MMP—2與NF—KB在肺癌侵襲轉移中的作用研究

潘兆寶 吉華青 韓麗芳 董安山 史立宏

摘要 目的：觀察在肺癌組織中基質金屬蛋白酶MMP-2和NF-KB的表達，探討MMP-2與NF-KB在肺癌侵襲轉移中的作用。方法：收治80例癌肺患者作為觀察組，67例肺癌旁正常患者作為對照組，用免疫組織化學方法檢測肺癌組織中MMP-2和NF-KB的表達。結果：觀察組和對照組MMP-2的表達率分別為20%（16/80）、71.6% （48/67）；觀察組和對照組NF-KB蛋白的表達率分別為68.7%（55/80）、35.8%（24/67）。肺癌分化程度、淋巴結轉移及術后生存時間與MMP-2和NF-KB蛋白的表達水平有很大關系。MMP-2表達水平和NF-KB負相關（P<0.05）；患者的MMP -2蛋白表達水平低以及NF-KB蛋白表達水平高，會降低患者的平均生存時間以及5年生存率（P<0.05）。結論：MMP-2的低表達以及NF-KB蛋白的高表達在肺癌侵襲轉移中有直接影響，MMP-2低表達可促使NF-KB蛋白信號激活，促進肺癌侵襲轉移。

關鍵詞 肺癌；MMP-2蛋白；NF-KB；侵襲轉移

目前在肺癌治療中較難解決的問題之一是惡性腫瘤的侵襲及轉移。在腫瘤的侵襲轉移過程中基質金屬蛋白酶MMP-2和NF-KB（核因子KB）的表達起到了很重要的作用[1-3]，本研究通過對80例癌肺患者和67例肺癌旁正常患者的MMP-2和NF-KB的表達水平比較，分析MMP2與NF-KB在肺癌侵襲轉移中的作用，現報告如下。

資料與方法

2014年10月-2015年10月收治80例癌肺患者作為觀察組及67例肺癌旁正常患者作為對照組。80例癌肺患者中男45例，女35例；年齡32～74歲，平均52.8歲；均未術前無化療或放療患者。67例肺癌旁正常患者中男37例，女30例；年齡33～ 72歲，平均50.5歲。根據1997年公布的修訂分期標準，35例鱗癌，45例腺癌；低分化31例，中分化30例，高分化19例；36例I+Ⅱ期患者，44例Ⅲ+Ⅳ期患者。44例淋巴結陽性轉移，36例陰性轉移。完整隨訪78例，隨訪時間2015年11月-2016年5月，以手術日期到隨訪結束日期記為生存時間，或者囚復發、轉移死亡的日期為生存時間，見表1。

處理方法：①免疫組織化學法：用二甲苯脫蠟和梯度乙醇水化兩組的石蠟切片，浸泡3%甲醇一過氧化氫溶液20min，抗原修復12min，用購自北京中杉公司的免疫組化sP試劑盒和DAB顯色試劑，10～15min室溫下H202氧化物進行染色。陽性對照物為PBS。②結果判定：胞膜或胞質染成棕色為陽性反應，NF-KB以細胞質和（或）細胞核出現棕黃色顆粒為陽性。以200個細胞作為每張切片的計數基數，統計不同級別陽性細胞所占的百分比。O分為胞膜或胞質無染色患者；1分為胞膜或胞質染色淺棕患者；2分為胞膜或胞質染色深棕患者。不同級別陽性細胞所占的百分比：0分為0%～ 5%；1分為6%～25%；2分為26%～50%：>50%為3分。胞膜或胞質染色分數不同級別陽性細胞所占的百分比分數的得分作為淋巴結轉移為陰陽性的標準。強陽性>6分，中等陽性4～6分，弱陽性2～3分，陰性O～1分。陰性或弱陽性為低表達，中等陽性或強陽性為高表達。

統計學處理：采用SPSS 20.0數據處理軟件對所得數據資料進行統計學分析。所有計量資料數據采用（x±s）表示，免疫組織化學染色結果與臨床病理參數計數資料采用X2檢驗。MMP-2與NF-KB蛋白表達的相關關系采用Spearman相關分析，采用Kaplan-Meier曲線和Log-rank檢驗進行生存分析，P<0.05為差異有統計學意義。

結果

基質金屬蛋白酶MMP-2在肺癌和正常肺組織中的表達比較：80例癌肺患者基質金屬蛋白酶MMP-2呈陰性或少數微弱陽性表達64例，高表達16例，表達率20%；65例癌旁正常患者呈陰性或少數微弱陽性15例，陽性表達48例（71.6%），差異有統計學意義（P<0.05），見表2。

NF-KB在肺癌和正常肺組織中的表達比較：80例癌肺患者NF-KB呈陰性或少數微弱陽性表達28例，高表達52例，表達率65%，在高倍顯微鏡下腫瘤細胞的胞質或胞核成棕黃色；67例正常肺組織中陰性或少數微弱陽性表達43例，高表達24例（44.7%），兩組差異有統計學意義（P<0.05），見表3。

MMP-2與NF-KB蛋白表達與臨床病理特征關系：MMP-2與NF-KB蛋白的陽性表達與性別、腫瘤大小以及吸炯史無明顯關系（P>0.05），MMP-2陽性表達隨肺癌分化變高而變高，反之NF_KB陽性表達隨隨肺癌分化變高而降低（P<0.05）。TNM分期增加，MMP-2陽性表達下降，NF-KB陽性表達上升（P<0.05）。由此可以看出MMP-2與NF-KB蛋白的表達呈負相關，見表4。

MMP-2和NF-KB蛋白表達與術后生存時間的關系：80例肺癌患者中78例完整隨訪，隨訪發現MMP-2低表達患者的術后生存時間低于高表達患者生存時間，NF-KB高表達患者的術后生存時間低于高表達患者生存時間，總之患者的生存時間受MMP-2低表達和NF-KB高表達影響，見表5。

討論

MMP-2是基質金屬蛋白酶一種，是蛋白水解酶，可以降解如基底膜及其結締組織等細胞外間質，為腫瘤浸潤和轉移打開了第一道缺口。研究發現腫瘤組織中的MMP-2表達高于正常組織。核因子KB及NF-KB是真核細胞轉錄因子，NF-KB信號通路可以調控細胞增殖、分化和凋亡等重要生理功能，同時與腫瘤發生聯系密切。

綜上所述，MMP-2的低表達以及NF-KB蛋白的高表達在肺癌侵襲轉移中有直接影響。