濰坊地區新生兒遺傳代謝病串聯質譜篩查結果分析

裴薇， 鹿相花， 田維兵， 張蘭香， 張雪飛

新生兒遺傳代謝病篩查簡稱新生兒篩查，是指在新生兒群體中，用快速、簡便、敏感的檢驗方法，對一些危害兒童生命、導致兒童體格及智能發育障礙的遺傳代謝病進行篩檢，做出早期診斷，在患兒臨床癥狀出現之前，給予及時治療，避免患兒機體各器官受到不可逆損害的一項系統保健服務，是控制出生缺陷，提高出生人口素質的重要措施[1]。串聯質譜分析技術的引入作為新生兒遺傳代謝疾病篩查學科的最新進步[2-3]，使得“一次實驗檢測多種疾病”的全新篩查模式得以實現，使新生兒疾病篩查在內容和質量上都提高到一個新的水平[4]。濰坊市新生兒疾病篩查中心于2013年6月引入串聯質譜技術對全市的新生兒進行篩查，取得了良好的社會效益。本研究將2013年6月至2016年4月濰坊地區新生兒遺傳代謝病串聯質譜篩查結果進行分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 篩查對象為2013年6月23日至2016年4月30日在濰坊市各定點助產機構出生的活產新生兒，共77 974例。

1.2 方法

1.2.1 標本采集遞送 新生兒家長簽署知情同意書。按照《新生兒疾病篩查技術規范》要求，新生兒出生72 h并充分哺乳(至少6次)后，采足跟血制成干濾紙血片，每個血斑直徑≥8 mm，將血片懸空平置，并常溫下充分陰干，由各采血點統一遞送至濰坊市新生兒疾病篩查中心進行檢測。

1.2.2 串聯質譜技術檢測 本實驗室采用美國Waters公司的TQD串聯質譜儀和AB公司的AD3200串聯質譜儀，以及PE公司生產的非衍生化多種氨基酸、肉堿測定試劑盒。篩查指標共76個，其中包括11種氨基酸、31種酰基肉堿及相應比值，對26種遺傳代謝病進行檢測。

1.2.3 可疑陽性的召回復查和診斷 分析物檢測值明顯超出截斷值判定為可疑陽性，立即將可疑陽性患兒召回復查。根據指標超出截斷范圍的程度，結合臨床表現，進行串聯質譜、尿氣相質譜檢測和基因分析確診。診斷后轉入專案管理。

2 結果

2.1 篩查概況 2013年6月至2016年4月濰坊市活產新生兒301 252例，自愿選擇參加串聯質譜篩查77 974例，篩查率為25.88%；可疑陽性1 721例，篩查陽性率2.21%；實際召回1 254例，召回率72.86%；篩查出9種遺傳代謝病共計32例。

2.2 陽性病例 篩查確診病例32例，總發病率1/2 437，其中氨基酸代謝病13例，包括高苯丙氨酸血癥10例、高脯氨酸血癥3例；有機酸代謝病14例，包括甲基丙二酸血癥12例、戊二酸血癥Ⅰ型1例、3-甲基巴豆酰甘氨酸尿癥1例；脂肪酸氧化障礙5例，包括原發性肉堿缺乏癥3例、肉堿棕櫚酰轉移酶Ⅱ缺乏癥1例、短鏈酰基輔酶A脫氫酶缺乏癥1例。各病種發病情況見表1。除高苯丙氨酸血癥外22例確診病例的串聯質譜篩查結果及診斷情況見表2。

表1 濰坊地區串聯質譜篩查病種發病情況

3 討論

串聯質譜技術是通過檢測物質的質荷比對物質進行定性及定量的一種方法[1]。1990年美國Millintong教授將此技術用于遺傳代謝病檢測[5]。目前已廣泛應用于新生兒遺傳代謝病篩查及臨床檢測[6-8]。濰坊市新生兒篩查中心自2013年6月開始采用串聯質譜技術進行新生兒26種遺傳代謝病篩查，截止到2016年4月共篩查77 974例新生兒，確診陽性病例32例，總發病率1/2 437，高于全國發病率1/3 300[9-11]，浙江地區發病率1/5 626[12]，上海地區發病率1/3 529[13]。由此推斷，濰坊地區可能是遺傳代謝病的高發區。目前本地區篩查樣本量未能全面覆蓋，所以，目前的發病率能否代表本地區的真實情況尚需要擴大樣本量和增加篩查率來進一步驗證。

篩查確診的32例陽性病例，疾病譜覆蓋氨基酸、有機酸、脂肪酸三大類遺傳代謝病，包括甲基丙二酸血癥12例、高苯丙氨酸血癥10例、高脯氨酸血癥3例、原發性肉堿缺乏癥3例，以及戊二酸血癥Ⅰ型、3-甲基巴豆酰甘氨酸尿癥、肉堿棕櫚酰轉移酶Ⅱ缺乏癥、短鏈酰基輔酶A脫氫酶缺乏癥各1例。其中甲基丙二酸血癥發病率最高(1/6 498)，高于苯丙氨酸血癥的發病率(1/7 797)。

表2 22例確診病例的篩查結果以及診斷情況

甲基丙二酸血癥發病率地區差異較大，美國發病率為1/29 000[1]，臺灣地區發病率1/85 000[14]，浙江地區發病率1/64 708。目前報道的山東省內濟南地區發病率1/3 920[15]，淄博地區發病率1/4 207[16]，說明山東地區可能是甲基丙二酸血癥的高發區。

甲基丙二酸血癥患兒從新生兒期至成人期均可發病[17]，臨床表現各異，新生兒期發病的多表現為喂養困難、嘔吐、嗜睡、體質量不增、難治性酸中毒等；兒童或青少年期發病的常表現為認知能力下降、運動、語言、智力發育落后、倒退等；部分成人患者以精神及心理異常為首發癥狀[1]。目前濰坊地區甲基丙二酸血癥發病率偏高而篩查覆蓋率偏低，提示隱藏的陽性患者在臨床工作中并不少見[18]，建議各科室臨床醫生提高對遺傳代謝病的認識，對臨床表現疑似的高危患者及時進行串聯質譜檢查明確診斷[19]。

目前本地區確診的12例甲基丙二酸血癥患兒，11例經基因突變分析診斷為甲基丙二酸血癥合并同型半胱氨酸尿癥(cb1C型)，這與報道的常見類型相一致[20]；1例患兒未找到致病突變，根據血串聯質譜、尿液氣相色譜檢測結果以及臨床表現(病情進展快、常規治療無效、新生兒期死亡等)確診。

綜上所述，陽性病例的發現，提高了我們新生兒篩查醫生對疾病的認識以及報告審核的經驗，擴大了濰坊地區確診遺傳代謝病的疾病譜，推進了我市遺傳代謝病篩查工作，對降低出生缺陷發生率、積累相關疾病的診療經驗具有重要價值。新生兒串聯質譜遺傳代謝疾病篩查是早期發現該類疾病的有效方法，使患兒獲得早期的診斷和治療，避免和減少智力殘疾兒的發生，對于符合生育條件的患兒父母，再次育兒時可以指導產前診斷，從而達到優生優育，提高人口素質的最終目的。