保健品對人體內(nèi)的蛋白質(zhì)有保護功能。但也恰恰因為這個原因，許多不法商家為盈利，許多產(chǎn)品并沒有達到國家生產(chǎn)標準，針對這一情況，對抗氧化保健食品進行檢測勢在必行。蛋白質(zhì)羰基含量與人體衰老程度有著直接關(guān)系，蛋白質(zhì)羰基含量越多，表明人體越衰老。所以本次研究將三種抗氧化保健食品喂給老齡小白鼠，然后通過2.4-二硝基苯肼比色法測定白鼠體內(nèi)的蛋白質(zhì)羰基含量，建立以蛋白質(zhì)羰基含量為檢測指標的評價抗氧化保健食品質(zhì)量的方法。

實驗材料

實驗儀器：上海精科公司生產(chǎn)的型號為HI- 77s的分光光度計；北京時代北利離心機有限公司生產(chǎn)的型號為J GG- 38s離心機。

實驗試劑：蛋白酶抑制劑、N- 2-羥乙基哌嗪- 2-乙磺酸、鹽酸胍、2.4-二硝基苯肼。

實驗動物：昆明種50周齡雌性小鼠4只。本實驗所用動物均來自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物所繁育場提供的健康二級昆明種小鼠（動物許可證編號：XCK97089）。

實驗方法

首先取1個小白鼠體內(nèi)組織，然后將其放入5毫升的勻漿緩沖液當(dāng)中，然后利用J GG-38s離心機對其進行攪碎處理，然后將其放入溫室當(dāng)中10min，等待檢測。

然后將另外三只小白鼠分別喂入三種不同的氧化保健食品，經(jīng)過24小時后，將其殺死，取出體內(nèi)組織，然后重復(fù)上述試驗步驟，等待2.4-二硝基苯肼比色法的測定。

實驗測定

在上述處理好的白鼠組織中加入3ml2.4-二硝基苯肼的溶液，室溫下放置1個小時，之后加入2ml的N- 2- 羥乙基哌嗪- 2-乙磺酸和3ml的蛋白酶抑制劑，再次靜置1個小時，然后進行過濾，得到碎組織，加入鹽酸胍溶液，并充分震蕩，最后用HI- 77s的分光光度計進行吸光度測定，以摩爾消光系數(shù)計算蛋白質(zhì)羰基含量。

結(jié)果分析

測定結(jié)果如表1所示。

從表1中可以看出，小白鼠在沒有喂過抗氧化保健品之前，其蛋白質(zhì)羰基含量為0.85±0.10 nmol/mg；而喂過抗氧化保健品之后，三只小白鼠的蛋白質(zhì)羰基含量分別為0.62±0.10 nmol/mg、0.83±0.10 nmol/mg、0.76±0.10 nmol/mg，與之前對比，三只小白鼠的體內(nèi)的蛋白質(zhì)羰基含量均有所降低，但是下降的程度有所不同。首先小白鼠2號體內(nèi)的蛋白質(zhì)羰基含量下降的最多，說明喂給小白鼠2號的抗氧化保健品功效最好；其次是小白鼠4號，其體內(nèi)的蛋白質(zhì)羰基含量下降了0.09±0.10nmol/ mg，說明喂給小白鼠4號的抗氧化保健品存在一定延緩衰老的功效；最后是小白鼠3號，其體內(nèi)的蛋白質(zhì)羰基含量較之前沒有明顯的下降，說明喂給小白鼠3號的抗氧化保健品幾乎沒有什么功效，質(zhì)量完全不過關(guān)。

綜上所述，抗氧化保健食品是當(dāng)前主要的抗衰老產(chǎn)品之一。因其具有巨大市場潛力，市面上的抗氧化保健食品的質(zhì)量參差不齊，所以必須對其進行質(zhì)量檢測。本次研究將蛋白質(zhì)羰基含量作為衡量標準，通過2.4-二硝基苯肼比色法測定白鼠體內(nèi)的蛋白質(zhì)羰基含量變化情況，以此來判斷產(chǎn)品的功效。