血紅蛋白A2和胎兒血紅蛋白聯合檢測在兒童β—地中海貧血篩查中的應用價值

常劍鋒　羅宇婷　陳莉

[摘要]目的 探討血紅蛋白A2（HbA2）和胎兒血紅蛋白（HbF）聯合檢測在兒童β-地中海貧血（β-地貧）篩查中的應用價值。方法 選擇2015年1月～2017年10月我院收治的48例β-地貧患兒為實驗組，選同期于我院體檢的50例健康兒童作為參照組。觀察比較兩組血漿中HbA2和HbF含量，以基因檢測結果為金標準，利用受試者工作特征（ROC）曲線分析比較HbA2、HbF及兩者聯合曲線下面積（AUC）、最適界值點（cutoff值）、敏感度及特異度，并采用Logistic回歸分析HbA2和HbF對β-地貧患兒的診斷價值。結果 實驗組血清的HbA2和HbF含量分別為（5.12±0.65）%和（1.27±0.86）%，明顯高于參照組的（2.63±0.76）%和（0.49±0.38）%，差異均有統計學意義（P<0.05）。HbA2、HbF及兩者聯合的AUC分別為0.923、0.896和0.954，其中HbA2和HbF的cutoff值分別為3.5%和0.6%，兩者聯合診斷的靈敏度和特異度分別為97.92%和86.00%。二分類Logistic回歸分析結果表明，HbA2和HbF指標對診斷β-地貧患兒均有統計學意義（P<0.05），且HbA2的診斷價值顯著>HbF。結論 HbA2和HbF指標檢測在兒童β-地貧篩查中均具有一定的應用價值，且HbA2的診斷價值明顯優于HbF，兩者聯合診斷可大大提高診斷符合率。

[關鍵詞] β-地中海貧血；HbA2；HbF；患兒；診斷

[中圖分類號] R556.61 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2018）6（c）-0115-03

[Abstract]Objective To investigate the value of combined detection of hemoglobin A2 （HbA2） and fetal hemoglobin（HbF） in the screening of β-thalassemia in children.Methods A total of 48 children with β-thalassemia admitted in our hospital from January 2015 to October 2017 were selected as the experimental group and 50 healthy children undergoing physical examination in our hospital as the reference group.The levels of HbA2 and HbF in the two groups were observed and compared.The gene test results were taken as the gold standard and used the ROC curve to compare HbA2，HbF and the area under the curve（AUC），cutoff value，sensitivity and specificity，and used the Logistic regression to analysis HbA2 and HbF in children with β-thalassemia diagnostic value.Results.The levels of HbA2 and HbF in the experimental group were （5.12±0.65）% and （1.27±0.86）%，which were significantly higher than those in the reference group （2.63 ± 0.76）% and （0.49 ±0.38）%，respectively （P<0.05）.The AUC of HbA2，HbF and their combination were 0.923，0.896 and 0.954，respectively and the cutoff values of them were 3.5% and 0.6% respectively.The diagnostic sensitivity and specificity of HbA2 and HbF joint diagnosis were 97.92% and 86.00% respectively.Logistic regression analysis showed that both HbA2 and HbF were statistically significant in diagnosing β-thalassemia children （P<0.05），and the diagnostic value of HbA2 was significantly higher than that of HbF.Conclusion Detection of HbA2 and HbF in children with β-thalassemia screening has a certain value，and the diagnostic value of HbA2 was significantly better than HbF，a combination of the two can greatly improve the diagnostic accuracy.

[Key words]β-thalassemia；HbA2；HbF；Children；Diagnosis

β-地中海貧血（β-地貧）主要是由于β-珠蛋白基因異常導致β鏈的合成受到部分甚至完全抑制的具有遺傳性的一種血紅蛋白病，患兒一般出生時無明顯癥狀，多于嬰兒期發病[1-2]。有研究表明，β-地貧通常跟結構異常的血紅蛋白變異體一起出現，兩者會相互影響引起患兒出現輕重不一、更加多樣化的臨床表現[3]。目前對于該疾病臨床上還沒有切實有效的治療方法，故對人群中β-地貧攜帶者的篩查為控制本病的重要措施[4-5]。基因診斷是當前作為可靠的診斷方式，但由于成本較高不適合人群的普遍篩查，而常規的檢測MCH、MCV和RDW雖然成本低且操作簡便，但其靈敏度及特異度不高，容易出現誤診和漏診情況[6-7]。本研究探討HbA2和HbF聯合檢測在兒童β-地貧篩查中的應用價值，現將結果報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇2015年1月～2017年10月我院收治的48例β-地貧患兒為實驗組，選同期于我院體檢的50例健康兒童作為參照組。所有研究對象及家屬知情同意并簽署知情同意書，且本研究已經我院醫學倫理委員會批準。實驗組納入標準：①基因診斷確診為β-地貧患兒；②無其他感染性或血液性疾病的患兒；③無并發嚴重內科慢性疾病的患兒。參照組納入標準：①基因診斷無珠蛋白基因異常的兒童；②體檢結果為健康的兒童。實驗組男30例，女18例；年齡3～14歲，平均（7.69±3.64）歲。參照組男28例，女22例；年齡2～15歲，平均（7.85±3.97）歲。兩組的年齡和性別等一般資料比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

