食品中防腐劑的液相色譜分析

虞葉道 趙舒景

食品添加劑在飲料行業中具有重要作用。防腐劑是飲料中主要的添加劑，它們能夠抑制微生物的生長，延長飲料的保質期。我國食品添加劑使用衛生標準中，對允許使用品種、使用范圍以及最大使用限量均有明確規定，但隨著飲料品種和添加劑種類的日益增多，存在食品添加劑濫用的趨勢，對人體健康造成一定的風險。為保障食品安全，需要對飲料中這些食品添加劑的含量進行檢測。近年來，有關食品添加劑的檢測方法研究很多，主要涉及有液相色譜法、氣相色譜法、液相色譜-質譜法。本研究針對蘋果醋飲料中苯甲酸鈉、山梨酸鉀、水楊酸、鄰苯基苯酚、對氯間二苯酚等5種常見的防腐劑， 利用高效液相色譜法進行檢測，方法操作簡單、快速，適用于食品防腐劑的檢測。

實驗部分

實驗儀器與試劑。高效液相色譜儀（1200LC安捷倫公司）；數控超聲波清洗機（TH- 600BQ濟寧天華電子儀器公司）。

苯甲酸鈉、山梨酸鉀、水楊酸、鄰苯基苯酚、對氯間二苯酚、乙酸銨試劑均為分析純，甲醇為色譜純。超市購買的蘋果醋。

溶液的配制。準確稱取 0.77 g乙酸銨，加水溶解并定容至 500 mL容量瓶中，得到0.02 mol/L的乙酸銨溶液。

準確稱取苯甲酸鈉，山梨酸鉀，水楊酸，鄰苯基苯酚，對苯基苯酚，對氯間二苯酚，聯苯各0.2 g，溶解后用甲醇定容至100 mL的容量瓶中，從中移取10 mL溶液，用甲醇定容至100 mL的容量瓶中得到各物質濃度為200 mg/ L的混合標準溶液。

樣品處理。稱取蘋果醋5.0 g，置于50 mL離心管中，加入甲醇10 mL，超聲提取5 min，用稀氨水或鹽酸溶液調節pH至7左右，用甲醇溶液定容至25 mL，再用0.45 μm濾膜過濾后進行分析。

色譜條件。色譜柱：Eclipse XDB- C18（4.6 mm× 250 mm，5 μm）；柱溫：30℃；進樣量：5 μL；波長：230 nm；A為甲醇，B為0.02 mol/L乙酸鈉溶液，pH為6.5，梯度洗脫條件見表1。

實驗結果與討論

物質的定性分析。通過液相色譜測得苯甲酸鈉，山梨酸鉀，水楊酸，鄰苯基苯酚，對苯基苯酚，對氯間二苯酚，聯苯標準溶液的出峰時間，然后根據各樣品的保留時間找出蘋果醋中相對應峰的保留時間從而進行定性分析。標準樣品各物質的保留時間見表2。

將配制的標準系列混合樣注入液相色譜，得到圖1，按保留時間的順序，它們分別是苯甲酸鈉，山梨酸鉀，水楊酸，鄰苯基苯酚，對苯基苯酚，對氯間二苯酚，聯苯。

蘋果醋樣品的液相色譜圖見圖2。從保留時間（表3）對比分析，可以看出，蘋果醋中含有苯甲酸鈉，山梨酸鉀，水楊酸，鄰苯基苯酚，對氯間二苯酚。

定量分析。在用保留時間進行定性分析后，在上述同樣操作條件和液相色譜條件下，用外標法來對蘋果醋中的苯甲酸鈉，山梨酸鉀，水楊酸，鄰苯基苯酚，對氯間二苯酚的含量進行測定。

配制5個不同質量濃度的混合標準溶液，分別為20，40，60，80和100μg/mL，在最佳色譜條件下進行測定。結果表明，在 20～100μg/mL范圍內線性關系良好，線性回歸方程和線性相關系數見表4。

因此，根據蘋果醋色譜圖中各峰的峰面積可以求出蘋果醋中各防腐劑的含量，見表5。

精密度和回收率的測定。在蘋果醋樣品中添加一定量的防腐劑標準溶液，樣品處理后，色譜進樣分析，連續測定3次，測定結果見表6。結果表明該實驗方法有較好的精密度和回收率。

本文利用高效液相色譜檢測的方法，對蘋果醋中苯甲酸鈉、山梨酸鉀、水楊酸、鄰苯基苯酚、對氯間二本酚進行了分析測定，含量分別為 1.26 mg/kg，0.014 mg/kg，3.6 mg/kg，1.24 mg/kg，6.9 mg/kg，本實驗方法檢測時間短，靈敏度高，檢測性能好，能夠滿足飲料中防腐劑的檢測要求。