潰瘍性結腸炎患者糞便中鈣衛蛋白、基質金屬蛋白酶-9及髓過氧化物酶水平檢測的臨床意義

楊錢章

作者單位： 315450浙江省余姚，余姚市紅十字醫院

潰瘍性結腸炎是臨床較為常見的一種腸道菌群參與，機體異常免疫介導的一種腸道慢性非特異性炎癥性疾病[1]。目前臨床對該病病情評估方法主要包括臨床評分及實驗室檢查等指標，但均不能直觀的反應患者腸道炎癥，而且結果容易受到其他非腸道因素的干擾。由于該病以結腸黏膜層、黏膜下層炎癥為主要病理特征，同時伴有單核細胞、中性粒細胞在固有膜內的浸潤，造成腸黏膜破壞，這就使得腸黏膜的炎癥標志分子能夠透過受損腸黏膜進入腸腔，進而通過糞便排出體外。因此通過檢測患者糞便中的炎性標志分子不僅能夠直觀的反應病情，而且具有取樣方便及可重復檢測等優點。研究表明，鈣衛蛋白（Cal）、基質金屬蛋白酶-9（MMP-9）、髓過氧化物酶（MPO）與潰瘍性結腸炎病情進展密切相關[2]，本研究旨在分析潰瘍性結腸炎患者糞便中Cal、MMP-9及MPO水平檢測意義，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集 2014年1月至2016年7月浙江省余姚市紅十字醫院收治的潰瘍性結腸炎患者77例（觀察組），均符合《炎癥性腸病診斷及治療的共識意見（2012）》潰瘍性結腸炎診斷標準[3]；排除標準：（1）有使用糖皮質激素、免疫抑制劑治療者；（2）伴有系統性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎等自身免疫異常性疾病者；（3）伴有其他慢性炎癥、惡性腫瘤患者。

觀察組男39例，女38例；年齡21～49歲，平均（35.1±7.4）歲。另選擇同期在本院進行體檢的健康患者42例作為對照組，均為成年健康體檢者，既往無慢性病、家族遺傳性病、自身免疫性疾病及腫瘤病史，肝腎功能正常。對照組男23例，女19例；年齡20～48歲，平均（35.4±6.2）歲。兩組患者基礎資料差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法 觀察組根據Mayo評分系統對潰瘍性腸炎活動度進行評估，≤2分為緩解期，3～5分為輕度活動期，6～10分為中度活動期，11～12分為重度活動期。觀察組患者入院后，腸鏡檢查前約3 d，采集5～10 g糞便，對照組行腸鏡檢查前留取5～10g糞便。糞便標本于―20℃保存，在72 h內檢測兩組Cal、MMP-9及MPO水平。其中Cal和MMP-9水平采用ELISA法進行檢測，試劑盒購自武漢新啟迪生物科技有限公司；MPO水平采用紫外分光光度法檢測，試劑盒購自南京建成生物科技有限公司。

1.3 統計方法 數據采用SPSS19.0軟件進行處理，計量資料采用均數±標準差表示，采用t檢驗；采用多因素Logistics回歸分析評估Cal、MMP-9、MPO水平與潰瘍性腸炎病情的關系。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 觀察組病情分型 觀察組77例患者中有緩解期8例，輕度活動期29例，中度活動期34例，重度活動期6例。

2.2 兩組Cal、MMP-9及MPO水平觀察組患者Cal、MMP-9及MPO水平均顯著低于對照組，差異均有統計學意義（均P＜0.05）。見表1。

2.3 觀察組不同活動度患者指標比較

觀察組糞便中Cal、MMP-9及MPO水平由低至高依次為緩解期、輕度活動期、中度活動期和重度活動患者，差異均有統計學意義（均P＜0.05）。見表2。

2.4 多因素Logistics回歸分析結果Cal、MMP-9及MPO水平均與潰瘍性腸炎疾病活動情況呈顯著正相關（均P＜0.05）。見表3。

3 討論

潰瘍性腸炎患者腸黏膜屏障會發生改變，刺激中性粒細胞透過損傷的腸黏膜進入腸腔，而使其能夠在糞便中被檢測到。在這種前提下，糞便中的中性粒細胞的衍生蛋白理論上可以作為腸道炎癥的評估指標[4]，Cal、MMP-9 以及 MPO均為糞便中的中性粒細胞的衍生蛋白。此外，當前國內外對潰瘍性腸炎診斷的方法包括病史采集、體格檢查、實驗室檢查、影像學、內鏡檢查和組織細胞學等多種手段綜合而對結果做出診斷。但由于患者的臨床癥狀、體征極易受到病情以外的其他主觀因素的影響，而血常規及血沉等指標的特異性較差，其他診斷方法也存在各自的不足，存在各方面局限性。

MMP-9能夠參與基底膜膠原的代謝，造成細胞外基質的降解，進而通過激活P53對細胞生長產生抑制作用，促使細胞凋亡，該蛋白過度表達會引起機體腸黏膜的損傷[5]。本研究結果顯示，觀察組MMP-9水平顯著低于對照組，糞便中MMP-9水平由低至高依次為緩解期、輕度活動期、中度活動期和重度活動期，多因素 Logistics回歸分析結果表明MMP-9水平與潰瘍性腸炎疾病活動情況呈顯著正相關。這一結果與上述研究結論基本一致，同時也提示MMP-9可以用于潰瘍性結腸炎的活動性評估。

表1 兩組糞便Cal、MMP-9及MPO水平比較

表2 觀察組不同活動性潰瘍性腸炎患者糞便中Cal、MMP-9、MPO水平比較

表3 多因素Logistics回歸分析結果

Cal蛋白是由中性粒細胞產生的一種具有抗蛋白酶活性的中性粒細胞衍生蛋白，其性質較為穩定，不會被腸腔、糞便中的細菌或者酶降解。本研究觀察組Cal水平均顯著低于對照組，糞便中Cal水平由低至高依次為緩解期期、輕度活動期、中度活動期和重度活動期，多因素Logistics回歸分析結果表明Cal水平與潰瘍性腸炎疾病活動情況呈顯著正相關。這一結果提示Cal蛋白可作為潰瘍性結腸炎活動性的重要評估依據。這一結論與相關研究[6-7]認為糞便中Cal水平與內鏡疾病活動評分相關基本一致。

MPO作為中性粒細胞釋放的另一種蛋白，是在中性粒細胞被激活后通過脫顆粒作用將其釋放到細胞外或吞噬小體內，繼而催化生存一系列活性氧分子造成機體組織損傷，因此糞便中的MPO水平間接反應了機體的炎性水平。本研究結果也得出了MPO水平與潰瘍性腸炎疾病活動情況呈顯著正相關的結論。

綜上所述，糞便中Cal、MMP-9及MPO水平能夠用于潰瘍性結腸炎活動性的評估，對該病臨床診斷及病情評估具有重要意義。