所有研究對象于清晨空腹狀態下取2 ml EDTA-K2抗凝靜脈血，混合搖勻后，放置室溫環境可行檢測操作。利用capillarys 2 sebia fles piercing全自動毛細管血紅蛋白電泳儀和配套試劑，對HbA2和HbF進行檢測。其中HbA2含量>3.5%，HbF含量>2.6%為陽性結果。所有操作均嚴格按照操作說明書進行，以確保檢測結果的準確性和真實性。

1.3統計學方法

選擇SPSS 22.0軟件對本研究的數據進行統計分析，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，采用t檢驗；利用ROC曲線及Logistic回歸分析HbA2、HbF及兩者聯合診斷β-地貧患兒的價值，取Youden指數最大值作為cutoff值，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1兩組HbA2和HbF含量的比較

實驗組血清的HbA2和HbF含量分別為（5.12±0.65）%和（1.27±0.86）%，明顯高于參照組的（2.63±0.76）%和（0.49±0.38）%，差異均有統計學意義（P<0.05）（表1）。

2.2繪制ROC曲線分析

HbA2、HbF及兩者聯合AUC分別為0.923、0.896和0.954，其中HbA2的cutoff值為3.5%，HbF的cutoff值為0.6%，兩者聯合診斷的靈敏度和特異度分別為97.92%（47/48）和86.00%（43/50）（表2、圖1）。

2.3二分類Logistic回歸分析

將HbA2和HbF診斷兒童β-地貧的作用大小利用二分類Logistic回歸分析進行方程擬合，方程中兩項指標對診斷均有統計學意義（P<0.05），且HbA2的診斷價值顯著>HbF（表3）。

3討論

β-地貧為我國南方較為常見的一種單基因遺傳病，且攜帶者數量較多，目前仍無有效的根治方法，故對兒童開展大規模的篩查，并完善篩查方案選擇高效的聯合篩查方案對該疾病的早預防和早發現極其重要[8-9]。基因診斷是診斷地貧的金標準，但由于檢測成本高，尚不能完全覆蓋α或β-型珠蛋白基因，故并不適合用于大規模的篩查[10-11]。地貧患者通常會發生多樣化的血紅蛋白變體，相關研究表明，通過對紅細胞一些參數如MCH和MCV等進行篩查地貧患者有一定的可行性，但準確性不高容易發生漏診和誤診的情況[12-13]。有研究表明，β-地貧患兒體內HbA2和HbF含量普遍比正常人有所升高，這兩項指標變化可作為β-地貧的重要特征[14]。本研究探討HbA2和HbF聯合檢測在兒童β-地貧篩查中的應用價值，為臨床診斷提供依據。

本研究結果顯示，實驗組血清的HbA2和HbF含量分別為（5.12±0.65）%和（1.27±0.86）%，明顯高于參照組的（2.63±0.76）%和（0.49±0.38）%，差異均有統計學意義（P<0.05），提示β-地貧患兒血清中HbA2和HbF含量明顯高于健康兒童。β-地貧患兒體內因為β型珠蛋白基因異常導致β珠蛋白鏈合成受到抑制，而δ和γ型珠蛋白基因由于機體代償性增加轉錄過程，合成相應的珠蛋白以及α珠蛋白均有所增加，因此導致生成HbA2和HbF含量有所增加[15-16]。此外，本研究將HbA2和HbF診斷兒童β-地貧的作用利用二分類Logistic回歸進行分析，結果顯示兩項指標的回歸系數B值均>0，提示兩項指標和β-地貧患兒均有密切關系；兩項指標的相關危險因素比值OR值均>1，其中在其他條件不變的情況下，β-地貧患兒的HbA2含量發生異常的危險是正常人兒童的10.293倍，明顯高于HbF的4.225倍，提示HbA2和HbF指標對診斷β-地貧患兒均有一定的診斷價值，且HbA2的診斷價值顯著高于HbF，與石文等[17]的研究結果一致。

本研究以基因檢測結果為金標準，繪制ROC曲線分析HbA2和HbF及聯合診斷兒童β-地貧的應用價值，結果顯示HbA2、HbF及兩者聯合的AUC均>0.9，表明三者均具有較高的診斷價值，與相關文獻報道基本一致[18-20]。其中HbF的AUC為0.896，具有一定的診斷價值，但其靈敏度較低（81.25%），診斷準確率較低，容易造成漏診情況；HbA2的AUC為0.923，靈敏度和特異度分別為97.92%和86.00%，具有較高的診斷價值；HbA2和HbF聯合診斷的AUC最大達到0.954，且其靈敏度和特異度分別為97.95%和85.71%，明顯提高了診斷符合率。此外，本研究結果中HbA2和HbF的cutoff值分別為3.5%和0.6%，即HbA2含量為3.5%，HbF含量為0.6%時具有較高的靈敏度和特異度，診斷兒童β-地貧的準確性最好。

綜上所述，HbA2和HbF指標檢測在兒童β-地貧篩查中均具有一定的診斷價值，且HbA2的診斷價值明顯優于HbF，兩者聯合診斷可以大大提高診斷符合率，可有效降低篩查過程中出現的誤診及漏診情況，在臨床上值得進一步推廣應用。

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（收稿日期：2018-03-06 本文編輯：崔建中）